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抗双链DNA抗体

添加5,429字节, 2017年3月15日 (三) 07:19
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==概述:概述==
  脱氧核糖核酸分为双链DNA(dsDNA)和单链DNA(ssDNA)两种,抗双链DNA抗体是针对其中双链DNA的一种自身抗体。 ==正常值:= 检查名称===
  Farr法:结合活性小于或等于20%抗双链DNA抗体=== 分类=== [[免疫学]][[检查]] > 自身抗体测定=== 抗双链DNA抗体的测定原理=== 目前,测定抗dsDNA的常用[[方法]]有4种,它们的原理分述如下: (1)绿蝇短膜虫(crithidia luciliae,CL)间接[[免疫]][[荧光]](IIF)或免疫酶染色(EIS)法:CL属于血[[鞭毛虫]]属,它有一个大的含纯净dsDNA的[[线粒体]]即动[[基体]](kinetoplast),其抗原浓度较Hep-2[[细胞核]]或肝细胞核中抗原浓度高10倍,待测血清中的抗dsDNA抗体可与之结合(抗ssDNA不能)。在[[分布]]有一定浓度CL的抗原片上,IIF法是依次[[滴加]]稀释的待测血清,反应后洗片,滴加荧光[[荧光素]]标记的抗人IgG,反应后洗片,片干后于[[荧光显微镜]]下观察。抗dsDNA阳性时,CL动基体处出现黄绿色荧光。EIS法原理与IIF法类似,仅以酶标记抗人IgG代替荧光素标记抗体,加酶底物呈色后于普通[[显微镜]]下观察,抗dsDNA阳性时,CL动基体被特异地染色。 (2)[[放射免疫分析法]](Farr试验):用放射性[[核素]](如125Ⅰ)标记dsDNA,加入待测血清后抗dsDNA可与标记dsDNA结合,经50%饱和度硫酸铵[[盐析]]。将结合抗dsDNA的标记抗原与未结合的标记抗原分开(前者在沉淀中,后者在上[[清液]]中),再用γ计数仪分别测定放射性,计算出抗dsDNA结合率。并据此判定抗dsDNA的有无。 (3)酶联免疫[[吸附]]试验([[ELISA]]):基本原理是将dsDNA[[包被]]于聚[[苯乙烯]]等固相[[载体]]微孔中,依次加入待测血清、酶标记抗人IgG或酶标记金黄色[[葡萄球菌]]A蛋白(SPA)、酶底物呈色。每种反应物加入后在一定温度下温育30~60min,彻底[[清洗]]后再加下一反应物。呈色程度可用酶联[[检测]]仪测定吸光度(A)反映,并据此判定检样中有无抗dsDNA。此法的关键之处是dsDNA很难包被于固相载体上,必须将微孔反应板用[[鱼精蛋白]]、多聚[[赖氨酸]]、[[戊二醛]]等做预处理。 (4)滴金免疫渗滤试验(dot immunogold filtration assay,DIG-FA):此法原理与酶免疫斑点试验大致[[相似]],但以[[胶体]]金标记的抗体代替酶标记抗体。预先用亲和素(avidin)或链亲和素(strep-tavidin)包被[[硝酸]][[纤维素]](NC)膜,再将[[生物素]]化的dsDNA结合于其上,将此NC膜固定于渗滤盒中央的圆孔处,其下以[[吸水]]填料充实。检测时依次滴加待检血清(如含抗dsDNA,则可与NC膜上dsDNA结合)、洗涤液、金标记SPA、[[洗液]],可在1~2min内完成全部操作。抗dsDNA阳性时,NC膜上包被dsDNA处可出现红色圆点。 === 试剂=== 同IIF法、EIS法、DIG-FA法。=== 操作方法=== 同IIF法、EIS法、DIG-FA法。=== 正常值=== 健康人血清1∶10稀释为阴性(绿蝇短膜虫法)。 