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脑组织活检

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== 概述==

虽然先进的[[影像]]学技术对颅内病变的诊断有重要意义,如[[CT]]和[[MRI]]能精确地显示脑内[[结构]]和微小病变,但在明确病[[变性]]质方面,仍存在一定困难。而脑[[活检]][[组织]][[病理学]]诊断可弥补CT或MRI在[[定性]]诊断上的不足,只要严格掌握[[适应]]证,遵守操作规程,脑活检是一种安全可靠的诊断[[疑难病]]的手段。

目前主要应用脑立体定向活检术,在手术侵袭很小的情况下,准确获得脑内病变组织,从而达到明确病变性质进行正确治疗的目的。由于CT、MRI引导技术定位精确,既可准确定位靶点,又可识别病灶周围的[[血管]]等重要结构,因此提高了手术的[[安全性]]。与普通[[X线]]定位的立体定向活检术[[比较]]并发症明显减少。普通X线定位的立体定向活检术[[神经系统]]并发症为5%~10%,如穿刺[[损伤]]、[[脑水肿]]、[[脑内血肿]]等。而CT、MRI定位的立体定向活检的并发症仅为1%~4%。近年来,计算机技术的广泛应用以及活检器械的改进,使得CT定位下立体定向活检技术得到广泛应用。

== 操作名称==

脑组织活检
== 脑组织活检的适应证==

脑组织活检适用于诊断不清的颅内各部位占位[[性病]]变,确定脑内病变。
== 脑组织活检的禁忌证==

1.出[[凝血]][[功能]]严重障碍。

2.年龄小于2岁,颅板菲薄<3mm,无法固定立体定向仪。

3.脑内病变富含血管。

4.低位[[脑干]]内的弥漫性病变,病变位于[[脑室]]。

5.脑包虫、[[弓形体病]]等[[寄生虫病]],可通过活检[[扩散]]者。
== 准备==

1.向[[患者]]介绍目的、[[方法]]和[[注意]]事项,以取得合作。

2.备好各种物品。
== 方法==
1.脑组织活检取材方法
脑组织活检一般选择[[大脑]]静区如额叶、枕叶,[[单纯疱疹病毒]]脑[[病毒]]脑炎取颞叶。具体根据CT和MRI定位。

(1)[[颅骨]]钻孔吸取脑组织活检:首先按CT片确定活检部位,选择穿刺点,头皮常规[[消毒]],铺[[无菌]]洞巾,局部[[浸润]][[麻醉]],颅骨钻孔后,切开硬[[脑膜]],取脑皮质及其下[[白质]]一小块。也有采取抽吸法,将针管内组织用[[生理盐水]]冲洗,用滤纸[[过滤]],组织块用[[福尔马林]]固定,[[然后]][[切片]]和染色。近年来,随着CT立体定向活检的开展,本方法已很少用。

(2)立体定向活检:一般采用[[局部麻醉]],小儿及不合作病人可用[[全身麻醉]]。[[体位]]多取[[坐位]],也可根据脑内活检部位选择体位。如额叶及基底节病变取[[仰卧位]],顶叶及颞叶病变取半坐位,枕叶及[[小脑]]病变取[[俯卧位]]。

病人的头部置于立体定向仪框架的中心,定位靶点即将定位板置于框架后,进行CT或MRI扫描,主要集中靶区扫描,将CT或MRI片上的二维数据换算成三维坐标值,并根据此安装定向仪导向装置。

一般根据病变部位确定钻颅位置,钻透颅骨病变在额叶者,常采用冠状缝前,矢状缝旁开3cm处钻颅。切开硬脑膜,将立体定向活检针或立体定向活检钳深入至靶点。选择适当的病变部位,留取2~3块病变组织。

由于病变中心部位常为[[坏死]]组织,病理[[检查]]常无[[特异性]]发现,因此取材应包括病变周边[[强化]]部分。活检组织0.5cm×0.2cm×0.2cm,立即送快速冰冻切片或放入盛有10%福尔马林的小[[玻璃]]瓶内固定用作[[石蜡切片]],适用于大多数的活检[[标本]]。[[需要]]显示[[星形胶质细胞]]和胶质[[纤维]]的Mallory磷钨酸[[苏木]]素(PTAH)染色者需置入Zenker固定液,此固定液[[穿透]]力迅速而均匀。需做电镜者用[[戊二醛]]固定。

2.病理学方法
(1)切片:一般采用石蜡切片,当需要显示组织中特殊成分时要做冰冻切片。

(2)染色:除常规HE染色外,还包括:

