检查孕、产妇血清中有无特异性抗体

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操作名称

检查孕、产妇血清中有无特异性抗体

方法及内容

1.夫妇ABO血型相合者,可将男方5%红细胞,加入孕、产妇血清作盐水和酶介质及抗人球蛋白试验,任何1项显示阳性,则示血清中有抗体,盐水中不凝集,其他介质中凝集,则为不完全抗体,可进一步用配组谱细胞检查抗体,并测效价

2.夫妇ABO血型不合者,可利用免疫性IgG抗A(B)不被巯基乙醇破坏和不被血型物质中和的性质,用巯基乙醇(2-ME)破坏或用血型物质中和孕产妇血清中的天然IgM抗A(B),再测定免疫性抗体及其效价,一般可在怀孕第3或7个月前后测定,若7个月后抗体效价过高或胎儿情况不好,可建议引产。

3.孕、产妇血清中IgG抗A(B)测定

巯基乙醇处理血清后IgG抗A(B)测定:

pH7.4 PBS配方:KH2PO41.73g, Na2HPO4·12H2O 19.35g NaC1 8g,蒸馏水加至1000ml。0.2mol/L 2-ME配制:取化学纯2-ME液14.7ml,以pH7.4 PBS稀释至 1000ml,分装于1-2ml安瓶,保存于4℃冰箱内,可用1个月。抗人球蛋白试剂。孕妇血清,A(B)型红细胞经洗涤3次后配成5%悬液。

操作方法:①待检血清与0.2mol/L 2-ME在小试管中等量混合,加塞置室温2h。②2-ME处理后血清以PBS或生理盐水倍量稀释,每管0.2ml,至10管。③每管加相应5%A(B)红细胞,置37℃水浴1h。④以3000r/min离心15s,观察并记录凝集情况,不凝集的各管内的红细胞以PBS或生理盐水洗3次后,加入抗人球蛋白试剂2滴混匀,3000r/min离心15s,观察结果。

结果判读:在盐水介质中不凝集,加抗人球蛋白试剂后显凝集,表示待检者血清中有IgG抗A(B)抗体存在。举例见表一、表二。

表一 孕妇血清IgG测定结果

<TR> <TD>稀释度</TD> <TD>1 : 1</TD> <TD>1 : 2</TD> <TD>1 : 4</TD> <TD>1 : 8</TD> <TD>1 : 16</TD> <TD>1 : 32</TD> <TD>1 : 64</TD> <TD>1: 128</TD> <TD>1: 256</TD></TR> <TR> <TD>盐水介质</TD> <TD>1+</TD> <TD>±</TD> <TD>-</TD> <TD>-</TD> <TD>-</TD> <TD>-</TD> <TD>-</TD> <TD>-</TD> <TD>-</TD></TR> <TR> <TD>抗人球蛋白介质</TD> <TD>1+</TD> <TD>±</TD> <TD>-</TD> <TD>-</TD> <TD>-</TD> <TD>-</TD> <TD>-</TD> <TD>-</TD> <TD>-</TD></TR>结果表示无IgG抗A(B)或效价低于4 表二 孕妇血清IgG测定结果

稀释度 1 : 1 1 : 2 1 : 4 1 : 8 1 : 16 1 : 32 1 : 64 1: 128 1: 256 1: 512
盐水介质 3+ 2+ 1+ ±
抗人球蛋白介质 0 0 0 0 3+ 2+ 1+ 1+

0表示在盐水介质中已显凝集,不必再和抗人球蛋白作用。结果表示IgG抗A(B)抗体效价为128。

备注

在盐水介质中不凝集,加抗人球蛋白试剂后显凝集,表示待检者血清中有 IgG抗A(B)抗体存在。


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