轮状病毒抗体
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概述
人类轮状病毒(HRV)归属呼肠病毒科,为RNA病毒类,是人类非细菌性肠炎的常见致病因子,主要经粪-口传播,感染后血中很快出现IgM和IgG抗体,用ELISA法检查粪便中病毒抗原是常用的诊断方法。
轮状病毒抗体的医学检查
检查名称
轮状病毒抗体
分类
血清学检查 > 病毒的血清学检查
化验取材
轮状病毒抗体的测定原理
兔抗轮状病毒抗体包被微孔,捕获待测抗原。加豚鼠抗轮状病毒抗体与抗原特异结合,然后加酶标抗豚鼠IgG,最后加底物显色。
试剂
国内有成套试剂,内含兔抗轮状病毒抗体、豚鼠抗轮状病毒抗体、羊抗豚鼠IgG酶标记抗体等。
操作方法
(1)兔抗轮状病毒抗体最适浓度包被单数孔作为试验孔,正常兔血清包被双数孔为对照孔,每孔100μl,4℃ 24h以上,洗3次,干后4℃保存备用。
(2)待检粪便用0.01mol/L PBS稀释成20%悬液,3000r/min离心30min,取上清液,加等量稀释液(含20.0g/L牛血清清蛋白),每孔100μl,每份标本加试验孔和对照孔各2孔。每板均设阳性(病毒抗原)和阴性(正常粪便)对照各1份。4℃过夜,洗3次。
(3)将豚鼠抗轮状病毒抗体稀释成最适浓度,每孔加100μl,37℃ 1h,洗3次。
(4)加入酶标羊抗豚鼠IgG,每孔100μl,37℃ 1h,洗3次。
(5)加入邻苯二胺-H2O2底物溶液,每孔100μl,37℃ 20min。加入2mol/L H2SO4终止反应,用ELISA检测仪测定492nm吸光度。
正常值
P/N≥2.1为阳性。
化验结果临床意义
粪便中轮状病毒抗原阳性可诊断为轮状病毒性腹泻。
附注
ELISA法较敏感,特异地以患者粪便中检出轮状病毒抗原,从而做出诊断。
相关疾病
腹泻
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