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分子生物学

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== 历史 ==
 
在1930年代,由于许多[[生物化学家]]发现细胞内的许多分子参与了各种复杂的化学反应,分子生物学由此逐步建立。但直到1938年“分子生物学”一词才由瓦伦·韦弗(Warren Weaver)提出(也有人认为“分子生物学”一词最早于1945年威廉·阿斯特伯里(William Astbury)首先在Harvey Lecture上应用的<ref>龙华,“分子生物学的发展”,《生物学通报》,40: 58-60,2005</ref>)。瓦伦是当时洛克斐勒基金会[[自然科学]]方面的主持人,他相信由于在[[X射线]][[晶体]]学等方面的发展,生物学正在进入一个大的[[转变期]],他也因此将基金会的资金用于资助生物领域的研究。
=== [[多聚酶链式反应]] ===
 
 
多聚酶链式反应(PCR)是一项用于体外复制DNA的极为通用的技术。简而言之,PCR技术可以使[[单链DNA]]被复制数百万次,也允许用事先确定好的方式对被复制的DNA序列进行改动。例如,PCR技术可以用于引入[[限制性酶切位点]],或者对特定的DNA碱基进行[[突变]](改变)。PCR技术还可以用于从cDNA文库获得特定的DNA片段,或者从另一个角度,用于判断一个cDNA文库中是否含有特定的DNA片段。
=== [[凝胶电泳]] ===
 
 
凝胶电泳是分子生物学最主要的一项技术。其基本原理是:DNA、RNA和蛋白质可以用电场来进行分离。在[[琼脂糖凝胶电泳]]中,DNA和RNA可以被[[琼脂糖]][[凝胶]]按其分子大小进行分离。同样,蛋白质可以被SDS-[[聚丙烯酰胺凝胶电泳]](SDS-PAGE)按[[分子量]]大小分离;此外,蛋白质还可以由于所带电荷的不同被[[等电聚焦电泳]]分离。
==== 南方墨点法 ====
 
 
此方法的命名源自其发明者生物学家Edwin Southern。南方墨点法是探测一个DNA样品中含有特定DNA序列的方法。首先,DNA样品为凝胶电泳所分离;然后,分离的样品通过毛细现象被转移到一张膜上,这一过程被称为“印迹”(blotting)。带有样品的膜就可以用与目标序列互补的标记的DNA标记[[探针]]来探测。最初的操作手册大都采用[[放射性标记]],但现在非放射性标记已开始被采用。自从PCR技术被用于检测特定DNA序列后,Southern[[印迹法]]在实验室中的应用大为减少。但此方法依然有着其他一些应用,如用于测量转基因鼠的转[[基因拷贝]]数,以及用于构建[[基因]]敲除的[[胚胎]]干[[细胞系]]。
==== 北方墨点法 ====
 
 
北方墨点法被用于研究特定类别的RNA分子的表达模式(丰度和大小)。与南方墨点法相似,RNA样品为凝胶电泳按大小分离;然后转移到膜上,并用与目标序列互补的标记的探针来探测。实验结果可以根据所用探针的不同以多种方式来观察,但大多数都显示的是样品中被探测的RNA条带的相对位置,也就是分子大小;而条带的强度则与样品中目标RNA的含量相关。这一方法可以测量目标RNA在不同样品中的情况,因此已经被普遍用于研究特定基因在生物体中表达的时刻和表达量,也是这类研究中最基本的手段。
==== 西方墨点法 ====
 
 
大多数蛋白的[[抗体]]可以通过将少量的蛋白注入动物(如鼠、兔、羊)以获得对应注入蛋白的抗体([[多克隆抗体]])或进一步通过[[细胞培养]]获得抗体([[单克隆抗体]])。这些抗体就可为许多分析和制备技术所使用。在西方墨点法中,蛋白质首先根据分子大小用SDS-PAGE分离。然后将胶中的蛋白质转移到膜(如PDVF膜、[[尼龙]]膜或其他可用的膜)上。然后将膜用含有抗体的溶液浸泡,由于抗体可以特异性地结合到目标蛋白上,因此就可以探测膜中的目标蛋白。同样观察结果的方法有很多,包括显色产物、[[化学发光]](chemiluminescence)或[[放射自显影]]。一些与西方墨点法相似的方法可以用于直接对细胞和组织中的特定蛋白进行[[染色]],然而这些被称为“[[免疫]]染色”的方法更多的是应用于细胞生物学而非分子生物学。
=== [[微阵列]]技术 ===
 
 
微阵列也可以用除了DNA以外的分子来制作。如抗体微阵列可被用于检测[[血液]]样品中含有哪些蛋白质或细菌。
=== 过时的技术 ===
 
 
随着新技术和新方法的不断出现,旧的技术很快就被抛弃。一个很典型的例子就是DNA分子大小的测量:在(琼脂糖/[[聚丙烯酰胺]])凝胶电泳出现之前,DNA分子大小是用[[蔗糖密度梯度]]沉[[降法]]来测量的,这一方法费时费力而且花费昂贵;而在梯度沉降法出现之前,使用的是[[黏度]]法。尽管已经不再为人们所关注,但了解这些过时的技术可能会对解决一些特别的问题有帮助。
== 知名的分子生物学家 ==
 
 
* 佛朗西斯·克里克
* [[莫里斯·威尔金斯]]
* [[亚历山大·里奇]]
 
 
== 参见 ==
* 细胞生物学(细胞的结构和组成)
* [[DNA]]和[[染色体]]结构
* [[蛋白质生物合成]](从DNA转录为[[RNA]],再从RNA翻译成[[蛋白质]])
* [[蛋白质结构]]
* [[基因组]]
* [[蛋白质组]]
 
== 参考文献 ==
 
<references/>
== 扩展阅读 ==
* [http://www.sciam.com/article.cfm?chanID=sa006&articleID=0002F40E-3D61-1056-BD6183414B7F0104 Scientific American Magazine (April 2004 Issue) Evolution Encoded]
* [http://www.ncbi.nlm.nih.gov/ National Center for Biotechnology Information]
 
 
 
 
 
[[Category:分子生物学| ]] [[Category:生物学]]
==参考来源==
*[http://zh.wikipedia.org/wiki/%E5%88%86%E5%AD%90%E7%94%9F%E7%89%A9%E5%AD%A6 维基百科-分子生物学]
== 百科帮你涨知识 ==
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