①显示尼氏小体的染色:如Thionine硫堇染色,尼氏小体[[溶解]]是[[神经元]]受损的指标。

②显示神经元染色:主要有镀银法,如Bielschowsky石蜡切片染色,[[神经细胞]]、轴突、树突呈黑色,可显示[[神经]]原纤维缠结。

③显示神经髓鞘的染色:分为正常与变性髓鞘染色,如Weil及Luxol Fast Blue-焦油紫正常髓鞘染色,变性髓鞘不着色;而Marchi变性髓鞘染色,正常髓鞘不着色,两种方法可相互引证。

④显示[[神经胶质细胞]]染色:如Holzer星形[[细胞]]染色、Penfield胶质细胞染色,用于显示[[反应]]性增生的胶质细胞,见于CJD、[[Alzheimer病]]。

⑤Mallory磷钨酸苏木素染色:PTAH染色是显示[[横纹]]肌和[[胶原纤维]]的方法,可用做[[星形细胞瘤]]的鉴别诊断。此外,鉴别脑实质[[内外]][[肿瘤]]可用Foot’s网状纤维染色。脑实质外[[发生]]的肿瘤如[[脑膜瘤]]含丰富的网状纤维,而脑实质内肿瘤则无网状纤维[[分布]]。

⑥[[刚果红染色]]:用于显示脑内的[[淀粉]]样物质,淀粉样物质是一种无细胞的[[同质性]]的嗜伊红物质,常见于Alzheimer’s病。染色方法有碘染色、刚果红染色和[[荧光]]染色。刚果红染色较可靠,淀粉样物质呈红色或粉红色。 3.部分疾病的脑活检改变
(1)脑肿瘤:不同类型肿瘤其[[组织学]]改变各异,[[免疫]][[组织化学]]方法对鉴别不同类型的肿瘤有重要意义,神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)阳性的肿瘤有星形细胞瘤和室管膜瘤等,GFAP含量测定还有助于确定胶质瘤及[[判断]]胶质瘤的分级。上皮表达细胞蛋白([[CK]])阳性见于[[转移]]癌。

对某些肿瘤早期诊断困难,脑活检是确诊的惟一手段。有学者报道了13例[[中枢神经系统]][[原发性]][[恶性淋巴瘤]],除常规HE染色,还进行Foot网状纤维染色、[[免疫组化]]等检查,Foot网状纤维染色的特点是瘤组织间有丰富的网状纤维,尤其在血管周围、瘤之间明显。

(2)颅内[[炎症]]:[[疱疹病毒]]是导致[[疱疹病毒性脑炎]](HSE)的常见[[病原体]],包括单纯疱疹病毒(HSV)、[[巨细胞病毒]](CMV)、[[EB病毒]]([[EBV]]),其中CMV病毒主要见于肾[[移植]]或[[AIDS]]病人。

[[单纯疱疹]]脑脑炎是[[病毒性脑炎]]的常见类型,多由Ⅰ型疱疹病毒引起,疱疹病毒性脑炎早期临床表现不典型,容易[[误诊]],延[[误治]]疗。病理改变主要累及颞叶、额叶和扣带回,表现为[[出血]]性脑炎。广泛的神经细胞坏死,炎性细胞浸润,以[[淋巴细胞]]为主,[[小胶质细胞]]增生,受累神经细胞内、核内可找到[[包涵体]]。脑活检还可帮助与其他疾病鉴别。

HSE早期诊断的惟一可靠方法是从脑组织或[[脑脊液]]中[[分离]]病毒。HSE脑活检标本病毒培养24~48小时可获得阳性结果。此外,活检标本应进行[[细菌]]和[[霉菌]]培养、组织病理学和电镜检查,有条件进行免疫荧光、免疫过氧化酶染化酶染色。利用特异性[[抗体]]直接[[检测]]脑组织中的病毒[[抗原]]是另一种早期诊断病毒性脑炎的方法。病毒抗原主要存在于炎症组织周围的神经细胞、小胶质细胞和巨噬细胞,但病毒抗原在脑组织内存在的时间很短,一般3周后很难发现。肖波等报道对12例病人在局麻[[下取]]右额叶脑组织进行[[免疫细胞化学]](ICC)、原位杂交(ISH)、聚合酶链反应([[PCR]]),ICC用于检测病毒抗原,ISH和PCR是检测病毒[[核酸]]。结果10例PCR阳性,4例ISH阳性,6例ICC阳性。

