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FPA

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创建页面,内容为“== 概述== FPA(fibrinopepide-A,纤维蛋白肽A)是在凝血酶作用下,纤维蛋白原α(A)链的精-16和甘-17之间的肽链裂...”
== 概述==

[[FPA]](fibrinopepide-A,纤维蛋白肽A)是在[[凝血酶]][[作用]]下,[[纤维蛋白原]]α(A)链的精-16和甘-17之间的肽链[[裂解]],释放出由1~16个[[氨基酸]]组成的FPA。是反映体内[[凝血]]活性及[[纤维]]蛋白最终形成血栓的可靠指标。
== FPA的别名==

纤维蛋白肽A
== FPA的医学检查==

检查名称
FPA 分类
临床[[血液]][[检查]] > [[出血]][[和凝]]血检查 取材
血液 FPA的测定原理
纯化的人纤维蛋白肽A[[包被]]于固相,液相中的待测纤维蛋白肽A竞争[[抑制]]抗人纤维蛋白肽A与固相纤维蛋白肽A的结合,再以酶标记的二抗[[检测]]结合于固相的抗人纤维蛋白肽A的量,从标准曲线计算[[标本]]中纤维蛋白肽A的含量。 试剂
(1)纯人FPA(纤维蛋白肽A)。

(2)兔抗人纤维蛋白肽A[[血清]]。

(3)[[辣根]][[过氧化物]]酶(HRP)标记的羊抗兔[[IgG]]。

(4)皂土(bentonite)、邻苯二胺(OPD)、[[肝素]]、BSA等。

(5)[[抑肽酶]](aprotinin)。

(6)包被[[缓冲液]]:0.05mol/L [[Na]]2CO3/NaHCO3缓冲液(pH9.5):配法是1.59g Na2CO3,2.93gNAHCO3与0.2gNaN3,溶于1000ml[[蒸馏水]]中,4℃[[保存]]1周内使用。

(7)洗板液:(PBSVTween20,pH7.4)8.0g NaCl,0.2g KH2PO4,2.98g Na2HPO4·12H2O,0.5mlTween20,0.2g NaN3溶于1000ml蒸馏水中。

(8)标本稀释缓冲液:在上述洗板液中加3mg/ml的[[明胶]],临用前新鲜配制。

(9)皂土[[吸附]]缓冲液(pH18.95):584mg NaCl与605mg Tris共溶于90ml蒸馏水中。以浓HCl调PH8.95,加入BSA 100mg。

(10)底物缓冲液(pH5.0)由0.05mol/L[[柠檬]]酸与0.1mol/L Na2HPO4配成。临用前称取10mg邻苯二胺溶于25ml此液中,加入30%H2O210μl,混匀。

(11)40孔聚[[苯乙烯]][[反应]]板。

(12)[[透析]]型酶标仪。 操作方法
(1)[[血浆]]标本的采集:用[[塑料]][[注射器]]顺利取[[静脉]]血4.5ml(开始的2ml弃去),加入盛有0.5ml抗凝剂([[肝素钠]]500u和aprotinin 5000u)的试管中,立即混匀。3000r/min离心20min,[[分离]]血浆,吸上层血浆至另一试管,立即作下一步处理或置-20℃保存。

(2)血浆标本的皂土吸附处理:目的是彻底除去纤维蛋白原。40mg皂土加入45ml的聚[[丙烯]]塑料离心管中,加入0.5ml吸附缓冲液,充分混匀,加入1ml血浆,在回旋混合器上震荡混匀,再缓慢震摇10min。5000r/min离心15min,吸取上[[清液]]至另一试管,再如上法以皂土吸附处理1次。[[然后]]吸取上清液1ml加到一预先盛有20g/LTween20[[溶液]]50μl的试管中,混匀。最终标本已稀释20倍。

(3)纤维蛋白肽A包被:取1μg/ml的纤维蛋白肽A溶于包被缓冲液中,加入聚苯乙烯反应板,200μl/孔,加盖,37℃过夜。次日弃孔内液。以洗涤液洗板5次,每次3min,甩干,备用。

(4)纤维蛋白肽A[[标准品]]:以标本稀释缓冲液配成;25,12.5,6.25,3.12,1.56,0.78ng/ml等6个不同浓度。分别吸取0.9ml于一系列小试管中,再在各管中加入0.1ml的工作浓度的兔抗人纤维蛋白肽A。经皂土吸附处理的待测血浆标本作原倍、1∶2、1∶4倍3个浓度如上操作。上述各管置37℃反应3h。

(4)从温育后的上述各管中分别吸取200μl加入已包被的纤维蛋白肽A的反应板各孔中,置板于37℃保温2h,洗板5次,甩干。

(6)各孔加HRP-羊抗兔IgG(以标本稀释液稀释至工作浓度)200μl/孔,置板于37℃温育2h,洗板5次,甩干。

(7)各孔加新鲜配制的底物液200μl,37℃避光精确反应3min,各孔立即[[滴加]]3mol/L H2SO4 50μl以终止反应。在酶标上测定各孔的A值(492nm)。

正常值
1.2±0.8μg/L。[[RIA]]法<2μg/L。 化验结果临床意义
纤维蛋白肽A是纤维蛋白原在凝血酶的作用下的降解产物,因此,它是[[血管]]内凝血酶生成的标志。通常将纤维蛋白肽A>2μg/L作为血凝亢进的指标。纤维蛋白肽A定量主要用于[[DIC]]的早期诊断和DIC抗凝治疗的[[监测]]试验。在DIC[[患者]]使用肝素开始后,如纤维蛋白肽A下降,表明治疗有效。也是[[血栓性疾病]]、[[心肌梗塞]]、[[冠心病]]、[[白血病]]、[[肾脏]]病的诊[[断指]]标之一。因为纤维蛋白肽A自肾[[排泄]],故肾[[功能]]不良时也增多。纤维蛋白肽A在体内的[[半衰期]]短,在[[抗凝疗法]]时其变动出现的也早,所以纤维蛋白肽A测定可用于DIC抗凝疗法的监护检查。

血浆纤维蛋白肽A含量增高反映凝血[[系统]]激活和凝血酶的生成。因此见于高凝状态和血栓性疾病,[[原发性]]和[[继发性]][[纤溶]]的鉴别,抗凝治疗过程中的监测指标。 附注
(1)[[采血]]要顺利不应>45s,且开头2ml弃去,注射器要硅化或用塑料注射器。

(2)采血后立即注入盛有抗凝剂的试管中,并在冰水中迅速混合,若需保存则以经皂土吸附处理后-20℃较妥。

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