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支原体
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支原体是在1898年发现的,是一种简单的原核生物。其大小介于[[细菌]]和[[病毒]]之间。结构也比较简单,多数成球形,没有[[细胞壁]],只有三层结构的[[细胞膜]],故具有较大的可变性。支原体可以在特殊的[[培养基]]上[[接种]]生长,用此法配合临床进行诊断。与泌尿生殖道[[感染]]有关的主要是分解[[尿素]]支原体和人型支原体两种,约有20-30%的[[非淋菌性尿道炎]]的病人,是由以上两种支原体引起的,是非[[淋菌性尿道炎]]及[[宫颈炎]]的第二大致病菌。在成年人的泌尿生殖道中分解尿素支原体和人型[[支原体感染]]率主要与性活动有关,也就是说,与[[性交]]次数的多少、性交对象的数量有关,不管男女两性都是如此。据统计女性的支原体感染率更高些,说明女性的[[生殖]]道比男性生殖道更易生长支原体。另外,分解尿素支原体的[[感染率]]要比人型支原体的感染率为高。
==性状==
<b>.形态与结构</b>
支原体的大小为0.2~0.3um,可通过滤菌器,常给[[细胞培养]]工作带来污染的麻烦。无细胞壁,不能维持固定的形态而呈现多形性。[[革兰氏染色]]不易着色,故常用Giemsa[[染色]]法将其染成淡紫色。细胞膜中[[胆固醇]]含量较多,约占36%,对保持细胞膜的完整性具有一定作用。凡能作用于胆固醇的物质(如二性霉素B、皂素等)均可引起支原体膜的破坏而使支原体死亡。支原体[[基因组]]为一环状以双链DNA,分子量小(仅有[[大肠杆菌]]的五分),合成与[[代谢]]很有限。
[[肺炎支原体]]的一端有一种特殊的末端结构(terminal structure),能使支原体[[粘附]]于[[呼吸道]]粘膜[[上皮细胞]]表面,与[[致病性]]有关。
<b>.培养特性</b>
营养要求比一般细菌高,除基础营养物质外还需加入10~20%人或动物[[血清]]以提供支原体所需的胆固醇。最适pH7.8~8.0之间,低于7.0则死亡,但解脲脲原体最适pH6.0~6.5。
大多数兼性厌氧,有些[[菌株]]在初分离时加入5%CO2生长更好。生长缓慢,在[[琼脂]]含量较少的[[固体培养基]]上孵育2~3天出现典型的“荷包蛋样”[[菌落]]:圆形(直径10~16um),核心部分较厚,向下长入培养基,周边为一层薄的透明[[颗粒区]]。此外,支原体还能在鸡胚[[绒毛]][[尿囊]]膜或培养细胞中生长。
繁殖方式多样,主要为[[二分裂]]繁殖,还有断裂、分枝、出芽等方式,盖因缺乏细胞壁造成分裂时二个子细胞大小均所致。同时,支原体分裂和其DNA复制不同步,可形成[[多核]]长丝体。
<b>.[[生化反应]]与分型</b>
一般能分解[[葡萄糖]]的支原体则不能利用[[精氨酸]],能利用精氨酸的则不能分解葡萄糖,据此可将支原体分为两类(见表19- 1)。解脲脲原体不能利用葡萄糖或精氨酸,但可利用尿素作能源。
各种支原体都有特异的[[表面抗原]]结构,很少有[[交叉反应]],具有型特异性。应用生长抑制试验(Growth inhibition test,GIT)、代谢抑制试验(Metabolic inhibition test,MIT)等可鉴定支原[[抗原]],进行分型。
<b>.[[抵抗力]]</b>
支原体对热的抵抗力与细菌相似。对环境[[渗透压]]敏感,渗透压的[[突变]]可致[[细胞破裂]]。对重金属盐、[[石炭酸]]、来苏尔和一些[[表面活性剂]]较细菌敏感,但对[[醋酸]]铊、[[结晶紫]]和亚锑酸盐的抵抗力比细菌大。对影响壁合成的[[抗生素]]如[[青霉素]]不敏感,但[[红霉素]]、[[四环素]]、[[链霉素]]及[[氯霉素]]等作用于支原体[[核蛋白体]]的抗生素,可抑制或影响[[蛋白质合成]],有杀灭支原体的作用。
<b>.致病性与[[免疫性]]</b>
