C3致肾炎因子
目录
概述
C3肾炎因子（C3Nef）是旁路途径C3转化酶（C3b，Bb）的一种IgG类自身抗体，C3Nef与C3b、Bb按1∶1∶1比例结合，可以使此酶稳定，免遭C3b-INA和B1H的灭活，从而导致C3和其他补体成分经旁路途径活化。检测C3Nef时，一般将正常人血清与待测血清在EGTA存在下共育，如正常人血清中天然C3消耗或转化为C3裂解产物（C3SP），即说明待测血清中有C3Nef存在。
C3致肾炎因子的别名
C3致肾炎因子的医学检查
检查名称
C3 致肾炎因子
分类
C3致肾炎因子的测定原理
（1）交叉免疫电泳测定法：将待测血浆加至正常人血浆中，如前者含C3Nef，可使后者中的C3发生裂解。电泳使C3SP与天然C3分开后作交叉电泳可见2个沉淀峰。与对照（应只一个沉淀峰）比较即可判定有无C3Nef。
（2）溶血法：含C3Nef的血清、正常人血清和绵羊红细胞（SRBC）在含EGTA的缓冲液中共育时，在SRBC上可形成与细胞结合的稳定的C3b、Bb·C3Nef，后者可使随后加入的大鼠血清中的补体成分活化，导致SRBC溶解。溶血程度与C3Nef量呈正相关。
试剂
（1）交叉免疫电泳测定法：
①0.05mol/L EGTA＋0.1mol/L MgCl2：EG-TA（乙二醇双乙胺醚-N，N-四乙酸）1.9g，MgCl2·6H2O 2.03g，加蒸馏水80ml，60℃加热并加4mol/L NaOH使溶，校pH为7.45，补加蒸馏水至100ml。
②0.2mol/L EDTA：EDTA-Na2·2H2O 7.4g，配法同EGTA。
③7.5mmol/L EDTA：EDTA-Na2·2H2O 2.79g溶于蒸馏水1000ml中。
④待测和对照血浆：迅速分离血浆后立即测定或－70℃冻存。
（2）溶血法：
①EGTA-VBS：巴比妥0.26g，巴比妥纳0.17g，NaCl 3.50g、MgCl2·6H2O 0.40g，EG-TA3.04g加蒸馏水至500ml，调pH至7.4。
②EDTA-VBS：巴比妥2.88g、巴比妥纳1.88g、EDTA-Na2 3.79g，明胶1.00g，NaCl 0.85加蒸馏水至1000ml，调pH至7.4。
③2.5%SRBC悬液：SRBC用生理盐水洗2次，EGTA-VBS洗1次。用前以EGTA-VBS配成2.5%悬液。
④待测血清与正常对照血清：采血后尽快分离，立即检测或－30℃保存，1周内检测。
⑤大鼠血清：2～3只健康大鼠血清混合，分装，－30℃保存。
操作方法
（1）交叉免疫电泳测定法：按表加样（表1）。
①将各管置37℃水浴45min，自管3与管4各取出25μl加至管2，混匀。
②浇注含0.35g/L EDTA-Na2的10.0g/L琼脂糖凝胶3ml于7cm×7cm玻璃板之一边（宽2cm，可用框架浇注），凝固后于距阴极侧1cm、4cm处各打孔一个，分别注入管1、2内容物各10μl。10V/cm电泳1h。取下凝胶板，在空余的5cm板面上浇注含抗C3血清的10.0g/L琼脂糖凝胶8ml，使与原先的胶面融合。凝固后与第一次电泳方向垂直，作第二次电泳，3V/cm电泳6～8h。观察沉淀峰。
（2）溶血法：
①取2.5%SRBC悬液120μl，加待测血清和正常对照血清各40μl，30℃水浴10min后用EDTA-VBS洗5次。
②沉积细胞加入用EDTA-VBS作1∶10稀释的大鼠血清0.2ml，37℃水浴60min。
③补加EDTA-VBS 1ml后2000r/min离心10min，取上清于412nm测吸光度。
正常值
以＞0.128为C3Nef阳性。
化验结果临床意义
膜增殖性肾小球肾炎、部分脂肪营养不良（PL）、急性肾小球肾炎、SLE、脑膜炎等可呈阳性。
附注
管1、管2均为单峰时判为阴性。管1为双峰，管2为单峰为C3Nef阳性。如管2也为双峰，则可能是试验过程中C3自然裂解造成的假阳性，也可能是待测血清中已存在有C3裂解产物之故。
相关疾病
脂肪营养不良、急性肾小球肾炎
