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细胞免疫检测法

删除154字节, 2017年2月22日 (三) 13:16
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各种原因引起的免疫细胞数量变化表现多数都在血液中有所反映。所以,血液是[[细胞免疫检测法]]最常选用的样品,只有在必要时,才从骨髓或其他免疫器官取材检查。
①血液[[白细胞计数]]。是医院最常用的化验检查项目之一,实际上就是血液中总的白细胞浓度的测定。成人血中白细胞浓度的正常值为4000~10000个/mm<sup>3</sup>。mm。[[新生儿]]的正常值较成人高,为11000~20000个/mm<sup>3</sup>。血液白细胞计数是诊断的依据。若白细胞计数异常,则需要作白细胞分类等检查(见mm。血液白细胞计数是诊断的依据。若白细胞计数异常,则需要作白细胞分类等检查(见[[血液常规检查]])。
②血液中白细胞的分类计数。正常人体血液中各类白细胞的数量有一定的比例。表2示其特征。
②[[淋巴因子]]产生试验。淋巴细胞在受到各种刺激后发生代谢的活化,同时可产生并释放多种有[[生物学]]活性的物质,称为淋巴因子。因此,淋巴因子产生试验与淋巴细胞转化试验具有相似的意义,用来检测淋巴细胞对不同刺激物的反应能力。较常用的淋巴因子产生试验是[[白细胞移动抑制因子]](或巨噬细胞[[移动抑制因子]])产生试验。白细胞移动抑制因子和巨噬细胞移动抑制因子分别能抑制装在毛细玻璃管中的白细胞或巨噬细胞向管口外移动。在作白细胞(或巨噬细胞)移动抑制因子产生试验时,一般是用特异性抗原作刺激物,若淋巴细胞能发生反应释放白细胞移动抑制因子或巨噬细胞移动因子,说明此人已接受过该抗原的刺激,对该抗原可表现特异的细胞免疫反应。此试验的结果,往往与身体对同一抗原的迟发型[[过敏]][[皮肤]]试验的结果一致。
③细胞介导的[[细胞毒试验]]。一种细胞通过直接接触将另一种细胞杀伤的现象,称为细胞介导的[[细胞毒]]作用。前种细胞为杀伤细胞,后种细胞为[[靶细胞]]。在人体内有两种能直接杀伤靶细胞的细胞,即自然杀伤细胞(NK细胞)和特异性杀伤 T细胞(特异性Tc细胞)。NK细胞可存在于未受抗原刺激的正常人体,对某些受[[感染]]的细胞、[[肿瘤细胞]]或正常的未成熟[[造血细胞]]有杀伤活性。特异性Tc细胞存在于受过特异抗原刺激的人体内,能杀伤带特异抗原的受感染细胞、异体细胞、自身组织细胞或肿瘤细胞。这两种杀伤细胞借不同的机制在抗感染[[免疫]]、[[抗肿瘤免疫]]、[[自身免疫病]]及[[移植免疫]]的过程中均有重要意义。两种杀伤细胞在体外的功能检测,只是所用的靶细胞各不相同,检测的方法都是相同的,常用[[放射性核素]]<sup>51</sup>铭(<sup>51</sup>[[Cr]])释放法。此方法的原理是,将靶细胞预先用<sup>51</sup>Cr标记,<sup>51</sup>Cr能与胞浆中的蛋白质结合。靶细胞标记的<sup>51</sup>Cr量可用γ)释放法。此方法的原理是,将靶细胞预先用Cr标记,Cr能与胞浆中的蛋白质结合。靶细胞标记的Cr量可用γ[[射线]]计数器测量其cpm值来表示。靶细胞与杀伤细胞混合后经过离心,使两种细胞压紧,密切相互作用。培养一段时间后,被杀伤靶细胞内的<sup>51</sup>Cr会释放到胞外来,可以测量计数器测量其cpm值来表示。靶细胞与杀伤细胞混合后经过离心,使两种细胞压紧,密切相互作用。培养一段时间后,被杀伤靶细胞内的Cr会释放到胞外来,可以测量[[细胞培养]]液中游离<sup>51</sup>Cr的 液中游离Cr的 cpm值,以表示靶细胞受破坏的程度(图2)。因此,可用培养后所测[[培养液]]中的cpm值与靶细胞标记的总 <sup>51</sup>Cr量的 cpm值之比表示杀伤细胞对靶细胞的杀伤率(又称 <sup>51</sup>Cr的特异释放率)。靶细胞的<sup>51</sup>Cr特异释放率即被杀伤百分率,与杀伤细胞的数量与杀伤速度成正相关,所以可用此测量结果作为杀伤细胞功能强弱的指标。。靶细胞的Cr特异释放率即被杀伤百分率,与杀伤细胞的数量与杀伤速度成正相关,所以可用此测量结果作为杀伤细胞功能强弱的指标。
④抗体[[分泌细胞]]的检测。分泌抗体的浆细胞由 B细胞分化而来,但在此分化过程中,往往需要T细胞与单核—巨噬细胞协作。因此对抗体分泌细胞的检测,实际上是对B细胞、T细胞和巨噬细胞功能的综合性评价。抗体分泌细胞的检测,依抗体的特异性不同,可分为针对某种抗原的[[特异抗体]]分泌细胞的检测,以及无一定特异性的[[免疫球蛋白]]分泌细胞的检测。抗体分泌细胞的检测还可因其产生的条件不同而分为三种方法,其结果表示的意义也有差别。在自然条件下人体内存在的免疫球蛋白(Ig)分泌细胞,称为自发性Ig分泌细胞。它们反映人体在自然情况下受抗原刺激的情况,并且与年龄的增长有关。受抗原[[注射]]后,在体内产生的特异抗体的分泌细胞,能反映人体的[[体液免疫]]应答功能。但是,对人无益的抗原不能轻易给人注射,此方法多用于[[动物试验]]。取人的淋巴细胞,在体外培养,经过各种刺激,能够引起非特异性Ig分泌细胞的产生,称为体外的抗体产生免疫应答。此体外试验对于分析T细胞、B细胞和巨噬细胞在抗体产生反应中的功能作用很有意义。抗体分泌细胞的具体检测常用[[溶血]]空斑技术,即将待检细胞与经过处理的绵羊红细胞混合,再加入[[补体]]及显斑剂,灌入用两张玻璃片做成的窄缝状小室内。经过37℃培养一段时间,抗体分泌细胞周围的绵羊红细胞被溶解,形成一个圆形的透明区,称为溶血空斑。空斑中心的抗体分泌细胞又称为[[空斑形成细胞]](PFC)。所以抗体分泌细胞的检测也称PFC的检测。
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