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无菌检查法系指检查药品、[[敷料]]、[[缝合线]]、[[无菌]]器具及适用于药典要求[[无菌检查]]的
其他品种是否无菌的一种方法。
无菌检查在洁净度100级单向流空气区域内进行，其全过程应严格遵守[[无菌操作]],防
止微生物污染。单向流空气区与工作台面，必须进行洁净度验证。
生物制品的无菌检查，应按《中国生物制品规程》中有关无菌检查的规定办理。
[[培养基]]及其制备方法
培养基应适合需气菌、厌气菌或[[真菌]]的生长，可按以下处方制备，亦可使用按该处
方生产的符合规定的[[脱水]]培养基。以下培养基制备时，均以115℃[[灭菌]]30分钟。
1.需气菌、厌气菌培养基(硫[[乙醇酸]]盐流体培养基)
酪胨（[[胰酶]]水解） 15g [[氯化钠]] 2.5g
[[葡萄糖]] 5g 新配制的0.1％[[刃天青]]溶液 1.0ml
[[L-胱氨酸]] 0.5g (或新配制的0.2％[[亚甲蓝]]溶液0.5ml)
硫乙醇酸钠 0.5g [[琼脂]] 0.5～0.7g
(或硫乙醇酸0.3ml) 水 1000ml
[[酵母]]浸出粉 5g
除葡萄糖和刃天青溶液外，取上述成分加入水内，微温溶解后，调节pH为弱碱性，
煮沸，滤清，加入葡萄糖和刃天青溶液，摇匀，调节pH值使灭菌后为7.1±0.2，分装，
灭菌。
在供试品[[接种]]前, 培养基指示剂氧化层的颜色不得超过培养基深度约1/5，否则,须
经水浴煮沸加热, 只限加热一次。
2.真菌培养基
胨 5g [[磷酸氢二钾]] 1g
酵母浸出粉 2g [[硫酸镁]] 0.5g
葡萄糖 20g 水 1000ml
除葡萄糖外，取上述成分加入水内，微温溶解后，调节pH值约为6.8，煮沸,加[[葡萄]]
糖溶解后，摇匀，滤清，调节pH值使灭菌后为6.4±0.2，分装，灭菌。
3.[[选择性培养基]]
(1) [[对氨基苯甲酸]]培养基（用于[[磺胺类药物]]的无菌检查） 照上述需气菌、厌气菌
培养基及真菌培养基的处方及制法，各加对氨基苯甲酸0.125g，溶解后，摇匀,分装,灭
菌。
(2) [[聚山梨酯]]80培养基（用于[[油剂]]药品的无菌检查） 照上述需气菌、厌气菌培养基
及真菌培养基的处方及制法，各加10ml聚山梨酯80，摇匀，分装，灭菌。
4.营养肉汤培养基
胨 10g 肉浸液 1000ml
氯化钠 5g
取胨和氯化钠加入肉浸液内，微温溶解后，调节pH为弱碱性，煮沸，滤清，调节pH
值使灭菌后为7.2±0.2，分装，灭菌。
5.营养琼脂培养基
照上述营养肉汤培养基的处方及制法，加入15～20g琼脂，调节pH值使灭菌后为7.2
±0.2，分装，灭菌。
6.0.5％葡萄糖肉汤培养基
胨 10g 葡萄糖 5g
氯化钠 5g 肉浸液 1000ml
取胨和氯化钠加入肉浸液内，微温溶解后，调节pH为弱碱性，煮沸，加葡萄糖溶解
后，摇匀，滤清，调节pH值使灭菌后为7.2±0.2，分装，灭菌。
7.真菌[[琼脂培养基]]
照真菌培养基的处方及制法，加入15～20g琼脂，调节pH值使灭菌后为6.4±0.2,分
装，灭菌，趁热斜放使凝固成斜面。
上述培养基分别按15ml与40ml或需要量分装于[[试管]]功其他容器中，装量约为试管或
足液量，分装，灭菌，置冷暗处备用。也可用牛肉浸出粉3g，加水1000ml，配成溶液代
替。
培养基质量应通过灵敏度检查。
培养基灵敏度检查法
1.菌种 (1)[[藤黄]]微[[球菌]](Micrococcus Luteus)[CMCC(B)28001]
(2)生孢梭菌(Clostridium sporogenes)[CMCC(B)64941]
(3)[[白色念珠菌]](Candida albicans)[CMCC(F)98001]
度检查符合要求。
对照用菌液
1.[[金黄色葡萄球菌]]（Staphylococcus aureus）菌液 取金黄色葡萄球菌[CMCC(B)
凡无菌检查中，均应取相应溶剂和[[稀释剂]]同法操作，作阴性对照。
1. 直接接种法
(1) 供试品准备 供试品如为注射液、供[[角膜穿通伤]]及手术用的[[滴眼剂]]或灭菌溶
按表1或表2规定量取供试品，加入无菌水或0.9％无菌氯化钠溶液,或该药品项下规定的
溶剂用量制成一定浓度的供试品溶液。
供试品如为[[外科]]敷料，取供试品4个包装,以无菌操作拆开包装，于不同部位分别剪
取约100mg或1cm×3cm的供试品11份；[[肠线]]、缝合线取最小包装5个，拆开包装，共取11
股，接种于足以浸没供试品的适量培养基中。
供试品如为灭菌医用器具，依样品大小、形状的不同，取供试品11个，接种于足以
继续培养，细菌培养2日，真菌培养3日，观察是否再出现浑浊或斜面有无菌生长，或用
[[接种环]]取培养液[[涂片]]，[[染色]]，用[[显微镜]]观察是否有菌。 2. 薄膜过滤法
如供试品有抗菌作用，按表1或表3规定量取供试品，按该药品项下规定的方法处理
24～72小时有菌生长。
结果判断
[[当阳]]性对照管显浑浊并确有细菌生长，阴性对照管呈阴性时，可根据观察所得的结
==参看==
*[[医院药学/无菌检查法|《医院药学》- 无菌检查法]]
