固相抗体竞争法

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注解

试管固相抗体竞争法是一种新型检测反应模式,特别适宜半抗类小分化合物的检测。首先将抗体IgG共价键结合至聚苯乙烯管内,不必加分离剂及离心沉淀,简便快速。以测定血栓素B2(TXB2)为例,取固相抗体管,按下表程序加入样品和试剂。

固相抗体竞争法加液程序(μl)

<TR> <TD>试剂</TD> <TD>S0管</TD> <TD>S1~7管</TD> <TD>QC管</TD> <TD>U管</TD></TR> <TR> <TD>标准零液</TD> <TD>100</TD> <TD>-</TD> <TD>-</TD> <TD>-</TD></TR> <TR> <TD>标准液</TD> <TD>-</TD> <TD>100</TD> <TD>-</TD> <TD>-</TD></TR> <TR> <TD>QC液</TD> <TD>-</TD> <TD>-</TD> <TD>100</TD> <TD>-</TD></TR> <TR> <TD>待测血浆</TD> <TD>-</TD> <TD>-</TD> <TD>-</TD> <TD>100</TD></TR> <TR> <TD>125I-TXB2液</TD> <TD>100</TD> <TD>100</TD> <TD>100</TD> <TD>100</TD></TR>

加入试剂和样品后置振荡器1-2h,或放37℃温育4h,吸去管内液体,用3ml蒸馏水洗3次,在自动γ计数器测放射性。

注意事项。固相法NSB很低,一般均<1%,故可忽略不计。本法固相抗体包被量要求匀一性,批内CV<5%。


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