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== 口服福氏宋内菌痢疾双价活疫苗药典标准==
Koufu Fushi Songneijun Liji
Shuangjia Huoyimiao ==== 英文名====
Dysentery Vaccine （Live） of
S.flexneri and S.sonnei，Oral === 定义、组成及用途=== 本[[品系]]用表达福氏2a和宋内志贺菌双价菌体[[抗原]]的FS菌株，经培养收集菌体后，加入[[稳定剂]]冻干制成。用于预防[[细菌性痢疾]]。 === 1 基本要求=== 生产和检定用设施、[[原材料]]及[[辅料]]、水、器具、动物等应符合“凡例”的有关要求。 === 2 制造 === ==== 2.1 菌种====
生产用[[菌种]]应符合“[[生物制品]]生产检定用菌毒种管理规程”的有关[[规定]]。 2.1.1 名称及来源
采用[[重组]]技术构建的、能表达福氏2a和宋内志贺菌菌体抗原的FS菌株。 2.1.2 种子批的建立
应符合“生物制品生产检定用菌毒种管理规程”的有关规定。 2.1.3 种子批的传代
[[工作种子批]]菌种自启开后至[[疫苗]]生产，[[传代]]应不超过5代。 2.1.4 种子批的检定 2.1.4.1 培养特性
FS株在固体[[琼脂]]上培养后[[生长]]里无色半透[[明光]]滑的[[菌落]]。 2.1.4.2 染色镜检
应为革兰氏阴性[[杆菌]]。 2.1.4.3 生化反应
[[发酵]][[葡萄糖]]、[[甘露醇]]，[[迟缓]]发酵[[半乳糖]]，但不产气；不发酵[[乳糖]]、[[麦芽糖]]、[[蔗糖]]；无动力（[[2010年版药典三部附录XIV]]）。 2.1.4.4 血清学试验
（1）玻片凝集试验
取35～37℃培养18～20小时的培养物，与相应的福氏志贺菌群3、4，Ⅱ型参考[[血清]]和宋内志贺菌Ⅰ相参考血清，分别进行玻片凝集试验，均应在1分钟内出现[[凝集反应]]。
（2）定量凝集试验
取35～37℃培养18～20小时的培养物，以[[灭菌]]PBS（pH7.2～7.4）稀释成1.0×109/ml的菌悬液，分别与福氏志贺菌群3、4，Ⅱ型参考血清和宋内志贺茵Ⅰ相参考血清做定量凝集试验，充分混合后置35～37℃过夜，以肉眼可见凝集之血清最高稀释度为凝集[[效价]]，凝集效价应不低于参考血清原效价之半。 2.1.4.5 豚鼠角结膜毒力试验
选用[[体重]]300～350g豚鼠（Hartely）2只，取35～37℃培养18～20小时的菌苔一接种环（直径3mm，约含5×1010个活菌）涂布于豚鼠角[[结膜]]，连续观察7天，不得出现任何[[炎症]][[反应]]。 2.1.4.6 免疫力试验
选用体重14～16g小鼠40只，分为4组，每组10只，其中两组为[[免疫]]组，每只皮下注射总菌2.5×109，另两组为[[生理氯化钠溶液]]对照组。共注射3次，每次间隔3天。于末次注射后第14天，用福氏2a和宋内志贺菌菌株50LD50，分别攻击免疫组和对照组各一组，观察3天，保护率应大于70%。 2.1.4.7 免疫原性试验
将FS株接种于厚金[[格尔]]（简称厚氏）斜面或其他适宜[[培养基]]，35～37℃培养18～20小时，刮取菌苔于灭菌的PBS （pH7.2～7.4）中，稀释至一定浓度，经耳[[静脉]]免疫体重2kg左右的家兔3只，每次0.5ml，免疫4次，间隔5～7天，4次注射的[[剂量]]分别含菌2.5×108、5.0×108、1.0×109、2.0×109，于末次注射后10～14天[[采血]]做定量凝集试验，测血清[[抗体]]效价。[[免疫血清]]对福氏2a型志贺菌的凝集效价不低于1：1280，对宋内志贺菌效价应不低于1：320，2/3家[[兔血]]清之凝集效价达到上述要求即为合格。 2.1.4.8 质粒DNA检测