[[散发性脑炎]]是一组[[病因]]未明的脑炎[[综合征]],可有多种病因引起,易和许多脑部疾病相混淆,目前尚无特异性诊断方法,从而给临床治疗带来困难。脑组织活检可帮助确定诊断,尤其是鉴别[[颅内占位性病变]]或其他[[病原性]]脑炎。病理改变有:①神经细胞坏死及软化灶形成,神经细胞肿胀,突起消失,核偏位、固缩,并见到卫星现象及嗜神经现象。有的区域出现小空网状淡染区或泡沫细胞聚集;②胶质细胞增生,呈弥漫性分布;③血管周围大量淋巴细胞和少数[[单核细胞]]浸润;④脑实质内散在点状出血,以白质为主;⑤Loyez染色见部分脑实质呈[[大小]]不一淡染区,提示髓鞘脱失。

(3)[[艾滋病]]:艾滋病(AIDS)是由HIV病毒特异性侵犯辅助性[[T细胞]](CD4细胞)引起[[人体]][[细胞免疫]]严重缺陷而导致[[机会性感染]]、[[恶性肿瘤]]和神经系统损害。据统计10%~20% AIDS患者首发[[症状]]为神经系统损害,30%~63%随病情进展出现神经系统损害。临床常表现[[头痛]]、[[癫痫]]、[[痴呆]]、[[精神]]异常、[[偏瘫]]等。CT和MRI可显示病变的[[形态]]和范围,但不能定性。而立体定向活检术则可解决这一问题。

病理所见:脑组织大体正常或明显[[萎缩]],脑白质苍白,[[显微镜]][[下血]]管周围单核细胞浸润,神经胶质细胞增生,髓鞘脱失,而神经元缺失不明显。重要的是见到多核巨细胞即[[HIV感染]]的巨细胞合胞体,此为本病的病理学诊断依据。

AIDS的机会性感染包括弓[[形体]]脑炎、新型隐[[球菌]][[脑膜炎]]、各种病毒性脑炎、进行性多灶性脑白质质病等。进行性多灶性脑白质质病是由于[[JC多瘤病毒]][[感染]]少突神经胶质细胞造成中枢神经系统亚急性脱髓鞘改变,病理表现[[少突胶质细胞]]和星形细胞肿胀,以及脱髓鞘改变。[[颅内肿瘤]]多见[[非何杰金淋巴瘤]],由软脑膜侵入,临床表现颅神经[[麻痹]]、多发性神经根炎及[[脊髓压迫症]],CT或MRI见病灶呈单一或多发性,注射[[造影剂]]呈广泛性或环状增强。

临床上进行活检的病例多为[[血清]]学特异性抗体阴性、临床表现不典型、治疗无效者。如血清弓形体抗体阳性,先行抗弓形体治疗,若临床症状改善则继续用药,治疗无效需行活检。另外值得注意的是偶有从感染病人[[传播]]给医务人员的报道。因此医务人员应严加防护。

(4)其他疑难疾病:如国内报道利用脑活检诊断Lafora型肌阵挛癫痫,在神经细胞内外可见直径4~20μm的圆形或卵圆形的蓝色包涵体,此种包涵体在PAS染色中为红色,电镜证实为Lafora小体。

CJD(creutzfeldt-jakob)的病因和发[[病机]]制未完全阐明,越来越多研究表明PrP(prion protein,PrP)沉积是其可能的发病机制。PrP为一种由单[[基因]][[编码]]的膜结合性糖蛋白组成,体内含量不高,它能调节神经细胞的游离钙浓度及神经元之间[[信息传递]]方面起一定[[作用]]。脑内异常PrP的发现可帮助诊断CJD。以PrP[[抗血清]]为第一抗体,通过免疫组化和免疫印迹方法可准确测定PrP的存在。

CJD的病理改变特点是[[大脑皮质]]不同程度海绵样改变,有的相互融合,神经细胞变性脱落明显,[[核仁]]不清,星形胶质细胞增生明显,可发现Kuru型淀粉样斑,无任何炎性反应。免疫组化证实朊蛋白沉积在大小脑的[[分子]]层。

== 注意事项==

注意防治并发症。

1.颅内出血 发生率0.5%~3%,包括硬膜外[[血肿]]、硬膜下血肿、脑实质内血肿、脑室出血等。

2.颅内感染 偶有发生,一旦出现颅内感染应及时用[[抗生素]]治疗。

3.癫痫发作 由于手术后可能产生上述并发症,因此,应严格掌握适应证。

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