红细胞乳酸生成率
目录
概述
乳酸在体内的增加主要是血氧的缺乏，导致三羧酸循环中丙酮酸需氧氧化障碍，糖酵解速度增加，即丙酮酸还原成乳酸的速度增加，血中乳酸与丙酮酸比值增高及乳酸增加。出现高乳酸血症。乳酸的测定一般用全血乳酸分光光度法或血浆乳酸的比色法。
红细胞乳酸生成率的医学检查
检查名称
红细胞乳酸生成率
分类
化验取材
血液
红细胞乳酸生成率的测定原理
在NAD＋存在下，LDH催化乳酸，氧化成丙酮酸。加入硫酸肼捕获产物丙酮酸，并促进反应完成。反应完成后生成的NADH与乳酸为等摩尔，在340nm波长下测定NADH的量，计算乳酸的含量。
试剂
（1）50g/L偏磷酸（MPA）：称取5.0g MPA，溶于蒸馏水中，并稀释到100ml，新鲜配制。
（2）30g/L偏磷酸：称取3.0g MPA，溶于蒸馏水中，并稀释到100ml，新鲜配制。
（3）Tris-硫酸肼缓冲液，pH9.6（Tris 79mmol/L；硫酸肼400mmol/L）：取1mol/L氢氧化钠350ml，加入Tris 4.79g，硫酸肼26g，EDTA Na2 0.93g，以1mol/L氢氧化钠调至pH9.6，用蒸馏水稀释到500ml，4℃保存可稳定8天。
（4）27mmol/L NAD＋溶液：根据需要量称取NAD＋溶于蒸馏水中，4℃可稳定48h。
（5）LDH溶液：取LDH原液，用生理盐水稀释成1500U/ml（如用SigmaⅢ型LDH，该制品从牛心提制，每ml含10mg蛋白，每mg蛋白具有LDH活性400～600U，用盐水稀释成3mg/ml蛋白即可，如按南京军区总院检验科报道方法①，约为1600U/ml，不稀释直接使用；
（6）1mmol/L（9.08mg/dl）乳酸标准液：精确称取L-乳酸锂9.6mg（或DL-乳酸锂19.2mg），以少量蒸馏水溶解，加入25μl浓硫酸，用蒸馏水稀释到100ml，4℃保存可长期稳定。
操作方法
按表1进行。
混匀，置室温15min后，用分光光度计在340nm波长，以空白调零，读取各管吸光度。
正常值
全血乳酸0.5～1.7mmol/L（5～15mg/dl）。血浆中乳酸含量约比全血中含量高7%。脑脊液乳酸含量与全血接近，但中枢神经系统疾病时可独立改变。24h尿液排出乳酸量为5.5～22mmol。
化验结果临床意义
乳酸为体内血氧缺乏时的糖酵解产物，无论是循环衰竭还是呼吸衰竭，都有可能造成危及生命的乳酸中毒症。此时血中乳酸通常超过7mmol/L，甚至高达25mmol/L，有资料表明在高乳酸血症中，乳酸水平低的存活率达65%，而乳酸水平＞10.5mmol/L存活率仅30%。
附注
（1）偏磷酸一般是由偏磷酸（HPO3）及偏磷酸钠（NaPO3）组成的易变混合物。偏磷酸在水溶液中形成各种多聚体（HPO3）x。氢离子催化此多聚体，水化成正磷酸（HPO3＋H2O→H3PO4）。正磷酸不沉淀蛋白质，偏磷酸溶液沉淀蛋白的能力在4℃时仅能维持大约1周。
（2）本法线性范围达5.6mmol/L（50mg/dl）。
（3）本法不用过氯酸作蛋白沉淀剂，过氯酸不能沉淀粘蛋白，干扰丙酮酸的酶法测定（若需用同一滤液作丙酮酸测定），使LDH的酶促反应变慢。
（4）一般乳酸锂未标明L-或DL-者，均为DL-型，L-型乳酸锂价格昂贵。
