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微生物限度检查法

添加171字节, 2017年3月24日 (五) 10:46
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细菌宜选取平均菌落数在30~300之间的稀释级,霉菌宜选取平均菌落数在30~100之间的稀释级作为报告菌数计算的依据。如有1个稀释级在30~300(30~100)之间时,将该稀释级的菌落数乘以稀释倍数报告;如同时有2个稀释级在30~300(30~100)之间时,按下式计算两级比值。
高稀释级的平均菌落数×稀释倍数    高稀释级的平均菌落数×稀释倍数
比值=────────────────
低稀释级的平均菌落数×稀释倍数    低稀释级的平均菌落数×稀释倍数
当比值≤2时,以两稀释级的均值报告,当比值>2时,以低稀释级平均菌落数乘以稀释倍数报告;如同时有3个稀释级的平均菌落数均在30~300之间时,以后2个稀释级计算级间比值报告;如各稀释级的平均菌落数均不在30~300之间,以最接近30或300的稀释级平均菌落数乘以稀释倍数报告;如各稀释级平均菌落数均在300(100)以上,按最高稀释级菌落数乘以稀释倍数报告;如各稀释级平均菌落数均小于30时,一般按最低稀释级的菌落数乘以稀释倍数报告。如当1:10(或1:100 )稀释级平均菌落数等于或大于[[原液]](或1:10稀释级)时,应以培养基稀释法测定,按测定结果报告菌数。
───────┬──────────────────
培养基  │      培养基  │    菌  落  形  态
───────┼──────────────────
曙红亚甲蓝琼脂│呈紫黑色、浅紫色、蓝紫色或粉红色,
│菌落中心深紫色或无明显暗色中心,圆      │菌落中心深紫色或无明显暗色中心,圆│形,稍凸起,边缘整齐,表面光滑,湿      │形,稍凸起,边缘整齐,表面光滑,湿│润,常有金属光泽。      │润,常有金属光泽。
───────┼──────────────────
麦康凯琼脂 │鲜桃红色或微红色,菌落中心深桃红色,
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培养基  │         菌  落  形  态  培养基  │         菌  落  形  态
───────┼────────────────────────────
胆盐硫乳琼脂 │无色至浅橙色,半透明,菌落中心带黑色或全部黑色或无黑色。
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革兰氏染色  革兰氏染色
照大肠杆菌项下方法操作,镜检。
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序│         序│        血清凝集试验    │    ││         │       (A~F“0” 血清)   │    │├──┬───────┬──────┤生化试验│  结  果  ├──┬───────┬──────┤生化试验│  结  果│凝集│ 100℃30分钟   │凝集│ 100℃30分钟 │0.9%氯化钠 │    │号│反应│   号│反应│  [[凝集反应]] │溶液对照  │    │
──┼──┼───────┼──────┼────┼─────────
1  1 │阳性│  阳  性  │ 阴  性 │ 符 合│检出沙门氏菌2  2 │阴性│  阳  性  │ 阴  性 │ 符 合│检出沙门氏菌3  3 │阴性│  阴  性  │      │ 不符合│未检出沙门氏菌
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上述各项试验任何一项不符合或有可疑反应的培养物  上述各项试验任何一项不符合或有可疑反应的培养物,均应进一步鉴定后作出结论。
(3) 绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa)
表4 金黄色葡萄球菌菌落形态特征
─────┬─────────────────
培养基 │   菌  落  形  态  培养基 │   菌  落  形  态─────┼───────────────── ─────┼─────────────────
卵黄高盐 │金黄色、圆形凸起,边缘整齐,外围有琼脂
   │[[卵磷脂]][[分解]]的乳浊圈,菌落直径1~2mm
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甘露醇高盐│金黄色,圆形凸起,边缘整齐,外围有琼脂
│黄色环,菌落直径约0    │黄色环,菌落直径约0.7~1mm─────┴───────────────── ─────┴─────────────────
如有菌落生长并与表4所列特征相符或疑似时,应挑选2~3个菌落,分别接种于营养琼脂培养基斜面上,培养18~24小时,取其培养物革兰氏染色,并作[[血浆凝固酶]]试验。
以无菌[[注射器]]吸取灭菌的含5%枸橼酸钠的0.9%氯化钠溶液1ml,用无菌操作采取家兔(或羊、人)血9ml,轻轻混匀数分钟。待[[血液]]不凝固时,徐徐放入灭菌离心管中,离心,分离血浆,用灭菌吸管取血浆移至灭菌试管中,置冰箱内备用。临用前必须用已知血浆凝固酶试验阳性的金黄色葡萄球菌测试,证明血浆合格后,方可用于试验。
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