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医学微生物学/沙门氏杆菌

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创建页面,内容为“沙门氏菌属(Salmonella)是一大群寄生于人类和动物肠道内生化反应和抗原构造相似的革兰氏阴性杆菌统称为沙...”
[[沙门氏菌]]属(Salmonella)是一大群[[寄生]]于人类和动物[[肠道]]内生化反应和[[抗原]]构造相似的[[革兰氏阴性]]杆菌统称为沙门氏[[杆菌]]。1880年Eberth首先发现[[伤寒杆菌]],1885年Salmon分离到猪[[霍乱]]杆菌,由于Salmon发现本属[[细菌]]的时间较早,在研究中的贡献较大,遂定名为沙门氏菌属。目前至少有67种O抗原和2000个以上[[血清型]],所致[[疾病]]称沙门氏菌病。根据其对[[宿主]]的[[致病性]],可分为三类:①对人致病;②对人和动物均致病;③对动物致病。

与人类关系密切的沙门氏菌有:[[伤寒]]沙门氏菌(S.typhi),甲、乙、[[丙型副伤寒]]沙门氏菌(S.paratyphiA、B、C),鼠伤寒沙门氏菌(S.typhimurium),猪霍乱沙门氏菌(S.choleraesuis),[[肠炎]]沙门氏菌(S.enteritidis)等十余种。一般可简称伤寒杆菌,甲、乙、丙型副伤寒杆菌,[[鼠伤寒杆菌]],猪霍乱杆菌,肠炎杆菌。

== 一、[[生物学性状]]==

'''(一)形态与[[染色]]'''

大小0.6~1.0×2~3um,无[[芽胞]],一般有[[鞭毛]],无[[荚膜]],多数有[[菌毛]],革兰氏阴性杆菌。

'''(二)培养特性'''

[[兼性厌氧菌]],在普通[[琼脂]]平板上形成中等大小、半透明的S型[[菌落]]。在[[肠道杆菌]][[选择性培养基]]上形成无色菌落。

'''(三)[[生化反应]]'''

不发酵[[乳糖]]和[[蔗糖]]不产生[[吲哚]],不分解[[尿素]],VP试验阴性,大多产生[[硫化氢]]。发酵[[葡萄糖]]、[[麦芽糖]]和[[甘露醇]],除伤寒杆菌产酸不产气外,其他沙门氏菌均产酸产气。

表9-5主要沙门氏菌的[[生化]]特性

{| class="wikitable"
|-
| | 菌名
| | 葡萄糖
| | 乳糖
| | 麦芽糖
| | 甘露醇
| | 蔗糖
| | 硫化氢
| | 鼠素糖
| | 吲哚
| | 甲基红
| | VP
| | 枸椽酸盐
| | [[卫矛醇]]
| | 赖[[脱氨]][[羧酸]]酶
| | 鸟脱氨羧酸酶
| | 木胶糖
| | [[阿胶]]拉伯糖
|-
| | 伤寒杆菌
| | +
| | -
| | +
| | +
| | -
| | -/+
| | -
| | -
| | +
| | -
| | -
| | +/-
| | +
| | -
| | +/-
| | +/-
|-
| | [[甲型副伤寒]]杆菌
| | ⊕
| | -
| | ⊕
| | ⊕
| | -
| | -/+
| | ⊕
| | -
| | +
| | -
| | -
| | ⊕
| | -
| | +
| | -
| | ⊕
|-
| | [[乙型副伤寒]]杆菌
| | ⊕
| | -
| | ⊕
| | ⊕
| | -
| | +++
| | ⊕
| | -
| | +
| | -
| | +/-
| | ⊕
| | +
| | +
| | ⊕
| | ⊕
|-
| | 丙型副伤寒杆菌
| | ⊕
| | -
| | ⊕
| | ⊕
| | -
| | +
| | ⊕
| | -
| | +
| | -
| | +
| | ⊕
| | +
| | +
| | ⊕
| | ⊕
|-
| | 鼠伤寒杆菌
| | ⊕
| | -
| | ⊕
| | ⊕
| | -
| | +++
| | ⊕/-
| | -
| | +
| | -
| | +
| | ⊕
| | +
| | +
| | ⊕/-
| | ⊕
|-
| | 肠炎杆菌
| | ⊕
| | -
| | ⊕
| | ⊕
| | -
| | +++
| | ⊕
| | -
| | +
| | -
| | -
| | ⊕
| | +
| | +
| | ⊕
| | ⊕
|-
| | 猪霍乱杆菌
| | ⊕
| | -
| | ⊕
| | ⊕
| | -
| | +/-
| | ⊕
| | -
| | +
| | -
| | +
| | ⊕/-
| | +
| | +
| | ⊕
| | -
|}

