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== 概述==
血中[[脂肪酸]]主要是以酯化形成存在。其中约45%与[[甘油]]、15%与CH、35%与PL合成酯、仅有5%脂肪酸呈游离状态,主要是[[长链脂肪酸]]。
== 长碳链脂肪酸的医学检查==
检查名称
长碳链脂肪酸 分类
[[血液]][[生化]][[检查]] > [[脂类]]测定 长碳链脂肪酸的测定原理
酶法测定[[血清游离脂肪酸]]分三步[[反应]],反应式如下:
(1)
(2)
(3) 试剂
以Boehringer mannheim游离脂肪酸测定试剂盒为例:
(1)[[缓冲液]]Ⅰ:0.2mol/L pH7.5 KH2PO4(用5mol/L KOH调pH)。
(2)81mol/L [[ATP]][[溶液]]:125mg ATP溶于2.5ml缓冲液Ⅰ中。
(3)10mmol/L MgCl2溶液。
(4)10mmol/L pH6.5[[辅酶A]]溶液。
(5)50g/L Triton X-100溶液。
(6)[[酰基辅酶]]A合成酶 8.4ku/L(用缓冲液Ⅰ配制)。
(7)2-(N-[[吗啉]]代)[[乙烷]]磺酸(2-morpholi-noethanesulphonic acid,MES)缓冲液:0.2mol/L,pH7.5(用KOH调pH)。
(8)N-乙基顺丁烯二酰亚胺(N-ethylmaleimide,NEM),20mmol/L(用MES缓冲液配制)。
(9)4-[[氨基]][[安替比林]]溶液,15mmol/L(用MES缓冲液配制)。
(10)2,4,6-三溴-3-[[羟基]][[苯甲酸]](TBHB)溶液60mmol/L(用MES缓冲液配制)。
(11)[[过氧化物]]酶溶液,2000u/ml。
(12)1g/L NaN3溶液
(13)酰基辅酶A氧化酶溶液:约120u/ml(用缓冲液Ⅰ配制)。 操作方法
(1)混合试剂:
①试剂Ⅰ:含缓冲液Ⅰ 4.0ml、ATP 2.0ml、MgCl2 2.0ml、辅酶A 2.0ml、TritonX-100 4.0ml、酰基辅酶A合成酶2.0ml,加双蒸水4.5ml(共20.5ml)。
②试剂Ⅱ:含MES缓冲液10.0ml、4-氨基安替比林6.0ml、TBHB 8.0ml、NaN3溶液2.0ml、TritonX-100 4.0ml、过氧化物酶溶液0.4ml,双蒸水10.0ml(共40.4ml)。
③试剂Ⅲ:NEM缓冲液2.1ml、酰基辅酶A氧化酶2.0ml(共4.1ml)。
上述三种混合试剂4℃避光[[保存]]可[[稳定]]3天。
(2)各管内加入试剂Ⅰ1ml与试剂Ⅱ2ml,混合,37℃10min。
(3)加入空白与[[血清]][[标本]]各50μl,混合后37℃5min,在546nm测定吸光度为A1。
(4)加入试剂Ⅲ 0.20ml,混合,待20~25min[[反应停]]止后在546nm测定吸光度为A2。
正常值
气相色谱质谱联用法:占[[总脂肪]]酸0.014%。 化验结果临床意义
升高:[[肾上腺]][[白质]][[营养不良]]症([[ALD]])。 附注
若血清游离脂肪酸浓度大于2mmol/L可适当稀释后再测。
== 百科帮你涨知识 ==
[http://www.zk120.com/ji/ 查找更多中医古籍]
[http://www.zk120.com/an/ 查找更多名老中医的医案]
[http://www.zk120.com/fang/ 查找更多方剂]
血中[[脂肪酸]]主要是以酯化形成存在。其中约45%与[[甘油]]、15%与CH、35%与PL合成酯、仅有5%脂肪酸呈游离状态,主要是[[长链脂肪酸]]。
== 长碳链脂肪酸的医学检查==
检查名称
长碳链脂肪酸 分类
[[血液]][[生化]][[检查]] > [[脂类]]测定 长碳链脂肪酸的测定原理
酶法测定[[血清游离脂肪酸]]分三步[[反应]],反应式如下:
(1)
(2)
(3) 试剂
以Boehringer mannheim游离脂肪酸测定试剂盒为例:
(1)[[缓冲液]]Ⅰ:0.2mol/L pH7.5 KH2PO4(用5mol/L KOH调pH)。
(2)81mol/L [[ATP]][[溶液]]:125mg ATP溶于2.5ml缓冲液Ⅰ中。
(3)10mmol/L MgCl2溶液。
(4)10mmol/L pH6.5[[辅酶A]]溶液。
(5)50g/L Triton X-100溶液。
(6)[[酰基辅酶]]A合成酶 8.4ku/L(用缓冲液Ⅰ配制)。
(7)2-(N-[[吗啉]]代)[[乙烷]]磺酸(2-morpholi-noethanesulphonic acid,MES)缓冲液:0.2mol/L,pH7.5(用KOH调pH)。
(8)N-乙基顺丁烯二酰亚胺(N-ethylmaleimide,NEM),20mmol/L(用MES缓冲液配制)。
(9)4-[[氨基]][[安替比林]]溶液,15mmol/L(用MES缓冲液配制)。
(10)2,4,6-三溴-3-[[羟基]][[苯甲酸]](TBHB)溶液60mmol/L(用MES缓冲液配制)。
(11)[[过氧化物]]酶溶液,2000u/ml。
(12)1g/L NaN3溶液
(13)酰基辅酶A氧化酶溶液:约120u/ml(用缓冲液Ⅰ配制)。 操作方法
(1)混合试剂:
①试剂Ⅰ:含缓冲液Ⅰ 4.0ml、ATP 2.0ml、MgCl2 2.0ml、辅酶A 2.0ml、TritonX-100 4.0ml、酰基辅酶A合成酶2.0ml,加双蒸水4.5ml(共20.5ml)。
②试剂Ⅱ:含MES缓冲液10.0ml、4-氨基安替比林6.0ml、TBHB 8.0ml、NaN3溶液2.0ml、TritonX-100 4.0ml、过氧化物酶溶液0.4ml,双蒸水10.0ml(共40.4ml)。
③试剂Ⅲ:NEM缓冲液2.1ml、酰基辅酶A氧化酶2.0ml(共4.1ml)。
上述三种混合试剂4℃避光[[保存]]可[[稳定]]3天。
(2)各管内加入试剂Ⅰ1ml与试剂Ⅱ2ml,混合,37℃10min。
(3)加入空白与[[血清]][[标本]]各50μl,混合后37℃5min,在546nm测定吸光度为A1。
(4)加入试剂Ⅲ 0.20ml,混合,待20~25min[[反应停]]止后在546nm测定吸光度为A2。
正常值
气相色谱质谱联用法:占[[总脂肪]]酸0.014%。 化验结果临床意义
升高:[[肾上腺]][[白质]][[营养不良]]症([[ALD]])。 附注
若血清游离脂肪酸浓度大于2mmol/L可适当稀释后再测。
== 百科帮你涨知识 ==
[http://www.zk120.com/ji/ 查找更多中医古籍]
[http://www.zk120.com/an/ 查找更多名老中医的医案]
[http://www.zk120.com/fang/ 查找更多方剂]