用Kado-Liu法提取FS培养物的[[质粒]][[DNA]]，经0.8%琼脂糖[[凝胶]][[电泳法]][[检测]]应呈该菌株典型的质粒图谱。应有[[分子]]质量为49MD（百万道尔顿）和74MD的两条大质粒带及另两条小质粒带。 2.1.5 菌种保存
[[种子]]批应冻干[[保存]]于8℃以下。
工作种子批菌种检定合格后可使用2年，但每次生产前必须[[检查]]全部特性，合格后方可使用。
启开冻干工作种子批菌种，用灭菌PBS （pH7.2～7.4）或厚氏肉水复苏后铺种厚氏斜面或接种厚氏液体培养基，置35～37℃培养18～20小时；第2～3代菌种采用厚氏液体培养基或厚氏斜面，35～37℃培养6～8小时。由此制备生产用种子。 2.2.2 生产用培养基
采用厚氏液体培养基或其他适宜培养基。 2.2.3 接种和培养
将纯菌检查合格的种子液接种于培养罐内，初始浓度达4×108/ml以上为宜，在适宜的温度培养。培养过程中应[[取样]]镜检，发现[[污染]]即废弃。 2.2.4 收获
在[[细菌]]对数生长期末时收获菌体，离心后将菌体混悬于已灭菌的稳定剂中，制成[[原液]]。 2.2.5 原液检定
按3.1项进行。 ==== 2.3 半成品 ==== 2.3.1 配制
将原液用含5%蔗糖、0.5%[[明胶]]的[[磷酸]]盐[[缓冲液]]稀释至1.0×1011/ml，即为[[半成品]]。 2.3.2 半成品检定
按3.2项进行。 ==== 2.4 成品 ==== 2.4.1 分批
应符合“[[生物制品分批规程]]”规定。 2.4.2 分装及冻干
应符合“生物制品分装和冻干规程”规定。分装后立即冻干，冻干过程中制品温度不超过30℃。[[干燥]]完毕后立即进行真空或充氮封口。 2.4.3 规格
复溶后每瓶1ml。含菌1.0×1011，其中活菌数应不低于2.0×1010。 2.4.4 包装
应符合“[[生物制品包装规程]]”的规定。 === 3 检定 === ==== 3.1 原液检定 ==== 3.1.1 纯菌检查
供试品接种于厚氏斜面，于35～37℃培养48小时，应无杂菌生长。 3.1.2 浓度测定
按“中国细菌浊度标准”测定浓度。
按3.1.1项进行。 3.2.2 活菌率测定
根据“中国细菌浊度标准”比浊浓度将供试品稀释至总菌1.0×1011/ml;采用平皿计数法检测活菌数，活菌率应不低于25%。 ==== 3.3 成品检定====
除装量差异和[[水分]]测定外，应按制品标示量加入灭菌PBS
（pH7.2～7.4），复溶后进行其余各项检定。 3.3.1 鉴别试验
将本品接种厚氏斜面，置35～37℃培养18～20小时后，取菌苔分别用福氏志贺菌群3、4及Ⅱ型血清和宋内志贺菌Ⅰ相血清做玻片凝集试验，应出现明显凝集反应。 3.3.2 物理检查 3.3.2.1 外观
应为乳白色或淡黄色的疏松体，加入灭菌PBS后应在1分钟内[[溶解]]。 3.3.2.2 装量差异
依法检查（[[2010年版药典三部附录Ⅰ]] A），应符合规定。 3.3.3 水分
应不高于3.0%（[[2010年版药典三部附录Ⅶ]] D）。 3.3.4 纯茵检查
按3.1.1项进行。 3.3.5 活菌数测定
采用平皿计数法检测活菌数，应不低于2.0×1010/ml。 3.3.6 免疫原性试验
取本品1瓶复溶后，接种于厚氏斜面，置35～37℃培养18～20小时，刮取菌苔予灭菌PBS （pH7.2～7.4），按2.1.4.7项进行。每10批制品抽检1批进行本试验。 3.3.7 豚鼠角结膜毒力试验
按2.1.4.5项进行。 3.3.8 安全试验
