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尿游离皮质醇

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创建页面,内容为“== 概述== 尿游离皮质醇由血液游离皮质醇经肾小球滤过而来,因此基量与血浆中真正具有生物活性的游离皮质...”
== 概述==

尿游离皮质醇由[[血液]]中[[游离皮质醇]]经肾[[小球]]滤过而来,因此基量与[[血浆]]中真正具有生物活性的游离皮质醇成正比。测定尿游离皮质醇可以有效、正确地反映[[肾上腺皮质]]的[[功能]]状态。留取24h[[尿量]],用10ml[[冰醋酸]]作[[防腐剂]]。

== 尿游离皮质醇的医学检查==
检查名称
尿游离皮质醇 分类
[[体液]]和[[排泄]]物[[检查]] > [[尿液检查]] 取材
[[尿液]] 尿游离皮质醇的测定原理
[[皮质醇]]为肾上腺皮质所分泌的[[糖皮质激素]],标记[[抗原]]与[[样品]]中的抗原对特异[[抗体]]产生竞争[[抑制]][[反应]],当加入标记抗原和抗体的量恒定时,则带标记的结合物形成与抗原的含量成反比,根据标准曲线求出样品的含量。 试剂
(1)0.1mol/L pH7.0[[磷酸]]-[[氯化钠]][[缓冲液]](PBS)0.2mol/L NaH2PO4·2H2O 100ml,0.2mol/LNa2HPO4·12H2O 400ml,NaCl 9g,加水至1000ml。

(2)1g/L[[明胶]]-磷酸缓冲液(W/V):简称1g/LGPS,贮于4℃。

(3)5g/L明胶-磷酸缓冲液(W/V):简称5g/LGPS,贮于4℃。

(4)2.5g/L DCC[[溶液]]:[[葡聚糖]]T70 250mg,溶于PBS 100ml,加[[活性炭]]NoritA2.5g,搅拌或振摇1h,贮于4℃,使用时再用PBS10倍稀释。

(5)闪烁液:对联三苯([[TP]])4g,1.4-双-2-(5-苯基噁唑基)苯(POPOP)125mg,[[醋酸]]乙酯250ml,二甲苯1000ml,室温避光[[保存]]。

(6)抗体:皮质醇-C21-[[牛血]]清[[白蛋白]]为抗原[[免疫]]家兔,抗体的工作液浓度为1∶3800,对[[皮质酮]]和[[17-羟孕酮]]的交叉分别为10%和17%。

(7)氚标皮质醇:[1,2-3H]皮质醇,比活性([[SA]])=148×1016Bq/mmol(40Ci/mmol),放化纯度>95%。工作液用无水[[乙醇]]配成7000cpm/10μl,密封,贮存于4℃。

(8)皮质醇标准液:上海第九制药厂[[层析]]纯,工作液用无水乙醇配成2ng/100μl,密封,4℃保存。 操作方法
(1)尿样品测定:取万分之一的24h混合尿,用[[蒸馏水]]稀释至0.5ml,于10ml抽提管中,加[[二氯甲烷]]5ml和0.1mol/L NaOH 0.2ml,抽提5min,静止片刻弃去上层液,下层二氯甲烷抽提液用水洗2次,每次1ml,摇1min,离心1500r/min 3min,弃去水层,取二氯甲烷提取液双份各1ml(复管),45℃压缩空气吹干,加3H-皮质醇7000cpm/10μl,45℃吹干,各管加0.2ml抗体应用液(1∶3800用1g/L GPS稀释),摇匀置4℃过夜,以下步骤同标准管。

(2)标准曲线制作:0,0.1,0.3,0.6,1.0,2.0,4.0ng(各点做复管),各管加3H-皮质醇10ml,吹干,每管加抗体0.2ml,另取四管各加3H皮质醇10ml,分别加1g/L GPS 0.7和0.2ml其中二管作总[[脉冲]]测定管,另二管作非[[特异性]]测定(BN%)摇匀后,放4℃过夜。次日各管加5g/L GPS 0.1ml摇匀,再加2.5g/L DCC 0.5ml(总管T不加)。[[分离]]游离与结合物;摇匀4℃停放10min,3000r/min离心10min吸取上[[清液]]0.4ml,加到8ml闪烁液中,混旋1min,避光4h后,用液烁计数仪[[测量]]。

正常值
成人:206.9±44.1nmol/24h 尿 (范围129.7~303.6) 化验结果临床意义
(1)皮质醇增多增多症:血浆和尿皮质醇明显升高,血浆昼夜节律变化消失。

(2)异位产生[[ACTH]]的[[肿瘤]]:如[[燕麦]]型[[肺癌]]、胰、[[甲状腺]]、[[甲状旁腺]]、[[卵巢]]、[[睾丸]]、[[大肠]]、[[胆囊]]、乳腺、以及纵膈瘤等这种癌肿[[组织]]具有分泌ACTH样物质的功能,使促肾上腺皮质合成皮质醇,血浆中皮质醇则显著升高。

(3)[[垂体]]前叶机能亢进症:由于垂体前叶[[促激素]]的大量分泌,靶腺增生,血浆和尿皮质醇可升高。

(4)肾上腺皮质功能低下,如阿狄森、西蒙、[[席汉综合征]],血浆和尿皮质醇含量减少。

(5)长期使用类[[固醇]][[激素]]可通过[[负反馈]]抑制ACTH分泌,使肾上腺皮质处于抑制或[[萎缩]]、则血浆和尿皮质醇含量减少。

(6)[[单纯性肥胖]]、血浆和尿皮质醇含量略高或正常范围内。

(7)[[先天性肾上腺皮质增生症]],因体内缺少某种酶如C20-22断裂酶3β-脱氢酶、17α-羟化酶11β羟化酶和18羟化酶等使皮质醇合成障碍,而皮质醇产生减少。 附注
(1)各管加入3H或标准必须吹干,[[然后]]加抗体,因为3H或标准是乙醇配制,否则会损害抗体。

(2)加定量的3H[[须根]]据实验情况而定(本文加7000cpm),在相应的范围内3H抗原加入量越少[[灵敏度]]就越高。 相关疾病
肺癌、先天性肾上腺皮质增生症

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