纤维蛋白降解产物

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概述

纤溶酶作用下,纤维蛋白(原)可以降解产生不同分子量的碎片X、Y、D,E以及其他一些碎片,总称为纤维蛋白(原)降解产物(FDP)。测定血浆(或尿液)中FDP含量的试验通常有免疫电泳法、免疫扩散法、絮状沉淀法、乳胶凝集(Fi)试验、红细胞凝集抑制试验、葡萄球菌聚集试验、反向血凝试验以及酶联免疫吸附试验等等。本节仅介绍临床上常用的反向血凝试验和葡萄球菌聚集试验。

纤维蛋白降解产物的医学检查

检查名称

纤维蛋白降解产物

分类

临床血液检查 > 出血和凝血检查

取材

血液

纤维蛋白降解产物的测定原理

(1)反向血凝试验:以抗纤维蛋白原抗体致敏红细胞来测定相应的抗原。致敏红细胞上载有抗纤维蛋白原抗体,如受检血清中含有与纤维蛋白原共同抗原决定簇的FDP类物质,则红细胞所载的抗纤维蛋血原抗体将与之结合,红细胞发生聚集。

(2)葡萄球菌聚集试验:纤维蛋白原和纤维蛋白(原)降解产物可使某些凝固酶阴性的金黄色葡萄球菌聚集,故将此种菌株与被检血清混合,若引起细菌聚集,则表明血清中有纤维蛋白降解产物存在。

试剂

(1)反向血凝试验:

①致敏红细胞。

②标准纤维蛋白原。

生理盐水

(2)葡萄球菌聚集试验:金黄色葡萄球菌悬液。

操作方法

(1)反向血凝试验:

①取静脉血1ml,置小试管内,37℃温育1h,分离血清。

②“V”型孔塑料板,第1孔开始直至第12孔,每孔加生理盐水25μl。

③第1孔加受检血清25μl,从第2孔开始依次作倍比稀释。

④每孔致敏红细胞加25μl。以后步骤同标准曲线制备。

⑤标准曲线制备:

A.将已知含量的纯纤维蛋白原以生理盐水稀释成10mg/L。

B.在“V”型孔塑料板上,从第2孔开始依次每孔加生理盐水25μl。

C.将稀释的纤维蛋白原溶液,第1、2孔各加25μl,并从第2孔开始依次作倍比稀释至0.078mg/L。

D.取1支致敏红细胞,用生理盐水1ml作成悬液,每孔加25μl。

E.置微型振荡器,振动30s,放置37℃,温育30min。

F.室温下放20min,观察结果。

⑥计算:

A.标准计算:纤维蛋白原稀释浓度为10、5、2.5……0.0078mg/L,致敏红细胞出现无凝聚现象的前一个孔作反应终点。如第7孔为终点,即抗体的敏感性所能检测纤维蛋白原为0.15625mg/L。

B.标本计算:找出凝集的终点,算出稀释倍数,再将0.15625mg/L乘稀释倍数。

(2)葡萄球菌聚集试验:

①玻片法:吸取菌液应用液0.05ml,被检血清0.05ml,在玻片上混匀,室温下将玻片摇动2min,观察细菌有无聚集现象。有聚集者为阳性,无聚集者为阴性。同时以生理盐水0.05ml代替血清作对照。

②试管法:取被检血清0.1ml,以生理盐水作倍比稀释,然后在每管中加入新鲜配制的菌液应用液0.05ml,摇荡200次/min共2min,立即在每管中加入生理盐水0.5ml,于室温中静置30min,观察结果。并与对照管比较,如有明显细菌聚集,以发生聚集之最后一管作为反应终点。

正常值

(1)反向血凝试验:小于10mg/L。

(2)葡萄球菌聚集试验:玻片法为阴性;试管法为0~2mg/L。

化验结果临床意义

(1)反向血凝试验:FDP含量增高,见于原发性继发性纤溶亢进。

(2)葡萄球菌聚集试验:FDP含量增高,同反向血凝试验。

附注

(1)反向血凝试验:

①使用不同批号的致敏红细胞,均须再次测定纤维蛋白原标准。

保持塑料板干净。

③同一批致敏红细胞存放时间过久,抗体效价可能降低,则须每月定标1次。

(2)葡萄球菌聚集试验:

①被检血清应充分凝固并及时分离血清。

②因胸水、腹水等标本含纤维蛋白原,故在检测前加等量凝血酶(10u/ml),置37℃温育30min,离心,取上清液试验。

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