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免疫荧光
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1)酶作用后产生荧光的物质某些[[化合物]]本身无荧光效应,一旦经酶作用便形成具有强荧光的物质。例如4-甲基伞酮-β-D[[半乳糖苷]]受β-[[半乳糖苷酶]]的作用分解成4-甲基伞酮,后者可发出荧光,激发光波长为360nm,发射光波长为450nm。其他如碱性酸酶的[[底物]]4-甲基伞酮[[磷酸盐]]和[[辣根]]过氧化物酶的底物对羟基苯[[乙酸]]等。
2)镧系螯合物某些3价稀土镧系元素如铕(Eu3 )、铽(Tb3 )、铈(Ce3 )等的螯合物经激发后也可发射特征性的荧光,其中以Eu3 应用最广。Eu3
螯合物的激发光波长范围宽,发射光波长范围窄,荧光衰变时间长,最适合用于分辨荧光免疫测定。
酶 底物 产物 激发光 发射光
Β-G MUG MU 360 450
AP MUP MU 360 450
HRP HPA [[二聚体]] 317 414
(4)合适荧光素的选择
1)具有与蛋白质形成[[共价键]]的化学基团。
[[分类:生物]][[分类:生物学]]