健康人结合率≤20%(放射免疫分析法Farr试验)。 一般以待测血清A值/阴性对照A值(P/N)≥2.1为阳性,正常人P/[[N值]]<2.1([[ELISA法]])。 正常人为阴性(NC膜上不出现着色点)(滴金免疫渗滤试验)。=== 化验结果临床意义=== 抗dsDNA自身抗体是SLE的最重要的自身抗体,检出率40%~70%。高滴度抗dsDNA的存在是SLE诊断的重要依据,也是疾病[[活动]]性特别是肾脏损伤的标志。除用于SLE的诊断外,也可用于临床病程和治疗效果的[[监测]],对[[判断]]预后也有一定价值。但也有人报道在[[肝脏]]疾病、青少年型[[类风湿性关节炎]],乃至正常[[人中]]发现低滴度抗dsDNA。=== 附注===  间接免疫荧光法:阴性  斑点免疫结合试验:小于1:40(阴性)上述几种检测技术的[[特异性]]都不是100%的。例如,绿蝇短膜虫动基体中虽不含ssDNA,但可能含少量[[组蛋白]],放免法、ELISA法、滴金渗滤法等用作抗原的dsDNA,也常常含有ssDNA,而即使[[污染]]的ssDNA不足1%,引起的假阳性即可高达6%。因此,对抗dsDNA的检测结果应结合临床[[分析]],必要时应动态观察。此外,鉴于检测试剂中DNA抗原的来源不同,[[碱基]]组成和顺序可能有一定差异,使抗体结合的表位[[发生]]变化。==临床意义:=相关疾病=== 类风湿性关节炎
  阳性或增高:可能为[[系统性红斑狼疮]]还可见于其他[[结缔组织病]]、[[慢性活动性肝炎]]等。
== 百科帮你涨知识 ==
[http://www.zk120.com/an/search?qe=%E6%8A%97%E5%8F%8C%E9%93%BEDNA%E6%8A%97%E4%BD%93 名老中医谈抗双链DNA抗体]
[http://www.zk120.com/fang/ 查找更多方剂]== 抗双链[[DNA]][[抗体]](抗ds DNA)是[[抗DNA抗体]]中的一种。其[[反应]]位点位于DNA[[脱氧核糖]][[磷酸]]框架上。抗ds DNA主要出现于[[SLE]][[患者]]的[[血清]]中,对SLE患者的[[组织]][[器官]][[损伤]]有致病[[作用]]。在SLE患者血[[循环]]中,[[大分]]子的DNA浓度显著高于正常人,DNA还可与多种器官的[[微血管]][[结构]]包括肾[[小球]]基底膜上的[[硫酸]]乙酰[[肝素]](heparansulfate)结合,抗dsDNA抗体可与这些循环中的和器官原位的DNA[[分子]]反应,形成[[抗原]]抗体复合物,激活[[炎症]][[系统]]如[[补体活化途径]],导致组织损伤。也有人认为,致病性抗DNA抗体在[[肾脏]]中的沉积并非只取决于抗DNA抗体与DNA的结合,而是通过与基底膜上硫酸乙酰肝素、[[层粘连蛋白]](laminin)、[[心磷脂]]等非DNA抗原的交叉反应或静电引力作用固定于肾脏,诱导炎症反应。抗DNA[[自身抗体]]中有的有致病性,有的没有致病性。致病性的抗DNA抗体具有以下特性:亲和性高,能与[[补体]]结合,能结合dsDNA,带正电荷,多反应性,为[[IgG]]类。近年来的研究发现,抗DNA抗体能穿入活的[[淋巴细胞]],[[干扰]][[细胞]][[功能]],引起[[细胞凋亡]],抗dsDNA抗体也能进入肾小球膜细胞,引起肾小球细胞增殖,促[[细胞融合]]和蛋白尿形成。这可能是致病性抗DNA抗体的另一特征。 == 抗双链DNA抗体 的别名== [[anti-dsDNA]],[[抗-ds-DNA]]== 抗双链DNA抗体的医学检查
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