醋酸AS-D茶酚脂酶染色
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概述
氯乙酸萘酚酯酶是粒细胞及肥大细胞的标志酶,主要存在粒细胞的溶酶体内,此酶与过氧化酶在中性粒细胞中均呈阳性反应,但此酶形成的产物比过氧化酶更为特异。
醋酸AS-D茶酚脂酶染色的医学检查
检查名称
醋酸AS-D茶酚脂酶染色
分类
血细胞化学染色
醋酸AS-D茶酚脂酶染色的测定原理
氯乙酸AS-D萘酚被细胞内特异性酯酶(SE)水解,产生AS-D萘酚,后者与重氮盐(坚牢紫酱GBC)偶联,生成不溶性红色沉淀,定位于胞浆中。
试剂
甲液:乙酸钠(含3H2O) 1.94g
巴比妥钠 2.94g
蒸馏水 加至100ml
乙液:0.1mol/L盐酸:取盐酸(比重1.19)0.85ml,加蒸馏水至100ml。
取甲液50ml,乙液45ml,再加蒸馏水135ml,用1mol/L盐酸调整pH至7.5~7.6。
(3)作用液:
氯乙酸AS-D萘酚 10mg
丙酮 0.5ml
蒸馏水 5ml(使溶解)
Veronal乙乙酸缓冲液 5ml
坚牢紫酱GBC 10mg
溶解,不必过滤立即染色,一次用完。
操作方法
(1)固定:新鲜干燥涂片,用甲醛-甲醇固定液固定30s,或用甲醛蒸气薰5~10min。
(2)水洗,凉干。
(3)放入作用液,37℃ 30min。
(4)水洗,苏木素染液复染1~2min。
(5)水洗,晾干,镜检。
正常值
粒细胞系统的原粒细胞为阴性反应,自早幼粒细胞至成熟中性粒细胞均为阳性反应,酶活性并不随细胞的成熟而增强。肥大细胞呈阳性反应。单核细胞、淋巴细胞、浆细胞、幼红细胞、血小板细胞均呈阴性反应。
化验结果临床意义
协助鉴别急性白血病类型:急性粒细胞白血病时,白血病性原始粒细胞可出现阳性反应;急性单核细胞白血病及急性淋巴细胞白血病时,白血病细胞呈阴性反应。
附注
(1)氯乙酸萘酚酯酶(NCE)最佳反应pH为7.0~7.6之间。它不被氟化钠抑制。
(2)严格遵守操作规程,如增加温度和pH值可导致氯乙酸苦酚分解,从而在细胞内产生明显的非特异性酯酶反应。
(3)除本法采用新品红外,还有人选用坚固紫或坚固蓝。
相关疾病
单核细胞白血病、急性淋巴细胞白血病