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APOB
,== 概述==
载脂蛋白是[[血浆]]脂蛋白部分,各[[类脂]]蛋白中均含有一种或几种不同[[特异性]]载脂蛋白。目前已经发现的载脂蛋白有20余种。ApoB是其中的一种。
== APOB的别名==
载脂蛋白B
== APOB医学检查==
检查名称
[[APOB]] 分类
[[血液]][[生化]][[检查]]/[[脂类]]测定 化验取材
血液 原理
APOB的原理是[[抗原]][[抗体]]按一定比例[[反应时]],在[[溶液]]内生成细小颗粒的抗原抗体复合物均匀分散在溶液介质内。当光线通过这一浑浊液时,浑浊液内的颗粒能[[吸收]]光线,光线被吸收的量与浑浊颗粒的量呈正比,[[血清]]ApoA1或ApoB与相应的抗体结合,在一定条件下形成不溶性[[免疫复合物]],使溶液浑浊,即浊度与吸光度成正比。 试剂
(1)[[巴比妥]][[缓冲液]],[[离子]]强度0.05,pH8.6。
(2)10g/L[[琼脂]]糖(标准电内渗)用巴比妥缓冲液配制,加热[[溶化]],混合后,分装10ml/管,冷后4℃贮存。
(3)0.15mol/L NaCl溶液。
(4)兔(或羊)抗人apoA Ⅰ[[抗血清]]([[效价]]不低于1∶16)及apoB抗血清(效价不低于1∶32)。
(5)[[校准]]血清(同[[比浊法]])。
(6)染色液:考马斯亮蓝R-250 0.25g溶于[[甲醇]]45ml中,加入[[冰醋酸]]10ml及水45ml,混合,溶后备用。
(7)[[脱色]]液:每升含冰醋酸50ml及[[甘油]]100ml。 操作方法
(1)浇板:每板用10g/L琼脂糖10ml,沸水浴中融化,混匀,冷至50~55℃时加入apoA Ⅰ抗血清50μl,apoB抗血清8μl(用量视抗血清效价而定),迅速混匀后倒在预置在水平台上的[[玻璃]]板上,冷[[后放]]在4℃,20min后打孔,孔在板的阴极端,孔径3mm,孔间距至少5mm,孔容量5μl。把板放入[[电泳]]槽,用
滤纸[[搭桥]]。
(2)稀释抗原:用0.15mol/L NaCl液将校准血清稀释成1∶100,1∶150,1∶200,1∶300,及1∶400(作[[校准曲线]]之用),血清[[标本]]按1∶200稀释,放4℃冰箱不得超过3天。
(3)加样:在低电流状态(10mA/板)将稀释好的[[定值]]血清及标本分别吸取5μl(准确),加入琼脂糖[[凝胶]]加样孔内。每板都要做一系列标准。
(4)通电:稳流24mA/板,端电压6~8V/cm,以流水冷却使琼脂糖[[保持]]15℃,电泳3~4h。
(5)脱杂蛋[[白及]]制干胶膜:电泳后的琼脂糖板[[浸泡]]在0.15mol/L NaCl中30min,将胶膜托置于聚酯薄膜上,用多层滤纸在轻轻加压下吸干胶内[[水分]],[[然后]]将滤纸、胶膜与聚酯膜三者一起[[自然]][[干燥]],或用热吹风器吹干,干后胶膜会自然与滤纸及聚酯膜分开。
(6)染色:将琼脂糖胶膜平铺浸泡于染色液内20~30min。
(7)脱色:用脱色液浸泡已染色的胶膜至火箭峰清晰,背景基本无色。可在水中用两片玻璃纸将胶膜夹住,晾干后可长期[[保存]]。也可以用流水浸泡脱色至背景干净。
正常值
ApoA1:1.00~1.50g/L;ApoB:0.50~1.10g/L。 化验结果临床意义
ApoA1水平与[[高脂血症]]、[[冠心病]]呈负[[相关]]。ApoB水平与高脂血症及[[动脉]]硬化性疾病呈正相关。 附注
(1)购买效价高、单价特异的ApoA1、ApoB抗血清。
(2)为了准确测定ApoA1、ApoB,必须做标准曲线。
(3)[[免疫]]透射比浊应以多点定标。按曲线回归运算。 相关疾病
高脂血症
血浆脂蛋白
== 百科帮你涨知识 ==
[http://www.zk120.com/ji/ 查找更多中医古籍]