生化反应在沙门氏杆菌种鉴定上有重要意义(表9-5)。

'''(四)抗原构造与分类'''

主要有O和H两种抗原。少数菌具有[[表面抗原]],功能与[[大肠杆菌]]的K抗原相似,一般认为与[[毒力]]有关,故称Vi抗原。

1.O抗原:为[[脂多糖]],性质稳定。能耐100℃达数小时,不被[[乙醇]]或0.1%[[石炭酸]]破坏。决定O型原特异性的是脂多糖中的[[多糖]][[侧链]]部分,以1、2、3等阿拉伯数字表示。例如乙型副伤寒杆菌有4、5、12三个。鼠伤寒杆菌有1、4、5、12四个;猪霍乱杆菌有6、7二个。其中有些O抗原是几种菌所共有,如4、5为乙型副伤寒杆菌和鼠伤寒杆菌共有,将具有共同O抗原沙门氏菌归为一组,这样可将沙门杆氏菌属分为A~Z、O51~O63、O65~O67共有42组。我国已发现26个菌组、161个血清型。使人类致病的沙门氏杆菌大多属于A~E组。O[[抗原刺激]]机体主要产生lgM[[抗体]]。

2.H抗原:为[[蛋白质]],对热不稳定,60℃经15分钟或乙醇处理被破坏。具有鞭毛的细菌经[[甲醇]]液固定后,其O抗原全部被H抗原遮盖,而不能与相应抗O[[抗体反应]]。H抗原的特异性取决于[[多肽]]链上[[氨基酸]]的排列顺序和空间[[构型]]。

沙门氏杆菌的H抗原有两种,称为第1相和第2相。第1相特异性高,又称特异相,用a、b、c等表示,第2相特异性低,为数种沙门氏杆菌所共有,也称非特异相,用1、2、3等表示。具有第1相和第2相H抗原的细菌称为双相菌,仅有一相者称单相菌。每一组沙门氏杆菌根据H抗原不同,可进一步分种或型。H抗原刺激机体主要产生lgG抗体。

3.Vi抗原:因与毒力有关而命名为Vi抗原。由聚-N-乙酰-D-[[半乳糖胺]][[糖醛酸]]组成。不稳定,经60℃加热、石碳酸处理或人工[[传代培养]]易破坏或丢失。新从患者[[标本]]中分离出的伤寒杆菌、丙型副伤寒杆菌等有此抗原。Vi抗原存在于细菌表面,可阻止O抗原与其相应抗体的反应。Vi抗原的[[抗原性]]弱。当体内菌存在时可产生一定量抗体;细菌被清除后,抗体也随之消失。故测定Vi抗体有助于对伤寒[[带菌者]]的检出。

'''(五)[[噬菌体]]分型'''

有些沙门氏菌在[[血清学]]分型的基础上,可借噬菌体进一步分型。伤寒杆菌各[[菌株]]的Vi抗原在血清学上的特异性是一致的,但对噬菌体有不同的敏感性,可用噬菌体裂解试验分为96个噬菌体型。我国常见者有12个型。伤寒杆菌的噬菌体分型在追踪[[传染源]]及发现新型菌株上有实际意义。

'''(六)[[抵抗力]]'''

对热抵抗力不强,60℃1小时或65℃经15~20分钟可被杀死。在水中能存活2~3周,类便中可活1~2个月,可在冰冻土壤中过冬。[[胆盐]]、煌绿等对属细菌的抑制作用较对其他肠道杆菌为小,故可用其制备肠道杆菌选择性培养基,利于分离粪便中的沙门氏菌。

'''(七)[[变异]]'''

1.H-O变异:指有动力的H型菌株失去鞭毛成为无动力的O型菌体。

2.S-R变异:S型菌落在[[培养基]]上多次移种后,逐渐失去O抗原变为R型菌落,细菌的毒力也随之消失。

3.V-W变异:指有Vi抗原的菌株(V型)失去Vi抗原(W型),即细菌与抗O[[血清]][[凝集]]而不再与抗Vi血清凝集,称为V-W变异。

4.位相变异:将具有第1相和第2相H抗原的沙门氏杆菌[[接种]]于琼脂平板上,所得单个菌落,有些是第1相,有些是第2相。如任意挑选一个菌落(第1相或第2相),在培养基上多次移种后,其后代又出现部分是第1相、部分是第2相的不同菌落。

