琼脂扩散法
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琼脂扩散法(杯碟法)又称圆筒平板法(cylinder plate method)。用于测定抗生素效价的生物学定量方法之一。标准的方法是以20毫升的琼胶培养基放入陪替氏培养皿内做成平面,上面加上预先培养的试验标准菌种,例如掺入了葡萄球菌的琼胶4毫升,而使之凝固,上面再放上一个外径8毫米的不锈钢圆筒,筒内倒满青霉素稀释液之后,在35—37℃培养12—16小时。由于圆筒周围产生浓度梯度,葡萄球菌的繁殖被阻止于有效浓度范围之内而形成圆形的透明带。其直径d与青霉素浓度c之间的关系如下式所示:
d=klog10c+a(k、a为常数)
与标准青霉素液相比较,可求得青霉素浓度。测定链霉素时用枯草菌,氯霉素用大肠菌,四环素用八连球菌作繁殖试验。此外还有用圆形滤纸代替圆筒,使被检液渗入的滤纸法。
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