双元载体

注解

双元载体系统，包括两个质粒，一个是带有T-DNA的微型质粒（双元Ti载体），一个是带有Vir区的辅助质粒。根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)是一种革兰氏阴性土壤细菌，能够通过感染植物的伤口，将其Ti质粒上一段含有植物激素和冠瘿碱合成酶基因的DNA转移并整合至植物受体的基因组中。Ti质粒中的2个独立的区域决定DNA转移及整合：T-DNA区(transferredDNA)和vir区(virlence region)。基于Ti质粒这个结构特点，1983年Hoekema等提出双元载体策略：将去除致瘤基因的T-DNA区从Ti质粒中分离，放置在一个能在农杆菌和大肠杆菌中复制的穿梭质粒中。这个穿梭载体称为双元Ti载体。vir区则存在于一个已经除去T-DNA的Ti质粒中，在农杆菌中作为辅助质粒，通过反式激活使T-DNA转移到植物细胞基因组中。由于双元Ti载体的体积小而非常便于基因克隆操作，所以逐渐取代了其它形式的Ti载体，已成为植物基因工程中最重要的植物转化载体。

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