== 二、致病性[[免疫]]==

'''(一)致病物质'''

1.[[侵袭力]]:沙门氏杆菌侵入[[小肠]]粘膜[[上皮细胞]],穿过[[上皮细胞层]]到达[[上皮]]下组织。细菌虽被[[细胞]]吞噬,但不被杀灭,并在其中继续生长繁殖。这可能与Vi抗原和O抗原的保护作用有关。菌毛的[[粘附]]作用也是细菌侵袭力的一个因素。

2.[[内毒素]]:引起[[发热]]、[[白细胞减少]]。大剂量时可发生[[中毒性休克]]。内毒素可激活[[补体系统]]释放[[趋化因子]],吸引[[粒细胞]],导致肠道局部[[炎症反应]]。

3.[[肠毒素]]:有些沙门氏杆菌,如鼠伤寒杆菌可产生肠毒素,性质类似肠[[产毒性大肠杆菌]]的肠毒素。

'''(二)人类的沙门氏菌病'''

1.肠热症:是[[伤寒病]]和[[副伤寒]]病的总称,主要由伤寒杆菌和甲、乙、丙型副伤寒杆菌引起。

典型伤寒病的病程较长。细菌到达小肠后,穿过肠粘膜上皮细胞侵入肠壁[[淋巴组织]],经[[淋巴管]]至[[肠系膜淋巴结]]及其他淋巴组织并在其中繁殖,经[[胸导管]]进入血流,引起第一次[[菌血症]]。此时相当病程的第1周,称[[前驱期]]。病人有发热、[[全身不适]]、[[乏力]]等。细菌随血流至[[骨髓]]、肝、脾、肾、[[胆囊]]、[[皮肤]]等并在其中繁殖,被脏器中[[吞噬细胞]]吞噬的细菌再次进入血流,引起第二次菌血症。此期[[症状]]明显,相当于病程的第2~3周,病人持续[[高热]],[[相对缓脉]],[[肝脾肿大]]及全身[[中毒症状]],部分病例皮肤出现[[玫瑰疹]]。存于胆囊中的细菌随[[胆汁]]排至肠道,一部分随粪便排出体外。部分菌可再次侵入肠壁淋巴组织,出现[[超敏反应]],引起局部[[坏死]]和[[溃疡]],严重者发生[[肠出血]]和[[肠穿孔]]。[[肾脏]]中的细菌可随尿排出。第4周进入恢复期,患者逐渐[[康复]]。

典型伤寒的病程约3~4周。病愈后部分患者可自粪便或尿液继续排菌3周至3个月,称恢复期带菌者。约有3%的伤寒患者成为慢性带菌者。

副伤寒病与伤寒病症状相似,但一般较轻,病程较短,约1~3周即愈。

2.[[急性肠炎]]([[食物中毒]]):是最常见的沙门氏杆菌[[感染]]。多由鼠伤寒杆菌、猪霍乱杆菌、肠炎杆菌等引起。系因食入未煮熟的病畜病禽的肉类、蛋类而发病。[[潜伏期]]短,一般4~24小时,主要症状为发热、[[恶心]]、呕波士顿、[[腹痛]]、[[腹泻]]。细菌通常不侵入血流,病程较短,一般2~4天内可完全恢复。

3.[[败血症]]:常由猪霍乱杆菌、丙型副伤寒杆菌、鼠伤寒杆菌、肠炎杆菌等引起。病菌进入肠道后,迅速侵入血流,导致组织器官感染,如[[脑膜炎]]、[[骨髓炎]]、[[胆囊炎]]、[[肾盂肾炎]]、[[心内膜炎]]等。出现高热、[[寒战]]、[[厌食]]、[[贫血]]等。在[[发热期]],血培养阳性率高。

'''(三)[[免疫性]]'''

伤寒或副伤寒病后有牢固的免疫性,很少再感染。主要依靠[[细胞免疫]],表现为[[单核巨噬细胞系统]]在[[淋巴因子]]的作用下,胞内酶数量增多,活性增强,从而杀死寄生在细胞内的细菌。

[[体液免疫]]方面,局部抗体较重要,尤其是SlgA具有特异性防止伤寒杆菌粘附于肠粘膜表面的能力。抗O和抗Vi抗体能抵抗[[病原菌]]的感染。至于血循环中lgM、lgG抗体对胞内寄生菌无免疫作用。

== 三、[[微生物学]]诊断==

'''(一)分离与鉴定'''