支原体不侵入机体组织与[[血液]],而是在呼吸道或泌尿生殖道上皮细胞粘附并定居后,通过不同机制引起细胞损伤,如获取细胞膜上的[[脂质]]与胆固醇造成膜的损伤,释放[[神经]](外)[[毒素]]、[[磷酸酶]]及[[过氧化氢]]等。巨噬细胞、lgG 及 lgM 对支原体均有一定的杀伤作用。呼吸道粘膜产生的SlgA[[抗体]]已证明有阻止支原体吸附的作用。在儿童中,[[致敏淋巴细胞]]可增强机体对肺炎支原体的抵抗力。
组织细胞培养工作中,主要从以下几个方面来预防支原体的污染:控制[[环境污染]];严格实验操作;细胞培养基和器材要保证[[无菌]];在细胞培养基中加入适量的抗生素。支原体污染细胞后,特别是重要的细胞株,有必要清除支原体,常用方法有抗生素处理、[[抗血清]]处理、抗生素加抗血清和[[补体]]联合处理。支原体最突出的结构特征是没有细胞壁,一般来讲,对作用于细胞壁[[生物合成]]的抗生素,如 -内酰胺类、[[万古霉素]]等完全不敏感;对[[多粘菌素]](polymycin)、[[利福平]]、[[磺胺药]]物普遍[[耐药]]。对支原体最有抑制活性及常用于支原体感染治疗的抗生素是[[四环素类]]、大环内酯类及一些[[氟喹诺酮]];其他类抗生素如[[氨基糖苷类]]、氯霉素对支原体有较小抑制作用,所以常不用来作为支原体感染的[[化学]]治疗剂。
支原体有时被称为类菌[[质体]]。无细胞壁,多呈不规则球状、长丝状,可分枝,营[[寄生]][[共生]]或腐生。一般侵害对象为动植物,可造成多种疾病。
支原体(Mycoplasmal)是目前所能发现的能在无生命培基中生长繁殖的最小的微生物。 支原体体形多样,基本为球形,亦可呈球杆状或丝状,其菌落呈针尖大小,故又称之为微小支原体。支原体特点是无细胞壁及[[前体]],细胞器极少。DNA的G+C含量低,菌体内具有非常小的[[染色体组]],其分子量约为45×108,菌体细胞大小约为0.2-0.3μm,很少超过1.0μm。由三层[[蛋白质]]和脂质组成的膜样结构以及一层类似[[毛发]]结构组成。支原体由二分裂繁殖,形态多样。支原体用普通染色法不易着色,用姬姆萨染色很浅,革兰氏染色为阴性。支原体可在鸡胚绒毛尿囊膜上或细胞培养中生长。用培养基培养。营养要求比细菌高。由于它没有细胞壁,因此对影响细胞壁合成的抗生素,如青霉素等不敏感,但红霉素、四环素、[[卡那霉素]]、链霉素、氯霉素等作用于核蛋白体的抗生素,可抑制或影响支原体的蛋白质合成,有杀伤支原体作用,支原体对热抵抗力差,通常55℃经15分钟处理可使之灭活。石碳酸,[[来苏儿]]易将其杀死。在培养基中置入脲素并以[[硫酸]]锰作指示剂极易与其他支原体作出鉴别。
它广泛分布于自然界,有80余种。与人类有关的支原体有肺炎支原体(M-pneumonie,Mp)、人型支原体(M.humenis,MH)、解脲支原体(Ureaplasma urealyticum, UU 分解尿素支原体)和生殖器支原体(M.genitalium,MG)等。
肺炎支原体引起肺炎。现已从人类泌尿生殖道分离出来7种支原体,其中分离率较高而与泌尿生殖道疾病有关,是解脲支原体,其次是人型支原体。人型支原体(M.humenis,MH)、解脲支原体(Ureaplasma urealyticum,UU)和生殖器支原体(M.genitalium,MG)都会引起泌尿生殖道感染。
解脲支原体(ureaplasma ure-alyticum)是一种[[原核]]微生物,呈球杆状,大小为125-250毫微米,分子量4.5*108,高度多形性,没有坚硬的细胞壁,能在无细菌的[[培养物]]中[[增殖]],能产生尿素分解酶分解尿素。特异性抗体能抑制它生长,因其缺乏坚硬的细胞膜,对青霉素耐药,对细胞膜有亲和性,生长繁殖时需要[[类固醇]]物质。四环素、红霉素、[[壮观霉素]]对之有效。[[婴儿]]或无性交接触的女性生殖道内找不到解脲支原体。而性生活越乱,这种支原体阳性率也越高。Mc Donald 1982年报告587例急性[[尿道炎]]症状病人中,209例(36%)中段尿中分离出解脲支原体。
