退火是指双链的核酸变性生成单链再回到双链的情况。例如加热或用碱处理DNA使之解离成单链后,若徐徐冷却或中和,则可再次回到双链的状态。利用此性质可以研究核酸链间的碱基顺序的互补性。由退火得到双链状态,可断定这两个核酸链在碱基顺序上是互补的,如不能得到双链,就说明没有互补性。