[http://www.zk120.com/an/ 查找更多名老中医的医案]
[http://www.zk120.com/fang/ 查找更多方剂]
载脂蛋白是[[血浆]]脂蛋白部分,各[[类脂]]蛋白中均含有一种或几种不同[[特异性]]载脂蛋白。目前已经发现的载脂蛋白有20余种。ApoB是其中的一种。
== APOB的别名==
载脂蛋白B
== APOB医学检查==
检查名称
[[APOB]] 分类
[[血液]][[生化]][[检查]]/[[脂类]]测定 化验取材
血液 原理
APOB的原理是[[抗原]][[抗体]]按一定比例[[反应时]],在[[溶液]]内生成细小颗粒的抗原抗体复合物均匀分散在溶液介质内。当光线通过这一浑浊液时,浑浊液内的颗粒能[[吸收]]光线,光线被吸收的量与浑浊颗粒的量呈正比,[[血清]]ApoA1或ApoB与相应的抗体结合,在一定条件下形成不溶性[[免疫复合物]],使溶液浑浊,即浊度与吸光度成正比。 试剂
(1)[[巴比妥]][[缓冲液]],[[离子]]强度0.05,pH8.6。
(2)10g/L[[琼脂]]糖(标准电内渗)用巴比妥缓冲液配制,加热[[溶化]],混合后,分装10ml/管,冷后4℃贮存。
(3)0.15mol/L NaCl溶液。
(4)兔(或羊)抗人apoA Ⅰ[[抗血清]]([[效价]]不低于1∶16)及apoB抗血清(效价不低于1∶32)。
(5)[[校准]]血清(同[[比浊法]])。
(6)染色液:考马斯亮蓝R-250 0.25g溶于[[甲醇]]45ml中,加入[[冰醋酸]]10ml及水45ml,混合,溶后备用。
(7)[[脱色]]液:每升含冰醋酸50ml及[[甘油]]100ml。 操作方法
(1)浇板:每板用10g/L琼脂糖10ml,沸水浴中融化,混匀,冷至50~55℃时加入apoA Ⅰ抗血清50μl,apoB抗血清8μl(用量视抗血清效价而定),迅速混匀后倒在预置在水平台上的[[玻璃]]板上,冷[[后放]]在4℃,20min后打孔,孔在板的阴极端,孔径3mm,孔间距至少5mm,孔容量5μl。把板放入[[电泳]]槽,用
滤纸[[搭桥]]。
(2)稀释抗原:用0.15mol/L NaCl液将校准血清稀释成1∶100,1∶150,1∶200,1∶300,及1∶400(作[[校准曲线]]之用),血清[[标本]]按1∶200稀释,放4℃冰箱不得超过3天。
(3)加样:在低电流状态(10mA/板)将稀释好的[[定值]]血清及标本分别吸取5μl(准确),加入琼脂糖[[凝胶]]加样孔内。每板都要做一系列标准。
(4)通电:稳流24mA/板,端电压6~8V/cm,以流水冷却使琼脂糖[[保持]]15℃,电泳3~4h。
(5)脱杂蛋[[白及]]制干胶膜:电泳后的琼脂糖板[[浸泡]]在0.15mol/L NaCl中30min,将胶膜托置于聚酯薄膜上,用多层滤纸在轻轻加压下吸干胶内[[水分]],[[然后]]将滤纸、胶膜与聚酯膜三者一起[[自然]][[干燥]],或用热吹风器吹干,干后胶膜会自然与滤纸及聚酯膜分开。
(6)染色:将琼脂糖胶膜平铺浸泡于染色液内20~30min。
(7)脱色:用脱色液浸泡已染色的胶膜至火箭峰清晰,背景基本无色。可在水中用两片玻璃纸将胶膜夹住,晾干后可长期[[保存]]。也可以用流水浸泡脱色至背景干净。
正常值
ApoA1:1.00~1.50g/L;ApoB:0.50~1.10g/L。 化验结果临床意义
ApoA1水平与[[高脂血症]]、[[冠心病]]呈负[[相关]]。ApoB水平与高脂血症及[[动脉]]硬化性疾病呈正相关。 附注
(1)购买效价高、单价特异的ApoA1、ApoB抗血清。
(2)为了准确测定ApoA1、ApoB,必须做标准曲线。
(3)[[免疫]]透射比浊应以多点定标。按曲线回归运算。 相关疾病
高脂血症
血浆脂蛋白
== 百科帮你涨知识 ==
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