载脂蛋白B

概述

载脂蛋白是血浆脂蛋白部分，各类脂蛋白中均含有一种或几种不同特异性载脂蛋白。目前已经发现的载脂蛋白有20余种。ApoB是其中的一种。

载脂蛋白B的别名

APOB

载脂蛋白B医学检查

检查名称

载脂蛋白B

分类

血液生化检查/脂类测定

化验取材

血液

原理

载脂蛋白B的原理是抗原抗体按一定比例反应时，在溶液内生成细小颗粒的抗原抗体复合物均匀分散在溶液介质内。当光线通过这一浑浊液时，浑浊液内的颗粒能吸收光线，光线被吸收的量与浑浊颗粒的量呈正比，血清ApoA1或ApoB与相应的抗体结合，在一定条件下形成不溶性免疫复合物，使溶液浑浊，即浊度与吸光度成正比。

试剂

（1）巴比妥缓冲液，离子强度0.05，pH8.6。

（2）10g/L琼脂糖（标准电内渗）用巴比妥缓冲液配制，加热溶化，混合后，分装10ml/管，冷后4℃贮存。

（3）0.15mol/L NaCl溶液。

（4）兔（或羊）抗人apoA Ⅰ抗血清（效价不低于1∶16）及apoB抗血清（效价不低于1∶32）。

（5）校准血清（同比浊法）。

（6）染色液：考马斯亮蓝R-250 0.25g溶于甲醇45ml中，加入冰醋酸10ml及水45ml，混合，溶后备用。

（7）脱色液：每升含冰醋酸50ml及甘油100ml。

操作方法

（1）浇板：每板用10g/L琼脂糖10ml，沸水浴中融化，混匀，冷至50～55℃时加入apoA Ⅰ抗血清50μl，apoB抗血清8μl（用量视抗血清效价而定），迅速混匀后倒在预置在水平台上的玻璃板上，冷后放在4℃，20min后打孔，孔在板的阴极端，孔径3mm，孔间距至少5mm，孔容量5μl。把板放入电泳槽，用

滤纸搭桥。

（2）稀释抗原：用0.15mol/L NaCl液将校准血清稀释成1∶100，1∶150，1∶200，1∶300，及1∶400（作校准曲线之用），血清标本按1∶200稀释，放4℃冰箱不得超过3天。

（3）加样：在低电流状态（10mA/板）将稀释好的定值血清及标本分别吸取5μl（准确），加入琼脂糖凝胶加样孔内。每板都要做一系列标准。

（4）通电：稳流24mA/板，端电压6～8V/cm，以流水冷却使琼脂糖保持15℃，电泳3～4h。

（5）脱杂蛋白及制干胶膜：电泳后的琼脂糖板浸泡在0.15mol/L NaCl中30min，将胶膜托置于聚酯薄膜上，用多层滤纸在轻轻加压下吸干胶内水分，然后将滤纸、胶膜与聚酯膜三者一起自然干燥，或用热吹风器吹干，干后胶膜会自然与滤纸及聚酯膜分开。

（6）染色：将琼脂糖胶膜平铺浸泡于染色液内20～30min。

（7）脱色：用脱色液浸泡已染色的胶膜至火箭峰清晰，背景基本无色。可在水中用两片玻璃纸将胶膜夹住，晾干后可长期保存。也可以用流水浸泡脱色至背景干净。

正常值

ApoA1：1.00～1.50g/L；ApoB：0.50～1.10g/L。

化验结果临床意义

ApoA1水平与高脂血症、冠心病呈负相关。ApoB水平与高脂血症及动脉硬化性疾病呈正相关。

附注

（1）购买效价高、单价特异的ApoA1、ApoB抗血清。

（2）为了准确测定ApoA1、ApoB，必须做标准曲线。

（3）免疫透射比浊应以多点定标。按曲线回归运算。

相关疾病

高脂血症

血浆脂蛋白

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