长碳链脂肪酸

概述

血中脂肪酸主要是以酯化形成存在。其中约45%与甘油、15%与CH、35%与PL合成酯、仅有5%脂肪酸呈游离状态，主要是长链脂肪酸。

长碳链脂肪酸的医学检查

检查名称

长碳链脂肪酸

分类

血液生化检查 > 脂类测定

长碳链脂肪酸的测定原理

酶法测定血清游离脂肪酸分三步反应，反应式如下：

（1）

（2）

（3）

试剂

以Boehringer mannheim游离脂肪酸测定试剂盒为例：

（1）缓冲液Ⅰ：0.2mol/L pH7.5 KH2PO4（用5mol/L KOH调pH）。

（2）81mol/L ATP溶液：125mg ATP溶于2.5ml缓冲液Ⅰ中。

（3）10mmol/L MgCl2溶液。

（4）10mmol/L pH6.5辅酶A溶液。

（5）50g/L Triton X-100溶液。

（6）酰基辅酶A合成酶 8.4ku/L（用缓冲液Ⅰ配制）。

（7）2-（N-吗啉代）乙烷磺酸（2-morpholi-noethanesulphonic acid，MES）缓冲液：0.2mol/L，pH7.5（用KOH调pH）。

（8）N-乙基顺丁烯二酰亚胺（N-ethylmaleimide，NEM），20mmol/L（用MES缓冲液配制）。

（9）4-氨基安替比林溶液，15mmol/L（用MES缓冲液配制）。

（10）2，4，6-三溴-3-羟基苯甲酸（TBHB）溶液60mmol/L（用MES缓冲液配制）。

（11）过氧化物酶溶液，2000u/ml。

（12）1g/L NaN3溶液

（13）酰基辅酶A氧化酶溶液：约120u/ml（用缓冲液Ⅰ配制）。

操作方法

（1）混合试剂：

①试剂Ⅰ：含缓冲液Ⅰ 4.0ml、ATP 2.0ml、MgCl2 2.0ml、辅酶A 2.0ml、TritonX-100 4.0ml、酰基辅酶A合成酶2.0ml，加双蒸水4.5ml（共20.5ml）。

②试剂Ⅱ：含MES缓冲液10.0ml、4-氨基安替比林6.0ml、TBHB 8.0ml、NaN3溶液2.0ml、TritonX-100 4.0ml、过氧化物酶溶液0.4ml，双蒸水10.0ml（共40.4ml）。

③试剂Ⅲ：NEM缓冲液2.1ml、酰基辅酶A氧化酶2.0ml（共4.1ml）。

上述三种混合试剂4℃避光保存可稳定3天。

（2）各管内加入试剂Ⅰ1ml与试剂Ⅱ2ml，混合，37℃10min。

（3）加入空白与血清标本各50μl，混合后37℃5min，在546nm测定吸光度为A1。

（4）加入试剂Ⅲ 0.20ml，混合，待20～25min反应停止后在546nm测定吸光度为A2。

正常值

气相色谱质谱联用法：占总脂肪酸0.014%。

化验结果临床意义

升高：肾上腺白质营养不良症（ALD）。

附注

若血清游离脂肪酸浓度大于2mmol/L可适当稀释后再测。

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