1.标本:根据伤寒病的病程采取不同标本,通常第1~2周取[[血液]],第2~3周取粪便或尿液。急性肠炎取患者吐泻物和剩余食物。败血症取血液作培养。

2.分离培养与鉴定:血液应先接种胆汗肉汤增菌;粪便和经离心的尿沉渣可直接接种肠道杆菌选择性培养基。37℃经18~24小时培养后,挑选无色半透明的不发酵乳糖的菌落[[涂片]]、染色、[[镜检]],并接种双糖含铁或[[三糖]]含铁培养基。疑为沙门氏杆菌时,作生化反应和玻片凝集试验鉴定。

3.快速诊断法:近年来应用[[葡萄球菌]]A[[蛋白]][[协同凝集]]试验、[[酶联免疫吸附试验]]、[[放射免疫测定]]等方法,检测患者血清或尿液中伤寒杆菌、副伤寒杆菌的[[可溶性抗原]],协助临床早期诊断肠热症。

'''(二)血清学试验'''

常用肥达(Widal)氏反应。即用已知的伤寒杆菌O、H抗原和甲、乙型副伤寒杆菌的H抗原与待检血作定量凝集试验。根据抗体含量多少及其增长情况,[[辅助临床诊断]]肠热症。

肠热症常由伤寒杆菌,甲、乙型副伤寒杆菌引起,故通常采用上述三种菌的抗原进行试验。有的地区可由丙型副伤寒杆菌引起,应增添丙型副伤寒杆菌H抗原作试验。

本试验在肠热症患者第一周末时,即可出现阳性结果。判定结果时必须考虑下述情况。

1.正常抗体水平:正常人因[[隐性感染]]或[[预防接种]],血清中可含有一定量抗体,其[[效价]]随各地区情况而不同。一般说来,O凝集价≥1:80、H凝集价≥1:160时才有诊断价值。

2.动态观察:判断[[肥达氏反应]]结果须结合临床症状、病期等。单次凝集效价增高,有时不能定论。如间隔数天重复采用,若效价随病程延长而逐渐上升4倍以上,有诊断意义。

3.O与H抗体在诊断上的意义:患肠热症后,O与H抗体在体内的消长情况不同。LgM型O抗体出现较早,持续时间仅半年左右,消失后不易受伤寒、副伤寒杆菌以外细菌的非特异性抗原刺激而重新出现。lgG型H抗体出现较晚,维持时间可长达数年,消失后易受非特异性抗原刺激而短暂地重新出现。因此,①若H、O凝集效价均超过正常值,则感染伤寒、副伤寒的可能性大;②H与O效价均低,则患肠热症的可能性甚小;③若H效价高而O不高,可能系预防接种或非特异性回忆反应;④如O效价高而H不高,可能是感染早期或其他[[沙门氏菌感染]](肠炎杆菌与伤寒杆菌有共同O抗原)引起的[[交叉反应]]。

4.其他:少数病例在整个病程中,肥达氏试验始终呈阴性。可能是①发病早期曾用大量或多种[[抗生素]]治疗;②患者[[免疫功能低下]]。故本试验阴性时,不宜匆忙地否定诊断。

伤寒伤人不同病期血、粪便、尿液中病原菌与特异性[[凝集素]]的阳性检出率(图9-1)。



图9-1伤寒病程中各种试验阳性率

'''(三)伤寒带菌者的检查'''

最可靠的方法是分离培养病原菌,但检出率不高。一般可先检测可疑血清中有无Vi抗体,当效价>1:10时,再取粪便或尿液多次分离培养,才能确定。

== 四、防治原则==

肠热症的[[特异性免疫]],以往采用皮下多次接种死[[菌苗]],虽有一定的保护作用,但常引起局部和全身反应。

近十多年来,领带[[链霉素]](Sd)株和Ty-21a株减毒口服活菌苗的[[副反应]]较小,[[免疫效果]]且较持久。Ty-21a活菌苗是缺少[[尿苷二磷酸]][[半乳糖]]-4-[[差向异构酶]]的伤寒杆菌[[突变株]]。该菌株失去合成脂多糖的能力,故无[[发热反应]],无返祖现象,服用安全,以产生细胞免疫为主,经国内、外现场试用,此菌株安全、稳定、有效免疫期至少为三年。

治疗可采用[[氯霉素]]、[[氨苄青霉素]]、[[羟氨苄青霉素]]等,[[中药]][[白花蛇舌草]],[[穿心莲]]等有效。
==参看==
*[[沙门氏杆菌]]


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