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灵芝多糖
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灵芝多糖(Ganoderma lucidum Polysaccharide)目前已分离到的有200多种,其中大部分为β –[[葡聚糖]],少数为α –葡聚糖,[[多糖]]链由三股单糖链构成,是一种螺旋状立体构形物,其立体构形和DNA、RNA相似,螺旋层之间主要以氢键固定,分子量从数百到数十万,除一小部分小分子多糖外,大多不溶于高浓度[[酒精]],在热水中溶解,大多存在于灵芝细胞内壁。灵芝多糖大多为异多糖,即除含有[[葡萄糖]]外,大多还含有少量[[阿拉伯糖]]、[[木糖]]、[[岩藻糖]]、[[鼠李糖]]、[[半乳糖]]等其他单糖。 灵芝多糖在国外亦在进行广泛、深入研究。
<b>[灵芝多糖的医疗保健价值]</b> 灵芝多糖是灵芝中最有效的成分之一,因此,也特别受到医药科技工作者的重视,研究报道也最多。现知灵芝多糖有广泛的药理活性,能提高机体免疫力,提高机体耐[[缺氧]]能力,消除[[自由基]],抑制[[肿瘤]]、抗[[辐射]],提高[[肝脏]]、[[骨髓]]、[[血液]]合成DNA、RNA、[[蛋白质]]能力,延长寿命,灵芝多糖还具有刺激[[宿主]]非特异性抗性、[[免疫]]特异反应以及抑制[[移植]]肿瘤[[生理]]活性的特性。多糖分子量大于1×104时显示强抑制肿瘤活性,活性强弱还与多糖链分叉的程度及支链上[[羟基]]的数量有关。对[[心血管疾病]]、[[气喘]]、过敏、[[神经衰弱]]、[[胃热]]等有显著效果,同时还具有降血压、降[[血脂]]、解[[血瘀]]、改善[[血液循环]]、[[皮肤]][[美容]]等作用。灵芝的多种药理活性大多和灵芝多糖有关。 <b>[灵芝多糖抑制肿瘤3种手段]</b>:
1.通过提高机体免疫力,使[[免疫细胞]]能在[[肿瘤发生]]早期把其杀死、吞噬;
3.降低[[肿瘤细胞]][[表面电荷]],肿瘤细胞表面电荷要比正常[[细胞]]高好几倍,表面电荷的降低,肿瘤细胞的分裂[[调节基因]]就能启动,从而可抑制肿瘤的无限、快速分裂能力.目前,灵芝多糖已被用作治疗肿瘤的药物之一。
==灵芝多糖的提取方法==
<b>一、[[灵芝菌]]丝体多糖的提取 </b>
<b>(一)材料 </b>
1.菌种:湖南省食用菌研究所提供的韩国灵芝母种。
磷酸二氢钾0.2% ph值自然
<b>(二)方法 </b>
1.种子培养:
2.发酵培养生产[[菌丝体]]。
3.测定干、湿菌丝体。
将发酵液进行离心,然后取其沉淀物,加人60%蔗糖,进行高速(3000转/分)[[密度梯度离心]]5分钟,取上层菌丝体,洗净蔗糖再压干,即得湿菌体,然后再将湿菌体于高温下烘干即为干菌体。分别称取其重量。
4.多糖的提取。
菌丝体[[预处理]]。取适量的灵芝湿菌体,用[[乙醇]]等有机溶剂进行处理,以除去湿菌体中的[[脂类]]物质,同时使[[糖苷酶]]失去活性,防止多糖的降解。
(2)用热水提取多糖。取上面经预处理的灵芝湿菌体,放人1:20的热水(95℃)中浸提,一次小时,连续浸提3次,合并3次的水浸提液减压、浓缩至一定体积,再用3倍体积的95%乙醇混合,静置10-12小时,再离心,最后加入75%的乙醇反复洗涤,以沉淀多糖。此沉淀物为粗多糖,其中混杂有蛋白质、色素、[[低聚糖]]等小分子杂质,一般要经过[[纯化]]。
(3)多糖的纯化,去蛋白质和deae纤维素[[柱层析]]。去蛋白质一般采用sevag法:加入0.2倍多糖溶液体积的[[氯仿]]和0.04倍体积的[[正丁醇]]混合振荡半小时进行分离,直至氯仿与水的界面无沉淀为止,且要重复处理2-3次才能有效除去多糖中的蛋白质。多糖纯化一般采用[[硼酸]]型deae纤维素柱层析法:取脱[[蛋白]]后的多糖,分别以0.025mol/l、0.1mol/l的[[硼砂]],0.1mol/l的[[氢氧化钠]]溶液进行洗脱,然后用0.2%恿铜[[硫酸]]液[[比色测定]]吸收度,收集有多糖的[[洗脱液]],再浓缩脱盐即得所需的多糖。
(4)多糖纯度的鉴定。
可用[[电泳法]]进行鉴定,如果存在单一带,说明为纯多糖。
5.多糖与多糖中蛋白质含量的测定:
取一定量菌丝体粗多糖,加水煮沸溶解,用sevag方法脱去蛋白考马斯[[亮兰]]法测其粗多糖中蛋白质和多糖的含量。测得菌丝体中粗多糖含17.01%、多糖含5.43%、蛋白质含量2.16%。
==灵芝[[子实体]]多糖的提取==
<b>(一)材料 </b>
1.菌种:韩国灵芝栽培种。