特异性脂酶染色
名称
特异性脂酶染色
分类
血细胞化学染色
英文名
Specific Esterase Stain
概述
阳性反应几乎仅出现在各阶段的粒细胞中，比POX更具特异性，AS-DCE又称为粒细胞特异性酯酶。粒细胞内的氯醋酸AS-D萘酚酯酶水解基质液中氯醋酸AS-DCE萘酚后产生萘酚AS-D，后者再与稳定的重氮盐偶联，生成不溶性红色沉淀，定位于胞质中。
原理
氯乙酸AS-D萘酚被细胞内特异性酯酶（SE）水解，产生AS-D萘酚，后者与重氮盐（坚牢紫酱GBC）偶联，生成不溶性红色沉淀，定位于胞浆中。
试剂
甲液：乙酸钠（含3H2O） 1.94g
巴比妥钠 2.94g
蒸馏水 加至100ml
乙液：0.1mol/L盐酸：取盐酸（比重1.19）0.85ml，加蒸馏水至100ml。
取甲液50ml，乙液45ml，再加蒸馏水135ml，用1mol/L盐酸调整pH至7.5～7.6。
（3）作用液：
氯乙酸AS-D萘酚 10mg
丙酮 0.5ml
蒸馏水 5ml（使溶解）
Veronal乙酸缓冲液 5ml
坚牢紫酱GBC 10mg
溶解，不必过滤立即染色，一次用完。
操作方法
（1）固定：新鲜干燥涂片，用甲醛-甲醇固定液固定30s，或用甲醛蒸气薰5～10min。
（2）水洗，凉干。
（3）放入作用液，37℃ 30min。
（4）水洗，苏木素染液复染l～2min。
（5）水洗，晾干，镜检。
附注：
染色温度以38～39℃，此时酶反应强而无明显扩散，并且萘酚和坚牢紫酱GBC较低温时易溶解。
正常值
阳性反应为红宝石色颗粒，定位于胞浆中。
临床意义
特异性酯酶又称粒细胞酯酶，主要分布在粒细胞和肥大细胞内。原粒细胞为阴性或弱阳性反应，早幼粒细胞和中幼粒细胞呈强阳性反应，分叶核粒细胞酶活性减弱。嗜酸性粒细胞呈阴性，嗜碱性粒细胞、单核细胞和肥大细胞呈阴性或弱阳性反应。巨核细胞、血小板、浆细胞、红系细胞及淋细胞呈阴性。
本染色法主要用于鉴别急性白血病类型。急性粒细胞白血病时，原粒细胞和幼稚粒细胞均呈一定程度阳性，成熟粒细胞酶活性下降。急性单核细胞白血病和急性淋巴细胞白血病时呈阴性。急性粒-单核细胞白血病时，部分白血病细胞（原粒和早幼粒细胞）呈阳性，有些白血病细胞（原单核和幼单核细胞）呈阴性。
相关疾病
单核细胞白血病、急性淋巴细胞白血病
