酸性磷酸酶染色
概述
大部分血细胞内均存在酸性磷酸酶活性，胞质内的酸性磷酸酶在酸性条件下，经水解，再与硝酸铅、硫酸胺作用，可生成棕黄色或棕黄色的硫酸铅沉淀。
酸性磷酸酶染色的别名
抗酒石酸酸性磷酸酶染
化验取材
原理
在酸性条件下，磷酸萘酚AS-BⅠ被细胞内酸性磷酸酶（acid phosphatase，ACP）水解产生萘酚AS-BⅠ，再与重氮盐偶联，形成不溶性有色沉淀。
试剂
枸橼酸 0.63g
蒸馏水 30ml
甲醇 10ml
丙酮 60ml
用浓氢氧化钠溶液调整pH至5.4，用前过滤，4～10℃可保存1个月。
（2）基质储备液：磷酸萘酚AS-BⅠ100mg，N,N-二甲基甲酰胺10ml，混合后置棕色瓶4～10℃可保存2～3个月。
（3）0.1mol/L乙酸缓冲液：甲液：乙酸钠（3H2O）13.6g，溶于蒸馏水1000ml。乙液：冰乙酸6.0ml溶于l000ml蒸馏水中。用乙液滴定甲液至Ph 5.2，放4～10℃可保存3个月。
（4）0.05mol/L乙酸酒石酸缓冲液：L-酒石酸3.75g，0.1mol/L乙酸缓冲液490ml，用浓氢氧化钠溶液调整pH至5.2，再加蒸馏水至500ml，4-10℃可保存3个月。
（5）作用液：0.05mol/L乙酸-酒石酸缓冲液50ml，基质储备液1.0ml，坚牢紫酱GBC 25mg，溶解后过滤，立即染色，一次用完。
操作方法
新鲜骨髓片或血片，用冷甲醇-丙酮缓冲液固定30s，蒸馏水漂洗5～6次，晾干。放入作液37℃保温45～60min，水洗。用苏木素染液或甲基绿染液复染细胞核1～6min，水洗，晾后镜检阳性对照（即酸性磷酸酶染色）：染色过程同上，用0.1mol/L乙酸缓冲液代替乙酸-石酸缓冲液。
正常值
阳性：粒细胞、T淋细胞、浆细胞、巨核细胞、血小板、幼红细胞和单核-巨噬系统细胞。
磷酸萘酚AS-BI染色法： 阳性：胞浆中有鲜红色或深红色颗粒，反应强度分为6级：0～5＋（染色颗粒多寡和染色深浅为分级标准）
化验结果临床意义
酸性磷酸酶染色能帮助鉴别戈谢细胞（呈阳性反应）及尼曼-皮克细胞（呈阴性反应）；红血病及红白血病时幼红细胞呈核旁单侧阳性反应；多发性骨髓瘤细胞、急性单核细胞性白血病、恶性组织细胞增生症细胞、多毛细胞白血病、T淋巴细胞性白血病等均呈强阳性反应。
（1）阳性： 毛细胞白血病。
（2）弱阳性：淋巴细胞白血病。
（3）阴性： 粒系细胞白血病、单核细胞白血病、巨核细胞白血病。
附注
酸性磷酸酶染色，必要时加做L-酒石酸抑制试验，即为酸性磷酸酶染色被酒石酸抑制；反之则不被酒石酸抑制，产生不溶性红色沉淀，定位于胞质内。这对鉴别诊断多毛细胞白血病有重要意义（L-酒石酸抑制试验仍呈阳性），而多发性骨髓瘤细胞，急性单核细胞性白血病细胞、恶性组织细胞增生症细胞均可被L-酒石酸所抑制，阳性反应明显减弱。
相关疾病
单核细胞性白血病、多发性骨髓瘤、多毛细胞白血病、恶性组织细胞增生症
