脑脊液胆固醇酯
目录
概述
脑脊液中脂类的主要成分为胆固醇、胆固醇酯、中性脂肪、磷脂(卵磷脂、髓磷脂等)、脂肪酸、糖脂等,含量甚少,仅在神经组织损伤、变性和脱髓鞘疾病时增多。
脑脊液胆固醇酯的医学检查
检查名称
脑脊液胆固醇酯
分类
化验取材
脑脊液
脑脊液胆固醇酯的测定原理
待测标本中的胆固醇酯(CE)被胆固醇酯水解酶(CEH)水解成游离胆固醇(Chol),后者被胆固醇氧化酶(CHOD)氧化成△4-胆甾烯酮并产生过氧化化氢,再经过氧化物酶(POD)催化4-氨基安替比林与酚(三者合称PAP),生成红色醌亚胺色素(Trinder反应)。醌亚胺的最大吸收在500nm左右,吸光度与标本中TC含量成正比。反应式如下:
试剂
(1)酶试剂:组成因不同商品试剂盒而异,酶用量也因酶制品质量而定。一般为干粉或冻干品,临用前用缓冲液配制成单一试剂:
磷酸盐缓冲液pH 7.7(0.4mol/L)
假单胞菌CEH ≥800U/L
奴卡菌CHOD ≥400U/L
辣根POD ≥1000U/L
胆酸钠 3mmol/L
4-氨基安替比林 0.5mmol/L
酚 3.5mmol/L
缓冲液用于复溶其他试剂。酶与显色剂可以分装为两管或为单一的,其剂型可以为水溶液,冻干品或干粉。
磷酸盐缓冲液可用Tris缓冲液替代,后者浓度100mmol/L,pH7.7。为提高显色灵敏度。酚可以用其衍生物或其他色原代替。
(2)Chol标准参考血清:本法TC测定中以准确定值的参考血清为标准,参考血清的Chol浓度最好有高、中、低3种,中浓度血清的Chol含量应在3.8~
5.2mmol/L。
(3)试剂与参考血清的稳定性:未开瓶的试剂4℃存放至少稳定1年。复溶后的酶试剂在2~8℃至少稳定1周,15~25℃3天,如在此期内出现肉眼可辨的粉红色为不合格。标签上注明出品日期及有效期。
液态的Chol参考血清(含有不抑制CHE、CHOD与POD的防腐剂),-20℃保存至少稳定2年,冻干品更稳定。标签上注明出品日期及有效期。
操作方法
使用酶分析操作法。
正常值
0.0435±0.0077mmol/L。
化验结果临床意义
脑血管病患者并有高血压脑脊液胆固醇酯与游离胆固醇显著升高,其中胆固醇酯与游离胆固醇的参考值分别为0.0435±0.0077mmol/L和0.092±0.018mmol/L,并且以前者升高突出;脑动脉硬化患者也明显增高,但以游离胆固醇升高为主,故此两项的检测具有鉴别诊断的意义。
附注
(1)现在临床上已很少采用游离Chol测定,如须测定游离Chol,最简便的也是用酶法,即在上述TC测定用酶试剂中省去CEH即可,一般游离Chol约占TC的30%左右。
(2)TC测定要求做到标准化,与国际标准取得一致,必须有准确可靠的标准参考物质(SRM)。