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照[[高效液相色谱法]](中国药典2000年版一部附录Ⅵ D)测定。 色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-0.1％[[磷酸]]溶液(75:15)为流动相；检测波长为254nm。理论板数按大黄素峰计算应不低于5000。 对照品溶液的制备 精密称取大黄素对照品适量，加甲醇制成每1ml含4μg的溶液，即得。 供试品溶液的制备 取装量项下的本品，混匀，精密量取20ml，加7.5mol/l硫酸溶液10ml，再加氯仿10ml，加热回流1小时，立即冷却，移置分液．漏斗中，加少最氯仿洗涤容器，洗液并入分液漏斗中，分取氯仿层，酸液加氯仿振摇提取3次，每次ml，合并氯仿液，以[[无水硫酸钠]][[脱水]]，滤过，滤液挥去氯仿，残渣加甲醇适量使溶解，转移至10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。 ‘ 测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，即得。 本品每支含制何首乌以大黄素(C15H10O5)计，不得少于25.0μg。　　

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