卟啉检查法
目录
概述
卟啉是体内合成血红蛋白等物质的中间产物,包括卟胆原,Ⅰ、Ⅲ型尿卟啉原和尿卟啉,Ⅰ、Ⅲ型粪卟啉原和粪卟啉。常采用尿液、粪便和红细胞的卟啉检查法。
操作名称
卟啉检查法
卟啉检查法的适应证
1.红细胞生成性卟啉病包括先天性红细胞生成性卟啉病、红细胞生成性原卟啉病、红细胞生成性粪卟啉病等。
2.肝性卟啉病包括迟发性皮肤卟啉病、急性间歇性卟啉病、混合性卟啉病、遗传性粪卟啉病等。
卟啉检查法的禁忌证
无特殊禁忌。
准备
留取待检标本。
方法
1.尿液尿卟啉检查法
(1)取新鲜尿4ml于试管中,加10滴冰乙酸混合。
(2)加入1ml戊醇,并振摇试管数次,待分层。
(3)在暗室中,用滤过紫外线灯观察戊醇层(上层),灰蓝色为阴性,粉红或红色荧光为阳性。
2.尿液粪卟啉检查法
(1)取新鲜尿液20ml放于试管中,加冰乙醇0.5ml和3%过氧化化氢2~3滴。
(2)再加入4ml乙醚,振摇试管数次,待分层。
(3)在暗室中,用滤过紫外线灯观察乙醚层(上层),灰白或蓝绿色为阴性,粉红或红色荧光为阳性。
3.尿液卟胆原检查法
(1)取新鲜尿液2ml放于试管中,加2ml对二甲氨基苯甲醛,静置3min。
(2)加饱和醋酸钠溶液4ml,混合后加氯仿3ml,充分振摇,待分层。
(3)观察上层水溶液,红色为阳性反应。
4.粪便卟啉的检查法
(1)取一小块粪便(约0.5g)放于试管中,加冰乙酸0.5ml,用玻璃棒搅成糊状。
(2)加4ml乙醚,再搅拌充分,静置。
(3)将上层清液(醋酸醚层)轻轻倒入另一试管中,加1.5mol/L盐酸2ml,充分振摇,待分层。
(4)在暗室中,用滤过紫外线灯观察下层(酸层),灰白或灰蓝色为阴性,粉红或红色荧光为阳性。
5.红细胞中卟啉检查法
(1)在试管中加混合试剂(乙醚∶冰乙酸=4∶1)5ml和末梢血4滴(0.2ml),用玻璃棒将小凝块搅碎。
(2)取上清液加入另一试管中,加3mol/L盐酸1ml,振摇数次,待分层。
(3)在暗室中,用滤过紫外线灯观察下层(酸层),无色为阴性,粉红或红色荧光为阳性。
6.红细胞中卟啉的荧光镜计数法
(1)试管中放1ml生理盐水,加末梢血2滴,摇匀后滴在玻片上(玻片上刻有小方格)。
(2)在荧光显微镜下计数小方格内发亮红色荧光的红细胞,再在普通显微镜下计数红细胞总数,计算出荧光红细胞的百分比。正常人荧光红细胞无或偶见(<1%),若>5%为异常。
注意事项
1.应取新鲜标本。
2.标本、试剂的比例应适当。
3.应充分摇匀,避免反应不充分。