叶绿素铜
2013年2月17日卫生部公告2013年第2号批准叶绿素铜为食品添加剂新品种。
目录
中文名称
叶绿素铜
英文名称
Copperchlorophyll
功能
着色剂
使用范围及使用量
质量规格要求
1.生产工艺
以桑叶或者蚕沙提取的叶绿素与氯化铜为原料反应制得的食品添加剂叶绿素铜。
2.技术要求
2.1感官要求：应符合表1的规定。
表1 感官要求
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项目 |
要求 |
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青绿色到深绿色 |
||
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状态 |
蜡状或胶状固体 |
2.2技术要求：应符合表2的规定。
表2 理化指标
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项目 |
指标 |
检验方法 |
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叶绿素含量，w/% ≥ |
10 |
附录A 中A.4 |
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吸光比 |
3.2~4.0 |
附录A 中A.4 |
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干燥失重，w/% ≤ |
5.0 |
GB 5009.3直接干燥法a |
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总铜，w/% ≤ |
8.0 |
附录A 中A.5 |
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游离铜，w/% ≤ |
0.03 |
附录A 中A.6 |
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铅（Pb）/（mg/kg） ≤ |
10 |
GB 5009.12 |
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砷（以As计）/（mg/kg） ≤ |
3 |
GB/T 5009.11 |
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总汞（Hg）/（mg/kg） ≤ |
1 |
GB/T 5009.17 |
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镉（Cd）/（mg/kg） ≤ |
1 |
GB/T 5009.15 |
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0.05 |
附录A中A.7 |
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附录A 检验方法
A.1 安全警示
试验方法规定的一些试验过程可能导致危险情况。操作者应采取适当的安全和防护措施。
A.2 一般规定
本标准所用试剂和水，在没有注明其他要求时，均指分析纯试剂和GB/T 6682—2008中规定的三级水。试验中所用标准滴定溶液、杂质测定用标准溶液、制剂及制品，在没有注明其他要求时，均按GB/T 601、GB/T 602、GB/T 603的规定制备。试验中所用溶液在未注明用何种溶剂配制时，均指水溶液。
A.3 鉴别试验
A.3.1 物理性状
易溶于乙醚、丙酮和食用油等有机溶剂，不溶于水。水溶液呈绿色。溶解前带有叶绿素特有的臭味。
A.3.2 吸收峰的测定
取A.4.3.1 叶绿素含量测定中的试样液，试样液在405nm±3nm 和630nm±3nm 的两个波长范围内均有最大吸收峰。
A.3.3 铜离子试验
称取1 g 试样，置于已在800℃±25℃下灼烧至恒重的坩埚中，缓缓加热直至试样完全碳化。将碳化的试样冷却，用0.5 mL~1 mL 硫酸润湿残渣，继续加热至硫酸蒸汽逸尽，并在800℃±25℃的高温炉中灼烧残渣至恒重。在残渣中加入10mL 盐酸溶液（1+3），在水浴上加热溶解，过滤后滤液补充水至10mL。取5mL 此滤液，加入0.5mL二乙基二硫代氨基甲酸钠溶液（1g/ L），产生褐红色沉淀。
A.4 叶绿素含量及吸光比的测定
A.4.1 试剂和材料
A.4.1.1乙醚。
A.4.1.2 0.15mol/L磷酸氢二钠溶液:称取53.7g磷酸氢二钠（Na2HPO4·12H2O），加水溶解，稀释并定容至1000mL。
A.4.1.3 0.15mol/L磷酸二氢钾溶液:称取20.4g磷酸二氢钾（KH2PO4），加水溶解，稀释并定容至1000mL。
A.4.1.4磷酸盐缓冲液（pH7.5）:取21份0.15mol/L磷酸氢二钠溶液与4份0.15mol/L磷酸二氢钾溶液混合。
A.4.1.5氯化铜—甲醇溶液（A液）：5%；
A.4.1.6氢氧化钠—甲醇溶液（B液）：10%；
A.4.2 仪器和设备
分光光度计。
A.4.3 分析步骤
A.4.3.1 试样液制备
称取样品约1g（精确至0.000 2g）于小烧杯中，用适量无水乙醚（50mL~60mL）使之溶解，移于锥形瓶中，加入A液1mL，在50℃±2℃恒温水浴中加热回流15min；取下后再加入B液2mL，摇匀，继续回流20min；取下后冷却，加入少量水，摇匀，移入分液漏斗中；再用适量水分次洗涤锥形瓶瓶，洗液一并置于分液漏斗中，充分振摇后放置1h。
另准备一个预先盛有40mL无水乙醚的分液漏斗。待第一个分液漏斗中的液体分层后，将下层液体滤入该分液漏斗中，下层液体弃掉。滤纸用水洗涤数次至几乎无色，洗涤液并入第二个分液漏斗。
轻摇第二个分液漏斗进行提取，用水重复洗涤至乙醚层无色，静置15min，将下层溶液移入到250mL的容量瓶中，加水稀释到刻度，摇匀。精密量取1mL于50mL容量瓶中，用磷酸盐缓冲液（pH7.5）稀释至刻度，摇匀，即为试样液。
A.4.3.2 测定
取试样液置于1 cm 比色皿中，以磷酸盐缓冲液（pH7.5）做空白对照，用分光光度计在405nm±3nm 和630nm±3nm波长处测定吸光度。
A.4.4 结果计算
A.4.4.1叶绿素含量的质量分数w，按公式（A.1）计算：
式中：
E1 ——实际测定的试样液在405 nm±3nm波长处的吸光度；
m ——样品质量，g；
565 ——叶绿素的吸光系数；
12500——样品稀释倍数。
A.4.4.2吸光比以A计，按公式（A.2）计算：
式中：
E1——试样液在405 nm±3nm波长处测得的吸光度；
E2——试样液在630 nm±3nm波长处测得的吸光度。
实验结果以平行测定结果的算术平均值为准。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的2 %。
A.5 总铜含量
准确称取0.1g 试样，精确至0.000 2g，置于硅皿中，在不超过500℃下灼烧至无碳，用1滴~2滴硫酸湿润，再次灼烧。用质量分数为10%的盐酸溶液分3 次（每次5mL）煮沸溶解灰分，并过滤于100mL 容量瓶中，冷却后用水定容至刻度，此为试样液。除试样处理外，其他步骤按GB/T 5009.13规定的方法测定。
A.6 游离铜含量
试样处理：称取约0.1g样品，精确至0.000 2g，用20mL无水乙醚溶解于锥形瓶中，加水100mL，盖塞，振摇1min，移入125mL分液漏斗中，静置30min，将分液漏斗中的下层水溶液用双层定性滤纸过滤，如果滤液有颜色，再次用双层定性滤纸过滤，滤液即为试样液。
除试样处理外，其他步骤按GB/T 5009.13规定的方法测定。
A.7 丙酮溶剂残留
按照《中国药典2010版二部》附录Ⅷ P“残留溶剂测定法”进行测定。
