血清铁蛋白
概述
铁蛋白是铁贮存于人体的主要形式之一。具有结合铁和贮备铁能力,以维持体内铁的供应和血红蛋白的相对稳定。血清铁蛋白测定是诊断缺铁性贫血的重要指标,也是恶性肿瘤的标记物之一。
血清铁蛋白医学检查
分类
取材
血液
原理
吸附于聚苯乙烯上的铁蛋白抗体与样品中的铁蛋白结合,形成铁蛋白-抗铁蛋白抗体复合物,再与酶标记铁蛋白抗体结合形成铁蛋白抗体-铁蛋白-酶标铁蛋白抗体复合物,其复合物中的辣根过氧化物酶作用于邻苯二胺-H2O2底物产生有色物质,与标准铁蛋白比较求得血清中铁蛋白含量。
试剂
(1)9g/L NaCl溶液。
(2)洗涤液0.05mol/L PB(pH7.2),内含0.05% Tween20。
(4)系列铁蛋白标准液:铁蛋白标准品(可购买)用稀释液配成5,15,25,35,45ng/ml。
(5)抗铁蛋白血清,用铁蛋白标准物免疫动物制成,有商品供应。
(6)酶标记抗体:辣根过氧化物酶(HRP)与抗铁蛋白抗体的结合物,有商品供应。
(7)底物溶液取0.1mol/L Na2HPO4 5.14ml,加0.05mol/L柠檬酸4.86ml和邻苯二胺(OPD)4mg混匀溶解,临用前加3%H2O2 0.05ml。
操作方法
(1)测定、标准、空白各孔均加100μl抗铁蛋白血清,放置4℃过夜,各孔用洗涤液洗3次,每次放室温3min。
(2)标准和测定孔内分别加100μl系列铁蛋白标准液和样品(用稀释液稀释10倍),置37℃50min,各孔用9g/L NaCl洗3次,洗法同上。
(3)各孔均加100μl酶标记抗体,置37℃50min,再用9g/L NaCl洗3次。
(4)每孔加100μl底物溶液,置37℃30min显色。
(5)最后每孔加50μl 2mol/L H2SO4,以终止反应,492nm比色,读取各孔吸光度。
附注:
(1)洗涤过程中避免用力过猛,以防将吸附于聚苯乙烯上的结合物冲洗掉。
(2)可改用聚乙烯试管法,此时试剂的用量要适当加大,最后用分光光度计比色。
正常值
男性124±66ng/ml,女性68±33ng/ml。
临床意义
血清铁蛋白是体内含铁量最丰富的一种蛋白质。肝、脾、红骨髓及肠黏膜是铁储备的主要场所,约占全身的66%,测定血清铁蛋白是判断体内铁贮量的重要指标。对诊断缺铁性贫血,铁负荷过度,营养状况调查都有重要意义,同时铁蛋白作为一种肿瘤标志物,对临床某些恶性肿瘤的诊断也具有一定参考价值。
附注
(1)洗涤过程中避免用力过猛,以防将吸附于聚苯乙烯上的结合物冲洗掉。
(2)可改用聚乙烯试管法,此时试剂的用量要适当加大,最后用分光光度计比色。
相关疾病
缺铁性贫血