血管紧张素转换酶
目录
概述
血管紧张素转化酶（ACE）又称激肽酶Ⅱ或肽基-羧基肽酶，系统命名为肽基-二肽水解酶。属血管内皮细胞膜结合酶，由肽的C端将氨基酸切为两段变换而来，可使肽链C端二肽残基水解。ACE可催化血管紧张素Ⅰ（十肽）水解成八肽的血管紧张素Ⅱ，使血管进一步收缩，血压升高。也可作用于肾上腺皮质，促进醛固酮的分泌。因此，ACE是肾素-血管紧张素-醛固酮的重要成分。ACE还催化具有降压作用的缓激肽水解而失去活性。ACE广泛分布于人体各组织，以附睾、睾丸及肺的含量较丰富，其中肺毛细血管内皮细胞ACE活性最高。肾、脑垂体等组织酶活性较低。ACE测定方法主要有比色法、酶偶联法等。
血管紧张素转换酶的别名
血管紧张素转化酶
血管紧张素转换酶的医学检查
检查名称
血管紧张素转换酶
分类
取材
血液
血管紧张素转换酶的测定原理
（1）三硝基苯磺酸钠（INBS）显色法：底物马尿酰-甘氨酰-甘氨酸（Hip-Gly-Gly）在ACE作用下，释放出甘氨酰-甘氨酸（Gly-Gly），后者与三硝基苯磺酸（TNBS）作用，生成黄色的三硝基苯-甘氨酰-甘氨酸（TNP-Gly-Gly），其含量与ACE活性呈正相关。
（2）酶偶联法：ACE使底物马尿酸双甘肽（Hip-Gly-Gly）水解成马尿酸（Hip）和双甘肽（Gly-Gly），后者与L-γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺（GGCN）和γ-谷氨酰基转移酶（GGT）偶联，形成3-羧基-4-硝基苯胺，在340nm处测其吸光度，以反映ACE活性。
试剂
（1）三硝基苯磺酸钠（INBS）显色法：
①底物液：用5mmol/L的Tris溶液配制30mmol/L HGG溶液，此液中含0.4mol/L Na2SO4、0.3mol/L NaCl，调pH7.3。
③100g/L钨酸钠（含2个水）溶液。
④0.33mol/L NaSO4。
⑤60mmol/L TNBS溶液。
⑥40mmol/L Gly-Gly。
（2）酶偶联法：
①50mmol/L HEPES缓冲液：称羟、乙基哌嗪乙磺酸（HEPES）1.191g，加双蒸馏水100ml溶解，用于配制GGT、CGCN和基质缓冲液。
②20kU/L GGT贮存液：取HEPES缓冲液5ml，加入GGT 100U，混匀后分装小瓶，－20℃保存。
③6.7kU/L GGT应用液：将上述贮存液用二倍量的HEPES稀释配制。
④0.1mmol/L GGCN溶液：称GGCN 20mg，加入50mmol/L HEPES 60ml，溶解后4℃保存。
⑤基质缓冲液：称HEPES 1.191g，NaCl 1.755g，Na2SO4 5.68g，用双蒸馏水溶解后，用NaOH调pH至8.0，再补充双蒸馏水至100ml，4℃保存。
⑥基质液：由Hip-Gly-Gly 89.5mg加基质缓冲液10ml溶解混合而成。此液各试剂终浓度为：HEPES 50mmol/L，NaCl 30mmol/L，Na2SO4 400mmol/L，Hip-Gly-Gly 30mmol/L。
⑦10mmol/L双甘肽标准液：称Gly-Gly 52.9mg加双蒸馏水溶解，并稀释至100ml，此为贮存液（40mmol/L）。1份贮存液和3份双蒸馏水混合即为应用液。
操作方法
（1）三硝基苯磺酸钠（INBS）显色法：取试管2支，标明空白管（B）和测定管（U），各加血清0.01ml，B管加试剂（1）、（3）、（4），U管加底物0.1ml，置37℃水浴30min；U管加试剂（3）、（4）各0.1ml，然后B、U管各加蒸馏水1.0ml，混匀；1500g离心10min，各取上清液0.75ml，分别加入试剂（2）1.0ml及TNBS 0.05ml，室温30min或37℃ 15min，用5mm比色杯，在420nm处，B管调零，读取U管吸光度。
（2）酶偶联法：取小试管4支，分别标明测定管（U），标准管（S），血清空白管（SB），试剂空白管（RB）。按表1操作。
混匀，以双蒸馏水调零点，410nm波长比色，记录各管2min吸光度△A值。
正常值
（1）三硝基苯磺酸钠（INBS）显色法：26.1～56.7kU/L。
（2）酶偶联法：289±83U/L。
化验结果临床意义
血清ACE测定主要同于肺部疾病的诊断，对其他系统疾病的诊疗也有一定
价值。
（1）肺部疾病：绝大多数结节病患者血清ACE活力升高，其阳性率及幅度与病情活动与否和病变累及的范围有关。肺结核也可升高，而哮喘发作、急性心原性肺水肿、慢性阻塞性肺疾患、自发性气胸、肺纤维化、成人呼吸窘迫综合征等血清ACE均有不同程度下降。
（2）肝脏疾病：多数肝脏病患者ACE活性升高，升高幅度依次为肝硬化、急性肝炎、慢性肝炎。脂肪肝则正常。
（3）甲状腺疾病：甲亢患者ACE活性明显高于其他甲状腺疾病，且酶活力高低与T3、T4含量呈正相关。
（4）其他：糖尿病、虹膜炎、免疫母细胞肉瘤等，血清ACE升高；高血压、结肠炎等则降低。
附注
（1）三硝基苯磺酸钠（INBS）显色法：
①标本在室温或冰箱存放1周，酶活力无明显变化，－15℃保存3周酶活性稳定。
②胆红素对ACE有明显抑制作用，故重度黄疸可使测定结果偏低。EDTA是ACE的强抑制剂，NaCl和Na2SO4对ACE有明显的活化作用，溶血、脂血对结果无影响。
③本法与紫外分光光度法酶活力单位一致，但其测得值为紫外法的9倍。
（2）酶偶联法：
①当底物pH 8.0，GGCN 1.0mmol/L，GGT6.7ku/L时，ACE活性与吸光度值有良好线性。线性范围大，即使ACE在1500U/L，不用稀释也可获得理想结果。
②GGCN浓度选择：本反应体系中GGCN既是测定酶ACE的受体，又是指示酶GGT的供体。以1.0mmol/L的GGCN最理想，在此浓度下GGCN与吸光度保持良好的线性。
③GGT对测定的影响：本反应利用GGT将双甘肽与GGCN偶联，生成黄色的3-羧基-4-硝基苯胺，其加入量可直接影响测定结果。GGT高浓度可使底物过度消耗，使吸光度偏离曲线；低浓度GGT又使吸光度偏低，灵敏度不高。每次加入0.335 U GGT，可获得理想吸光度与线性。在此浓度下，酶基质液的空白管吸光度＜0.1A。
相关疾病
结节病、肺结核、肺水肿、自发性气胸、气胸、肝硬化、脂肪肝、糖尿病、肉瘤、黄疸
