非脂化脂肪酸

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概述

游离脂肪酸又称非酯化脂肪酸(nonestesterified fatty acid NEFA),血清中含量很少,如用小量血清标本测定必须采用灵敏的方法,并要避免脂肪水解产生的脂肪酸的干扰

英文名

nonestesterified fatty acid;free fatty acid

非脂化脂肪酸的别名

FFA,血清游离脂肪酸

非脂化脂肪酸医学检查

化验取材

血液

化验方法

脂类测定

化验类别

血液生化检查 > 脂类测定

取材

血液

原理

酶法测定非脂化脂肪酸分三步反应,反应式如下:

(1)

(2)

(3)

试剂

以Boehringer mannheim游离脂肪酸测定试剂盒为例:

(1)缓冲液Ⅰ:0.2mol/L pH7.5 KH2PO4(用5mol/L KOH调pH)。

(2)81mol/L ATP溶液:125mg ATP溶于2.5ml缓冲液Ⅰ中。

(3)10mmol/L MgCl2溶液。

(4)10mmol/L pH6.5辅酶A溶液。

(5)50g/L Triton X-100溶液。

(6)酰基辅酶A合成酶 8.4ku/L(用缓冲液Ⅰ配制)。

(7)2-(N-吗啉代)乙烷磺酸(2-morpholi-noethanesulphonic acid,MES)缓冲液:0.2mol/L,pH7.5(用KOH调pH)。

(8)N-乙基顺丁烯二酰亚胺(N-ethylmaleimide,NEM),20mmol/L(用MES缓冲液配制)。

(9)4-氨基安替比林溶液,15mmol/L(用MES缓冲液配制)。

(10)2,4,6-三溴-3-羟基苯甲酸(TBHB)溶液60mmol/L(用MES缓冲液配制)。

(11)过氧化物酶溶液,2000u/ml。

(12)1g/L NaN3溶液

(13)酰基辅酶A氧化酶溶液:约120u/ml(用缓冲液Ⅰ配制)。

操作方法

(1)混合试剂:

①试剂Ⅰ:含缓冲液Ⅰ 4.0ml、ATP 2.0ml、MgCl2 2.0ml、辅酶A 2.0ml、TritonX-100 4.0ml、酰基辅酶A合成酶2.0ml,加双蒸水4.5ml(共20.5ml)。

②试剂Ⅱ:含MES缓冲液10.0ml、4-氨基安替比林6.0ml、TBHB 8.0ml、NaN3溶液2.0ml、TritonX-100 4.0ml、过氧化物酶溶液0.4ml,双蒸水10.0ml(共40.4ml)。

③试剂Ⅲ:NEM缓冲液2.1ml、酰基辅酶A氧化酶2.0ml(共4.1ml)。

上述三种混合试剂4℃避光保存稳定3天。

(2)各管内加入试剂Ⅰ1ml与试剂Ⅱ2ml,混合,37℃10min。

(3)加入空白与血清标本各50μl,混合后37℃5min,在546nm测定吸光度为A1。

(4)加入试剂Ⅲ 0.20ml,混合,待20~25min反应停止后在546nm测定吸光度为A2。

正常值

酶法(37℃):400~900μmol/L。

化验结果临床意义

(1)升高:糖尿病糖原累积病甲状腺功能亢进症、褐色细胞瘤、肢端肥大症巨人症库欣综合征、重症肝损害、心肌梗死妊娠后期阻塞性黄疸、肝炎、肝硬化血色病等。

(2)降低:甲状腺功能减低症、艾迪生病、胰岛细胞瘤、脑垂体功能减退症、降糖药或胰岛素使用过量等。

附注

若非脂化脂肪酸浓度大于2mmol/L可适当稀释后再测。

相关疾病

糖尿病、甲状腺功能亢进症、肢端肥大症、库欣综合征、黄疸、肝硬化、血色病、血浆脂蛋白


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