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等密度离心

添加122字节, 2017年2月24日 (五) 13:12
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[[等密度离心]](isodensity centrifugation)
<b> 等密度离心</b>分离样品主要是根据被分离样品的<b>密度</b>。在这种离心分离方法中,要用介质产生一种密度梯度, 这种密度梯度覆盖了待[[分离物]]质的密度,这样,通过离心使不同密度的颗粒悬浮到相应的介质密度区。在这种[[梯度离心]]中,颗粒的密度是影响最终位置的惟一因素,因此用这种方法分离颗粒,主要是根据被分离颗粒的密度差异。只要被分离颗粒间的密度差异大于1% 就可用此法分离。
<b>[[蔗糖]]</b>或者<b>[[甘油]](</b>它们的最大密度是1.3g/cm3)通常可用于分离膜结合的[[细胞器]],如[[高尔基体]]、[[内质网]]、[[溶酶体]]和[[线粒体]]。在等[[密度梯度离心]]中蔗糖或甘油的梯度的作用与[[移动区带离心]]中梯度原理是不同的,在移动区带离心中梯度的惟一目的是减少样品的扩散, 即使是在[[离心管]]的底部,颗粒的密度也比介质大。相反,在等密度梯度离心中,使用的密度是足以阻止颗粒移动的密度,当颗粒达到与本身密度相同的密度区时就会停留在该区域。
离心分离密度大于1.3g/cm3的样品,如DNA、RNA,需要使用密度比蔗糖和甘油大的介质。重金属盐[[氯化铯]](CsCl)是目前使用的最好的离心介质,它在离心场中可自行调节形成浓度梯度,并能保持稳定。在氯化铯形成的密度梯度中,离心管顶部的密度为:1.65g/ cm3,底部为:1.75g/ cm3。因为DNA的密度是1.70g/ cm3,会停留在离心管的中部。
[[分类:生物]][[分类:实验]][[分类:离心]]
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