水解含半乳糖苷键的物质,如乳糖(乳糖为一分子葡萄糖与一分子半乳糖经脱水缩合形成的)。
根据糖残基的性质（包括糖苷键的性质）来进行命名和分类的（如α-葡糖苷酶、β-半乳糖苷酶），另也常使用历史上最初发现时来自底物名的惯用名（如蔗糖酶=β-果糖苷酶，麦芽糖酶=α-葡糖苷酶）。对于糖苷酶，也常有催化转移糖苷给水以外的受体的反应，这个反应不一定有生理学的意义，但在作为分解酶用以研究寡糖的结构时，须注意防止由于发生寡糖间糖残基的转换而犯意想不到的错误。
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