选用体重18～22g小鼠5只，并分别称重；每只灌服1.0×1010的菌量，观察7天，小鼠应健存、体重增加。如不符合上述要求，可用10只小鼠复试1次。
每袋稀释剂含碳酸氧钠0.1～0.2g、[[维生素C钠]]盐0.05～0.1g、甜蜜素0.05～0.1g。加[[灭菌注射用水]]50ml溶解后测定。 3.4.1 pH值
应为7.5～8.5（[[2010年版药典三部附录Ⅴ]] A） 3.4.2 微生物限度检查
依法检查（[[2010年版药典三部附录Ⅻ]] G），应符合规定。 === 4 保存、运输及有效期=== 于2～8℃避光保存和运输。自生产之日起，[[有效期]]为12个月。 === 5 使用说明===
应符合“生物制品包装规程”规定和批准的内容。
口服福氏宋内菌痢疾双价活疫苗使用说明
【药品名称】
通用名称：口服福氏宋内菌[[痢疾]]双价话疫苗
英文名称：Dysentery Vaccine
（Live） of S.flexneri andS.sonnei，Oral
汉语拼音：Koufu Fushi Songneijun
Liji Shuangjia Huoyimiao
【成分和[[性状]]】
本品系用可表达福氏2a和宋内志贺菌双价菌体抗原的FS菌株，经培养收获菌体，加入稳定剂冻干制成。为乳白色或略带黄色的疏松体。
[[有效成分]]：重组痢疾FS菌株活菌体。
辅料：应列出全部批准的辅料成分。
【接种对象】
各年龄组人员均可服用本品。
【[[作用]]与用途】
服用本疫苗后，可使机体产生[[免疫应答]]。用于预防细菌性痢疾。
【[[规格]]】
每瓶1ml，含菌1.0×1011，活菌数不低于2.0×1010。
【免疫[[程序]]和剂量】
全程免疫3次，每次间隔5～7天，成人首次服用1瓶，第2次、第3次各2瓶；6～l3岁[[儿童]]服成人半量；[[5岁以下儿童]]服成人1/3量。
用50ml[[凉开]]水溶解1包稀释剂，制成稀释液。开启疫苗瓶，用所附吸管吸取稀释液少许，加入到疫苗瓶内，将复溶后的本品移入稀释液中，混匀后服用。
【[[不良反应]]】
常见不良反应：
（1）一过性轻度[[呕吐]]、[[腹泻]]，多数情况下2～3天自行消失。
（2）服用疫苗后可出现一过性[[发热]]反应。其中大多数为轻度发热反应，持续1～2[[天可]]自行缓解，一般不需处理；对于中度发热反应或发热时间超过48小时者，可给予对症处理。
罕见不良反应：
（1）严重发热反应：应给予对症处理，以防[[高热惊厥]]。
（2）持续呕吐、腹泻超过3天及腹泻次数超过5次／天以上，应给予对症处理。
极罕见不良反应：
服用疫苗后72小时内可能出现过敏[[性皮]]疹，应及时就诊。
【[[禁忌]]】
（1）已知对该疫苗的任何成分过敏者。
（2）患急性疾病、严重慢性疾病、慢性疾病的急性发作期和发热者。
（3）免疫缺陷、[[免疫功能]]低下或正在接受免疫[[抑制]]治疗者。
（4）[[妊娠期]]妇女。
【[[注意]]事项】
（1）本品严禁注射！
（2）以下情况者慎用：家族和个人有[[惊厥]]史者、患慢性疾病者、过敏[[体质]]者、[[哺乳期]]妇女。
（3）本品与[[抗生素]]同时应用时可能影响疫苗的免疫效果。
（4）勿用[[热水]]服用，以保证疫苗免疫效果。
（5）本品应在空腹或半空腹时服用。
（6）急、慢性胃[[肠道]]疾[[患者]]应暂缓使用。
（7）本品为减毒活疫苗，不推荐在该疾病流行季节使用。
（8）本品与其他活疫苗的使用间隔至少1个月。
（9）严禁冻结。
【[[贮藏]]】
于2～8℃避光保存和运输。
【包装】
【有效期】
12个月。
【执行标准】
【批准文号】
【生产企业】
企业名称：
生产地址：
邮政[[编码]]：
电话号码：
传真号码：
网 址：
《[[中华人民共和国药典]]》2010年版
