528,223
个编辑
更改
药敏试验
,无编辑摘要
仪器：[[接种环]]、[[酒精灯]]、打孔器、牛津杯、移液器、滴头
===二、实验准备===
<b>2.1 药敏片的准备：</b>购买或自制 2.1.1 制备方法：取新华1号定性滤纸，用打孔机打成6毫米直径的圆形小纸片。取圆纸片50片放入清洁干燥的[[青霉素]]空瓶中，瓶口以单层牛皮纸[[包扎]]。经15磅-20分钟[[高压]][[消毒]]后，放在37℃温箱或烘箱中数天，使完全干燥。 2.1.2 抗菌药纸片制作：在上述含有50片纸片的青霉素瓶内加入药液0.25毫升，并翻动纸片，使各纸片充分浸透药液，翻动纸片时不能将纸片捣烂。同时在瓶口上记录药物名称，放37℃温箱内过夜，干燥后即密盖，如有条件可[[真空干燥]]。切勿受潮，置阴暗干燥处存放，有效期3-6个月。 <b>2.2 药液的制备（用于商品药的试验）：</b>按商品药的使用治疗量的比例配制药液；如商品药百病消按其说明量治疗量0.01%饮水，可按这个比例配制药液，可取10毫克加入10毫升的水中混匀。此[[稀释液]]即为用于做药敏试验的药液。
===三、实验操作方法===
<b>3.1 药敏片法</b>
3.1.1 在“超净台”中，用经（酒精灯）火焰[[灭菌]]的接种环挑取适量[[细菌培养]]物，以划线方式将细菌涂布到平皿培养基上。具体方式；用灭菌接种环取适量细菌分别在平皿边缘相对四点涂菌，以每点开始划线涂菌至平皿的1/2。然后，找到第二点划线至平皿的1/2，依次划线，直至细菌均匀密布于平皿。（另：可挑取待试细菌于少量[[生理盐水]]中制成细菌[[混悬液]]，用灭菌棉拭子将待检细菌混悬液涂布于平皿培养基表面。要求涂布均匀致密）
3.1.2 将[[镊子]]于酒精灯火焰灭菌后略停，取药敏片贴到平皿培养基表面。为了使药敏片与培养基紧密相贴，可用镊子轻按几下药敏片。为了使能准确的观察结果，要求药敏片能有规律的分布于平皿培养基上；一般可在平皿中央贴一片，外周可等距离贴若干片（外周一般可贴七片），每种药敏片的名称要记住。
3.1.3 将平皿培养基置于37℃温箱中培养24小时后，观察效果。
<b>3.2 牛津杯法
</b>
3.2.1 在“超净台”中，用经（酒精灯）火焰灭菌的接种环挑取适量细菌培养物，以划线方式将细菌涂布到平皿培养基上。具体方式；用灭菌接种环取适量细菌分别在平皿边缘相对四点涂菌，以每点开始划线涂菌至平皿的1/2。然后，找到第二点划线至平皿的1/2，依次划线，直至细菌均匀密布于平皿。（另：可挑取待试细菌于少量生理盐水中制成细菌混悬液，用灭菌棉拭子将待检细菌混悬液涂布于平皿培养基表面。要求涂布均匀致密。）
3.2.3 将平皿培养基置于37℃温箱中培养24小时后，观察效果。
二、药物敏感实验判定标准参考表1，[[多黏菌素]]抑菌圈；在9毫米以上为高敏，6-9毫米为低敏，无抑菌圈为不敏。
==药敏试验的应用==
药物敏感实验后，应选择高敏药物进行治疗，也可选用两种药物协助使用，以减少[[耐药菌株]]。在选择高敏药物时应考虑药物的吸收途径，因为我们药敏实验是药液直接和细菌接触，而在给禽用药的时候，必须通过机体的吸收才能使药物达到一定的效果，所以在给禽用药时，高敏药物一定要配合适宜的给药方法，这样才会达到好的治疗效果。
