转化 (生物)

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转化细胞通过摄取外源遗传物质(DNARNA)而发生遗传学改变的过程。在转化过程中,转化的DNA片段称为转化因子。受体菌只有处在感受态时才能够摄取转化因子。转化因子通常是质粒DNA。而质粒融合或病毒感染是导致引入外源DNA的原因。动物细胞的转化又被称为转染(transfection)。转基因植物的产生通常也被认为是一种转化。

分子生物学实验中,细胞通过特殊处理后可变成感受态细胞,即可以接受外源DNA。有两种常用方法:

  1. 电穿孔法:细胞与DNA混合;高电压脉冲;随后在富营养培养基复苏。多用于对酵母细胞的转化。
  2. 化学方法:将细胞悬浮于0℃的氯化钙溶液中,并加入外源DNA(一般为质粒),混合后放置约半小时;短暂(一般为75-90秒)升温至42℃(即热休克);加入富营养培养基以进行复苏。该方法一般用于对原核细胞,特别是大肠杆菌的转化。

以上方法尽管原理仍然未知,但实验证明有效。


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