'''(二)速率[[区带离心]]法'''
速率区带离心法是在离心前于[[离心管]]内先装入密度梯度介质(如[[蔗糖]]、[[甘油]]、KBr、CsCl等),待分离的样品铺在梯度液的顶部、离心管底部或梯度层中间,同梯度液一起离心。离心后在近旋转轴处(X<sub>1</sub>)的介质密度最小,离旋转轴最远处(X<sub>2</sub>)介质的密度最大,但最大介质密度必须小于样品中粒子的最小密度,即ρ<sub>P</sub>>ρ<sub>m</sub>。这种方法是根据分离的粒子在梯度液中沉降速度的不同,使具有不同沉降速度的粒子处于不同的密度梯度层内分成一系列区带,达到彼此分离的目的。梯度液在离心过程中以及离心完毕后,取样时起着支持介质和、KBr、CsCl等),待分离的样品铺在梯度液的顶部、离心管底部或梯度层中间,同梯度液一起离心。离心后在近旋转轴处(X)的介质密度最小,离旋转轴最远处(X)介质的密度最大,但最大介质密度必须小于样品中粒子的最小密度,即ρ>ρ。这种方法是根据分离的粒子在梯度液中沉降速度的不同,使具有不同沉降速度的粒子处于不同的密度梯度层内分成一系列区带,达到彼此分离的目的。梯度液在离心过程中以及离心完毕后,取样时起着支持介质和[[稳定剂]]的作用,避免因机械振动而引起已分层的粒子再混合。
由于ρ<sub>P</sub>>ρ<sub>m</sub>可知S>0,因此该离心法的离心时间要严格控制,既有足够的时间使各种粒子在介质梯度中形成区带,又要控制在任一粒子达到沉淀前。如果离心时间过长,所有的样品可全部到达离心管底部;离心时间不足,样品还没有分离。由于此法是一种不完全的沉降,沉降受物质本身大小的影响较大,一般是应用在物质大小相异而密度相同的情况。常用的梯度液有Ficoll、Percoll及蔗糖。由于ρ>ρ可知S>0,因此该离心法的离心时间要严格控制,既有足够的时间使各种粒子在介质梯度中形成区带,又要控制在任一粒子达到沉淀前。如果离心时间过长,所有的样品可全部到达离心管底部;离心时间不足,样品还没有分离。由于此法是一种不完全的沉降,沉降受物质本身大小的影响较大,一般是应用在物质大小相异而密度相同的情况。常用的梯度液有Ficoll、Percoll及蔗糖。
'''(三)[[等密度离心]]法'''
等密度离心法是在离心前预先配制介质的密度梯度,此种密度梯度液包含了被分离样品中所有粒子的密度,待分离的样品铺在梯度液顶上或和梯度液先混合,离心开始后,当梯度液由于离心力的作用逐渐形成底浓而管顶稀的密度梯度,与此同时原来分布均匀的粒子也发生重新分布。当管底介质的密度大于粒子的密度,即ρ<sub>m</sub>>ρ<sub>P</sub>时粒子上浮;在弯顶处ρ<sub>P</sub>>ρ<sub>m</sub>时,则粒子沉降,最后粒子进入到一个它本身的密度位置即ρ<sub>P</sub>=ρ<sub>m</sub>,此时dx等密度离心法是在离心前预先配制介质的密度梯度,此种密度梯度液包含了被分离样品中所有粒子的密度,待分离的样品铺在梯度液顶上或和梯度液先混合,离心开始后,当梯度液由于离心力的作用逐渐形成底浓而管顶稀的密度梯度,与此同时原来分布均匀的粒子也发生重新分布。当管底介质的密度大于粒子的密度,即ρ>ρ时粒子上浮;在弯顶处ρ>ρ时,则粒子沉降,最后粒子进入到一个它本身的密度位置即ρ=ρ,此时dx/dt为零粒子不再移动,粒子形成纯组份的区带,与样品粒子的密度有关,而与粒子的大小和其他参数无关,因此只要转速、温度不变,则延长离心时间也不能改变这些粒子的成带位置。
此法一般应用于物质的大小相近,而密度差异较大时。常用的梯度液是CsCl。