Α2-纤溶酶抑制抗原
目录
概述
α2纤溶酶抑制物主要由肝脏合成，一种单链糖蛋白，是体内特异的抑制活性的丝氨酸蛋白酶，有限时性抑制纤溶酶的作用和抑制纤溶酶原与纤维蛋白结合，防止纤维蛋白被抗纤溶酶水解的作用。
α2-纤溶酶抑制抗原的医学检查
检查名称
α2-纤溶酶抑制抗原
分类
α2-纤溶酶抑制抗原的测定原理
本试验根据双抗体夹心法原理，即将纯化的t-PA单克隆抗体包被在固相载体上温育，然后加含有抗原的待测标本。标本中的t-PA抗原与固相载体上的抗体形成复合物。此复合物与过氧化物酶标记的t-PA单克隆抗体起抗原抗体结合反应，形成t-PA-POD复合物。后者可使邻苯二胺基质液呈棕色反应，其反应颜色深浅与标本中t-PA含量呈正比关系。
试剂
（1）抗体：抗t-PAF（2b＇）2。
（2）过氧化物酶抗体复合物抗：t-PA-peroxidase。
（3）基质：邻苯二胺。
（4）基质缓冲液：0.2mol/L柠檬酸，0.2mol/L柠檬酸钠缓冲液。
（6）洗涤液：0.025mol/L氯化钙-Tween-20-PBS缓冲液。
（7）t-PA标准：组织纤溶酶原缴活物。
（8）0.11mol/L柠檬酸钠溶液。
（9）30% H2O2。
操作方法
（1）用0.05mol/L碳酸盐缓冲液稀释t-PA抗体。
（2）用稀释缓冲液稀释抗体-POD结合物。
（3）用基质缓冲液溶解邻苯二胺（8mg/ml），并加入10μl 30% H2O2。
（4）将t-PA标准倍比稀释成10、5、2.5、1.25、0.625、0.3125IU/ml。
（5）标本稀释：1份柠檬酸钠抗凝血浆加5份稀释液。如果估计t-PA值增高，血浆作1∶10稀释。
（6）用稀释之t-PA抗体包被ELISA反应板，每孔200μl，温育过夜，然后用洗涤液洗3次。
（7）加标准/标本200μl，温育1h后，同上洗涤3次。
（8）加过氧化物酶抗体复合物200μl，温育1h后，同上洗涤3次，洗后立即加基质。
（9）每孔加基质200μl，显色10～15min。
（10）加硫酸（3mol/L）50μl或盐酸（1mol/L）100μl，10min中止反应，于492nm，2h内比色，以稀释缓冲液为本底。
（11）据吸光度读数由标准曲线查得t-PA含量。
正常值
1～12ng/ml。
化验结果临床意义
（1）t-PA含量随年龄、剧烈运动和应激反应而增高，静脉滞留导致t-PA含量增加。
（2）先天性t-PA含量增高症。
（3）高血脂、肥胖症、口服避孕药、冠心病、心肌梗死、动脉血栓形成、缺血性中风等t-PA含量减低。
附注
ELISA法是一项特异性和敏感性较高的免疫学试验。因此必须严格控制每项试验的条件。
相关疾病
肥胖症、血栓形成
