尿游离皮质醇
目录
概述
尿游离皮质醇由血液中游离皮质醇经肾小球滤过而来，因此基量与血浆中真正具有生物活性的游离皮质醇成正比。测定尿游离皮质醇可以有效、正确地反映肾上腺皮质的功能状态。留取24h尿量，用10ml冰醋酸作防腐剂。
尿游离皮质醇的医学检查
检查名称
尿游离皮质醇
分类
取材
尿游离皮质醇的测定原理
皮质醇为肾上腺皮质所分泌的糖皮质激素，标记抗原与样品中的抗原对特异抗体产生竞争抑制反应，当加入标记抗原和抗体的量恒定时，则带标记的结合物形成与抗原的含量成反比，根据标准曲线求出样品的含量。
试剂
（1）0.1mol/L pH7.0磷酸-氯化钠缓冲液（PBS）0.2mol/L NaH2PO4·2H2O 100ml，0.2mol/LNa2HPO4·12H2O 400ml，NaCl 9g，加水至1000ml。
（2）1g/L明胶-磷酸缓冲液（W/V）：简称1g/LGPS，贮于4℃。
（3）5g/L明胶-磷酸缓冲液（W/V）：简称5g/LGPS，贮于4℃。
（4）2.5g/L DCC溶液：葡聚糖T70 250mg，溶于PBS 100ml，加活性炭NoritA2.5g，搅拌或振摇1h，贮于4℃，使用时再用PBS10倍稀释。
（5）闪烁液：对联三苯（TP）4g，1.4-双-2-（5-苯基噁唑基）苯（POPOP）125mg，醋酸乙酯250ml，二甲苯1000ml，室温避光保存。
（6）抗体：皮质醇-C21-牛血清白蛋白为抗原免疫家兔，抗体的工作液浓度为1∶3800，对皮质酮和17-羟孕酮的交叉分别为10%和17%。
（7）氚标皮质醇：[1，2-3H]皮质醇，比活性（SA）＝148×1016Bq/mmol（40Ci/mmol），放化纯度＞95%。工作液用无水乙醇配成7000cpm/10μl，密封，贮存于4℃。
（8）皮质醇标准液：上海第九制药厂层析纯，工作液用无水乙醇配成2ng/100μl，密封，4℃保存。
操作方法
（1）尿样品测定：取万分之一的24h混合尿，用蒸馏水稀释至0.5ml，于10ml抽提管中，加二氯甲烷5ml和0.1mol/L NaOH 0.2ml，抽提5min，静止片刻弃去上层液，下层二氯甲烷抽提液用水洗2次，每次1ml，摇1min，离心1500r/min 3min，弃去水层，取二氯甲烷提取液双份各1ml（复管），45℃压缩空气吹干，加3H-皮质醇7000cpm/10μl，45℃吹干，各管加0.2ml抗体应用液（1∶3800用1g/L GPS稀释），摇匀置4℃过夜，以下步骤同标准管。
（2）标准曲线制作：0，0.1，0.3，0.6，1.0，2.0，4.0ng（各点做复管），各管加3H-皮质醇10ml，吹干，每管加抗体0.2ml，另取四管各加3H皮质醇10ml，分别加1g/L GPS 0.7和0.2ml其中二管作总脉冲测定管，另二管作非特异性测定（BN%）摇匀后，放4℃过夜。次日各管加5g/L GPS 0.1ml摇匀，再加2.5g/L DCC 0.5ml（总管T不加）。分离游离与结合物；摇匀4℃停放10min，3000r/min离心10min吸取上清液0.4ml，加到8ml闪烁液中，混旋1min，避光4h后，用液烁计数仪测量。
正常值
成人：206.9±44.1nmol/24h 尿 （范围129.7～303.6）
化验结果临床意义
（1）皮质醇增多增多症：血浆和尿皮质醇明显升高，血浆昼夜节律变化消失。
（2）异位产生ACTH的肿瘤：如燕麦型肺癌、胰、甲状腺、甲状旁腺、卵巢、睾丸、大肠、胆囊、乳腺、以及纵膈瘤等这种癌肿组织具有分泌ACTH样物质的功能，使促肾上腺皮质合成皮质醇，血浆中皮质醇则显著升高。
（3）垂体前叶机能亢进症：由于垂体前叶促激素的大量分泌，靶腺增生，血浆和尿皮质醇可升高。
（4）肾上腺皮质功能低下，如阿狄森、西蒙、席汉综合征，血浆和尿皮质醇含量减少。
（5）长期使用类固醇激素可通过负反馈抑制ACTH分泌，使肾上腺皮质处于抑制或萎缩、则血浆和尿皮质醇含量减少。
（6）单纯性肥胖、血浆和尿皮质醇含量略高或正常范围内。
（7）先天性肾上腺皮质增生症，因体内缺少某种酶如C20-22断裂酶3β-脱氢酶、17α-羟化酶11β羟化酶和18羟化酶等使皮质醇合成障碍，而皮质醇产生减少。
附注
（1）各管加入3H或标准必须吹干，然后加抗体，因为3H或标准是乙醇配制，否则会损害抗体。
（2）加定量的3H须根据实验情况而定（本文加7000cpm），在相应的范围内3H抗原加入量越少灵敏度就越高。
相关疾病
肺癌、先天性肾上腺皮质增生症
