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Β-半乳糖苷酶

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| caption = β-galactosidase from ''Penicillum sp.''
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'''β-半乳糖苷酶'''()是一种[[水解酶]],[[催化]]β-[[半乳糖苷]]水解成[[单糖]]。使β-半乳糖苷酶作用的[[底物]]包括[[神经节苷脂]][[GM1]]、乳[[糖苷]]、[[乳糖]]、各种[[糖蛋白]]<ref name=dorland>{{cite book
| title=Dorland's Illustrated Medical Dictionary
| url=http://www.mercksource.com/pp/us/cns/cns_hl_dorlands.jspzQzpgzEzzSzppdocszSzuszSzcommonzSzdorlandszSzdorlandzSzdmd_g_01zPzhtm#12382991
| accessdate = 2006-10-22}}</ref>。

==功能与特性==

β-半乳糖苷酶是一种糖苷外切酶,专门水解在[[半乳糖]]和其有机部分之间的β- [[糖苷键]]。它也可能裂解[[岩藻糖]]和[[阿拉伯糖]]所形成的糖苷,但是效率比较低。 它是人体中所必需的酶。 在此[[蛋白质]]不足的情况下可能导致Galactosialidosis(为一种[[溶酶体]]储[[积病]])或莫尔基奥乙[[综合征]]。在[[大肠杆菌]]中的β-半乳糖苷酶的[[基因]]和lacZ的基因为诱导型系统的一部分,乳糖[[操纵子]]是于[[低血糖]]时在乳糖的存在下被激活。

[[分子生物学]]中经常使用β-半乳糖苷酶作为监测[[基因表达]]的指标印记。β-半乳糖苷酶也表现出蓝/白筛选[[重组]]复制中称之为α-互补形成的现象。这种酶可以分开为二种[[胜肽]],分别为LacZ基因α和LacZΩ,这两者自身分别都不是反应端,但是当两者同时存在时,会自发地重新组合成一个有功能的酶。 这个特性被利用在许多复制载体([[克隆]]),其中在有lacZα基因的[[质体]]表现可以将实验室的大肠杆菌病株中的LacZΩ基因转换为另一个[[突变基因]]。然而,当[[DNA]]片段插入到载体中,制作LacZα的被打乱,因此[[细胞]]没有表现β-半乳糖苷酶的活性。β-半乳糖苷[[酶活性]]表现的存在与否可透过X-gal的检测来判断,如果质体没有插入此外来基因,就能成功表现出β-半乳糖苷酶的活性,就能成功分解X-gal,使[[菌落]]成为蓝色。反之,插入外来基因的质体无法分解X-gal(因为β-半乳糖苷酶无法表现),而成为白色的菌落。

1995年,由Dimri等人。提出了β-半乳糖苷酶具有在PH 6.0 的新亚型([[衰退]]与β-半乳糖苷酶和SA-β-半乳糖苷酶([[衰老]])有关)<ref name="pmid7568133"></ref> 这被拿来特别表达老化(细胞的不可逆的生长停滞)。具体的定量测定法甚至开发了他的感应检测。<ref name="VB"></ref><ref name="pmid16004951"></ref><ref name="pmid17634571"></ref> 然而现在已经知道,这是溶酶体内源β-半乳糖苷酶的积累,而使其过度表现不需要的衰老。尽管如此,它仍然是最广泛使用在衰老以及衰好细胞的生物[[标记物]],因为它具有相当可靠的和容易检测之特性。

==结构==

大肠杆菌1024个[[氨基酸]]中的β-半乳糖苷酶最初是在1970定序出来,<ref name="pmid4918568"></ref>而其结构是在24年后,也就是1994年确定该[[蛋白]]是一个464 - kDa的 [[同源]][[四聚体]]与2,2,2点对称性<ref></ref> 且每个单元的β-半乳糖苷酶包括了五个领域 ; 第一区域是胶卷型桶,第二区域和第四区域为[[纤连蛋白]]III型状的桶,第五区域是β-三明治型,而中央的第三区域是TIM型桶。

活性端位于第三个[[结构域]]。<ref name="pmid15950161"></ref> 活性端是由四聚体两个[[亚基]]的元素所组成的,并且在四聚成[[二聚体]]活性端的[[解离]]除去中的扮演关键要素。β-半乳糖苷酶的末端序列中,α-肽参与了于亚基接口中的的α-互补。其[[残基]]22-31帮助以稳定的四[[螺旋束]]形成该界面的主要结构,残基13和15则有助于激活接口。这些结构上的特征为为α-互补的现象,为缺失的氨基末端片段的结果在非活性二聚体的形成提供一个合理的解释。

==[[催化反应]]==

β-半乳糖苷酶的活性端通过“浅层”与“深层”结合[[基质]]来催化水解[[双糖]]。一价的钾离子(K +),以及二价的镁离子(镁2 +)需要酶的最佳活性。以β-[[核苷]]间键为基质经由[[谷氨酸]][[侧链]]上的羧基终端裂解而成。 在大肠杆菌中,谷氨酸-461被认为是取代反应的亲核[[试剂]]。<ref name="pmid1350782"></ref>然而,现在已经知道谷氨酸-461是一种酸[催化剂]。相反的,谷氨酸-537为实际的亲核试剂,他是结合到半乳糖的中间体。

在人类中,是由Glu-268扮演[[水解反应]]的亲合试剂。 [[File:Beta-galactosidase.png|thumb|center|503px|β-半乳糖苷酶所催化的反应]]

==应用==

β-半乳糖苷酶检测常用于[[遗传学]]、分子生物学,以及其他[[生命科学]]。可用于蓝/白[[筛检]]侧中,有活性的酶可以用X-gal来进行检测,会在裂解β-半乳糖苷酶后形成一个深蓝色的产物,并且容易辨识和量化。<ref>[http://openwetware.org/wiki/Beta-Galactosidase_Assay_(A_better_Miller) Beta-Galactosidase Assay (A better Miller) - OpenWetWare<!-- Bot generated title -->]</ref> 它的生产可以透过非水解性诱导结构异构物中的异乳糖─IPTG,从lac操作者中结合并释放lac操纵子,从而使[[转录]]起始端继续进行。

因为他的高表现性质以及它在衰老细胞中的溶酶体累积的特性。尽管有其局限性,它可被当作一个老化的标志物,借由进行体内和体外在定性和定量可用以测定老化程度。

==参考文献==



==外部链接==
*

[[Category:EC 3.2.1]]

[[Category:位于3号人类染色体的基因]] [[Category:水解酶]]
==参考来源==
*[http://zh.wikipedia.org/wiki/%CE%B2-%E5%8D%8A%E4%B9%B3%E7%B3%96%E8%8B%B7%E9%85%B6 维基百科-β-半乳糖苷酶]
== 百科帮你涨知识 ==

[http://www.zk120.com/ji/ 查找更多中医古籍]

[http://www.zk120.com/an/ 查找更多名老中医的医案]

[http://www.zk120.com/fang/ 查找更多方剂]
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