人型支原体(mycoplasma hominis)支原体对外界环境抵抗力弱,45℃15min即可被杀死。对肥皂、[[酒精]]、四环素、红霉素敏感。
===支原体[[标本]]采集:===
1.标本采集:
男性:用无菌棉拭子插入尿道约2cm处旋转,静止数秒钟后取材。女性:抹去宫颈口粘液,用无菌拭子插入宫颈管l-2cm旋转取材。
尚可用[[前列腺]]液、[[精液]]、尿液离心沉淀物作标本。
2.接种:将标本洗入Uu或Mh液体培养基,或用滤菌器过滤接种。
3.培养:置370C[[恒温]]箱孵育1~3天,每日观察培养基颜色变化。
[结果]
液体培养基由黄色变红色,清亮透明可初步判断为Uu或Mh阳性。
[[衣原体]]:专性细胞内寄生,并有近似的细胞壁结构,含DNA、RNA及核蛋白体,具有独特生活周期的原核细胞型微生物。
==机理==
支原体只能粘附在呼吸道或泌尿生殖道的上皮细胞表面的[[受体]]上,而不进入组织和血液。支原体引起细胞损害的原因为:粘附于宿主[[细胞表面]]的支原体从细胞吸收营养,从细胞膜获得脂质和胆固醇,引起细胞损伤;支原体代谢产生的有毒物质,如溶神经支原体能产生[[神经毒素]],引起细胞膜损伤;脲原体含有[[尿素酶]],可以水解尿素产生大量氨,对细胞有毒害作用。支原体除可以粘附于细胞、巨噬细胞表面外,还可以粘附于[[精子]]表面,从而阻止精子运动,其产生[[神经氨酸酶]]样物质可干扰精子与[[卵子]]的结合。这就是支原体感染引起[[不育]][[不孕]]的原因之一。
在动物实验发现,小鼠腹腔巨噬细胞可以杀灭支原体,而[[中性粒细胞]]的作用不大。在体外,IgG1和IgG2抗体有调理作用。可加强巨噬细胞对支原体的杀伤作用。
==对比==
L型细菌是在抗生素、[[溶菌酶]]等作用下变成的一种细胞壁缺陷型细菌,其许多特性与支原体相似,在鉴定时很有必要将二者区别开来(见下表)。
表19-2 支原体与L型细菌的区别
支原体 L型细菌
自然界中广泛存在绝大多数生长需胆固醇
在遗传上与细菌无关,且无论在什么条件下也不能变成细菌
菌落较小,0.1~0.3mm 自然界很少存在生长不一定需要胆固醇
在遗传上与原菌相关,并可在诱导因素去除后回复为原菌
菌落稍大,0.5~1.0mm
<b>肺炎支原体
</b>
肺炎支原体(M.Pneumonia)是人类支原体肺炎的病原体。支原体肺炎的[[病理]]改变以[[间质性肺炎]]为主,有时并发[[支气管肺炎]],称为原发性[[非典型性肺炎]]。主要经[[飞沫传染]],潜伏期2~3周,[[发病率]]以青少年最高。临床症状较轻,甚至根本无症状,若有也只是[[头痛]]、[[咽痛]]、[[发热]]、[[咳嗽]]等一般的呼吸道症状,但也有个别死亡报道。一年四季均可发生,但多在秋冬时节。
肺炎支原体的致病首先通过其顶端结构粘附在宿主细胞表面,并伸出[[微管]]插入胞内吸取营养、损伤细胞膜,继而释放出[[核酸酶]]、过氧化氢等代谢产生引起细胞的溶解、上皮细胞的[[肿胀]]与[[坏死]]。诱发机体产生的抗体也可能参与了上述病理损伤。呼吸道分泌的SlgA对再感染有一定防御作用,但不够牢固。
肺炎支原体的诊断方法主要依靠分离培养和血清学试验。标本可采可疑病人的痰或咽试子,接种于含血清或[[酵母]]浸膏的[[琼脂培养基]]。5~10天后观察有无直径30~100um的圆形房顶样菌落。多次传代后可变为典型的“荷包蛋”样菌落,并能吸附多种动物[[红细胞]]和气管上皮细胞、HeLa细胞等,且此类吸附可被特异性抗体所抑制。分离的支原体经形态、[[溶血]]与生化反应作初步鉴定后需进一步用特异性抗血清作生长抑制试验和代谢抑制试验。用患者血清与支原体脂质抗原作补体结合试验,恢复期较急性期[[效价]]高4倍以上具有诊断价值。亦可用间接免疫荧光试验、间接血凝ELISA检测标本。另外,有1/3~3/4患者的血清可与人O型红细胞在4℃时有非特异性凝集(称为“冷凝集试验”),37℃时消失,患病一周时达到高峰。此方法简便,有助于诊断。
==参看==
*[[医学微生物学/支原体|《医学微生物学》- 支原体]]