血清乳糖
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概述
人体内的糖主要以糖原形式贮存,以葡萄糖的形式运输。健康人血清中,主要是葡萄糖,其他糖如果糖、半乳糖、甘露糖极微。从机体排泄的糖除葡萄糖外,还有乳糖、果糖、半乳糖、蔗糖等。
血清乳糖医学检查
英文名
Lactose
血清乳糖的别名
Lac
分类
化验取材
血液
化验方法
糖类测定
原理
在已糖激酶催化下,葡萄糖和ATP发生磷酸化反应,生成葡萄糖-6-磷酸(G-6-P)与ADP。前者在葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)催化下脱氢,生成6-磷酸葡萄糖酸(6-GP),同时使NADP+还原成NADPH。反应式如下:
根据反应方程式,NADPH的生成速率与乳糖浓度呈正比,在波长340nm监测吸光度升高速率,计算血清中乳糖浓度。
试剂
(1)酶混合试剂的成分与浓度:
缓冲液(pH7.5) 50mmol/L
MgSO4 2mmol/L
ATP 2.0mmol/L
NADP+ 2.0mmol/L
HK ≥1500U/L
G6PD 2500U/L
根据试剂盒说明书复溶后,混合配制成酶试剂,置棕色瓶中放冰箱保存,约可稳定7天。
(2)5mmol/L乳糖标准应用液:见GOD法。
操作方法
(1)速率法测定(以半自动分析仪为例):
①主要参数:
系数 8.2
孵育时间 30s
监测时间 60s
波长 340nm
吸样量 0.5ml
温度 37℃
②加样:37℃预温酶混合试剂1000μl,加血清20μl,立即吸入自动分析仪,监测吸光度升高速率(△A/min)。
③计算:
(2)终点法测定:取16mm×100mm试管,按表1编号与操作。
以上各管充分混匀,在37℃水浴,准确放置10min,分光光度计波长340nm、比色杯光径10mm,用蒸馏水调零,分别读取各管吸光度(Au、Ac、As、Ab)。
正常值
酶法:<14.6μmol/L。
临床意义
附注
(1)尿中半乳糖参考值:新生儿<3.33mmol/L;婴儿至成人(24h)<0.08mmol。
(2)血清半乳糖升高也可见于饭后、情绪紧张、使用激素治疗等。