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龙血竭
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==鉴别方法==
【鉴别】 (1)取本品粉末5g,加[[氯仿]]25ml,置水浴中加热回流30分钟,放冷,滤过,滤液浓缩至适量。加[[硅胶]]2g,拌匀,蒸干,研匀。加于硅胶柱上(玻璃柱,内径10mm,硅胶3g,100~200目,干法装柱),用[[石油]]醚(60~90℃)-氯仿(5:1)的混合溶液30ml洗脱,收集[[洗脱液]],蒸干。残渣加氯仿0.5ml使溶解,作为供试品溶液。另取[[剑叶龙血素C]],加氯仿制成每1ml含2mg的溶液,作为对照品溶液。照[[薄层色谱法]](中国药典1995年版一部附录Ⅵ B)试验,吸取上供试品溶液20μl,对照品溶液10μl,分别点于同一含[[羧甲基纤维素钠]]为黏合剂的硅胶HF254薄层板上。以石油醚(60~90℃)-氯仿(20:1)为[[展开剂]],展开,取出,晾干。置紫外光灯(254nm)下检视。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置下,显相同颜色的斑点。
(2)取本品粉末0.5g,置索氏提取器中,加石油醚(60~90℃)70ml,水浴中加热回流1小时。提取液置水浴上蒸干,残渣加氯仿1ml使溶解,作为供试品溶液。另取龙血竭对照药材0.5g,同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典1995年版一部附录Ⅵ B)试验,吸取上述两种溶液2~4μl,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶H薄层板上,以氯仿-甲醇(99:1)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以[[硫酸]][[乙醇溶液]](1→10),在105℃加热5~10分钟。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
(3)取鉴别(2)项下石油醚提取后的不溶物,挥尽石油醚,置索氏提取器中,加醋酸乙酯70ml,水浴回流1小时。提取液浓缩至约5ml,加聚酰胺2g,拌匀,蒸干,置于已处理好的聚酰胺柱上(玻璃柱,内径10mm,14~30目,5g,湿法装柱),以50%乙醇100ml洗脱(流速1.5ml/min),洗脱液弃去,继以乙醇50ml洗脱(流速1.5ml/min),收集洗脱液,水浴蒸干,残渣加氯仿10ml使溶解,滤过,滤液蒸干,残渣加氯仿1ml使溶解,作为供试品溶液。另取龙血竭对照药材0.5g,同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典1995年版一部附录Ⅵ B)试验,吸取上述两种溶液各4~6μl,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶H薄层板上,以石油醚(60~90℃)-[[醋酸乙酯]](10:1)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%磷[[钼]]酸乙醇溶液。在105℃加热约5分钟。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
【检查】吸收度 取本品粉末10.0mg,精密称定,置25ml量瓶中,加乙醇溶解并稀释至刻度,摇匀,用干燥滤纸滤过,弃去初滤液,精密量取续滤液0.5ml,置10ml量瓶中,加乙醇稀释至刻度,摇匀,照[[分光光度法]](中国药典1995年版一部附录Ⅴ A),在284nm±2nm波长处测定吸收度,不得低于0.40。 醇不溶物 取本品粉末约2g,精密称定,装入已知重量的滤纸筒,置索氏提取器中,加乙醇150ml,回流提取至提取液无色为止。取出滤纸筒,晾干,于105℃干燥至恒重,计算,即得。本品含乙醇不溶物不得过1.5%。 炽灼残渣 取本品约1g,依法检查(中国药典1995年版一部附录Ⅸ J),不得过0.7%。 重金属 取炽灼残渣项下的残渣,依法检查(中国药典1995年版一部附录Ⅸ E 第二法),不得过百万分。
【含量测定】 照[[高效液相色谱法]](中国药典1995年版一部附录Ⅵ D)测定。 色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;[[冰醋酸溶液]](1→90)-乙腈(61:39)为流动相,检测波长为260nm,理论板数按[[龙血素B]]峰计算应不低于5000,龙血素B峰和内标峰的分离度应不少于4.0。 内标溶液的制备 精密称取[[炔诺酮]]适量,加乙腈使溶解并制成每1ml含50μg的溶液,即得。 测定法 精密称取龙血素B对照品适量,加氯仿使溶解并制成每1ml含20μg的溶液,精密量取该溶液3ml,水浴蒸干,残渣加入精密量取的内标溶液2ml,使溶解,取10μl注入液相色谱仪,记录色谱图;另取本品粉末(通过三号筛)约1g,精密称定,加[[硅藻土]]2g,混匀,置索氏提取器中,加氯仿100ml,置水浴中加热回流6小时,提取液减压浓缩至近干,加醋酸乙酯适量使溶解。移置10ml量瓶中,用醋酸乙酯洗涤容器并稀释至刻度,摇匀,滤过,弃去初滤液,收集续滤液作为供试品溶液。照薄层色谱法(中国药典1995年版一部附录Ⅵ B)试验,精密量取供试品溶液200μl,点于含羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶HF254薄层板上,使成条状,在供试品条斑侧1.5cm处点龙血素B对照品溶液10μl,作为对照。用石油醚(60~90℃)-氯仿-醋酸乙酯-甲醇(15:8:2:1)为展开剂,展开。取出,晾干,置紫外光灯(254nm)下检视,刮取与龙血素B对照品相应位置上的条斑。置3号垂熔玻璃漏斗中,用乙醇25ml洗脱,收集洗脱液,减压蒸干。残渣加入精密量取的内标溶液2ml使溶解,取10μl注入液相色谱仪,按内标法以峰面积计算,即得。 本品含龙血素B(C18H20O5)不得少于0.40%。
注:聚酰胺的处理:取聚酰胺粉以90%~95%乙醇浸泡,不断搅拌,除去气泡后装入层析柱中。用3~4倍体积的90%~95%乙醇洗涤,洗至洗液透明并且蒸干后无残渣(或极少残渣)。再依次用2~2.5倍体积的5%NaOH水溶液,1倍体积的[[蒸馏水]],2~2.5倍体积的10%[[醋酸]]水溶液洗涤,最后用蒸馏水洗涤呈中性为止,取出烘干备用,即得。
[[分类:中草药]][[分类:药品]][[分类:中药]]