RCD
目录
概述
RCD是影响血液表观黏度和体内微循环有效灌注的重要因素之一。同时又是红细胞寿命的重要决定因素。RCD是由细胞膜的黏弹性、胞浆的黏度(内黏度)、细胞的几何形状等细胞内在因素决定的。此外流场切应力、pH、渗透压、温度等外部因素对红细胞变形也有影响,因此在作红细胞变形测量时,这些外部因素应加以控制。目前RCD测定方法很多,基本上可分为二大类:第一类利用红细胞悬浮液,间接地估计比较红细胞群体的平均变形性大小。如黏度测定法,反向旋转流变仪测定法,微孔滤过法,激光衍射法等;第二类是利用单个红细胞测定其变形能力和细胞膜的力学特征,如底面附差法,微吸管法,电子自旋共振频谱法等。国内应用最广的是粘性测定法和微孔筛滤法。
RCD的别名
红细胞变形性
RCD的医学检查
检查名称
RCD
分类
化验取材
血液
RCD的测定原理
(1)黏性测定法:人们早已熟知血液表观黏度随切变率升高而降低,在高切变率范围血液的表观黏度主要由RCD决定。RCD愈好,高切变率下表观黏度降低愈明显,因此可以通过测定血液表观黏度间接估计红细胞的变形性。
(2)微孔筛滤法:这是目前应用最广泛的测定RCD的方法,在正常情况下,RBC很容易通过比自己直径小的孔道,在病理状态下,由于RBC变形性降低,通过微细孔道的能力下降,微孔筛滤法就是采用测量红细胞通过滤膜上微孔(3~5μm)的能力来反映RCD。
Koutsouris等最近介绍了整个仪器装置如图1。该仪器的核心部分是核孔滤膜,其上有一直径为2.5mm,长约6~7cm的玻璃细管内装红细胞悬浮液,玻璃管的上端部装有二个光电传感器,两者相距8mm,并且与电动计时器相连。在膜下受到约10cm水柱的正压力。实验开始时,玻管中红细胞悬浮液之液面下降,计时器测出液面通过D1和D2的时程,此时程与流率有关,因而也与被滤过的液体量有关。当用一定浓度的红细胞悬浮液时.红细胞需要一定时间才能变形通过比它本身直径小的微孔。所以所需时程tg一定比只用悬浮液时的时程ts长。将滤过指数F.I定义为:
式中H为悬浮液的红细胞比容,F.I越高,表示红细胞的滤过能力越差,变形性降低。
试剂
(1)黏性测定法:在本测量方法中最好选用有较宽切变率范围的旋转式黏度计,其切变率最高应达到200s-1左右。采血方法和抗凝同黏度测量。
(2)微孔筛滤法:
①仪器:目前国内外均有商品化的滤过仪。国内有中国科学院高能物理所生产的CR-1型及上海医科大学生产的DXC-200型滤过仪。国外有英国生产的圣·乔治滤过仪,德国生产的MF4四导滤过仪,法国生产的SEFA Merythrocyter等,国外的滤过仪大多配有电脑,自动化程度较高。
②滤膜:微孔筛滤法中滤膜很关键,对膜孔大小和分布均匀程度均有要求,重孔率低(低于30%),孔的分布密度在4×105目/Cm2范围内,孔径3~5μm,膜的厚度约13μm,长度至少为10μm的垂直通道型多孔滤膜。
③抗凝剂:选用EDTA抗凝。
④悬浮介质:采用等渗的PBS和Tris-HCl缓冲液(pH7.4)均可。使用前以G2滤器过滤,以去除其中的微粒。
操作方法
(1)黏性测定法:用黏性测量法估计RCD可利用黏性方程,其方法是用旋转式黏度计测量高切变率下血液表观黏度,用毛细管黏度计测量血浆黏黏度,测红细胞压积,利用下列黏性方程计算TK值
ηr=(1-TKC)-2.5
变换形式 TK=(ηr0.4-1)/ηr0.4·C
式中ηr为悬浮液相对黏度,T为Taylor因子,K为红细胞群集指数,C为红细胞的体积浓度,常以压积代替。TK值可用来估计红细胞的变形性,在正常状态下TK值约为0.9。TK值越大表示RCD愈差。
黏度测定法的优点是一次测量可以获得关于红细胞群体变形性,但不易分辨红细胞变形时应力与应变之间的关系。
(2)微孔筛滤法:
①将血样于2000r/min离心10min,弃去血浆及血浆黄层,以悬浮介质洗涤3次,每次洗后于2000r/min离心5min,弃去上清液。
②取压紧的红细胞1∶9(V/V)加到悬浮介质中配成压积10%的RBC悬浮液备用。
③在加试样前使贮气瓶内保持1或2kPa负压。分别吸取悬浮介质或细胞悬浮液加入到带刻度的样品池内,分别测定在负压作用下流过滤膜的时间tg、ts,按公式计算红细胞滤过指数IF。
正常值
(1)粘性检测法:
①旋转式黏度计检测法:180s-1<1.00
②毛细管黏度计检测法:3.07~3.95
(2)微孔滤膜法:
①全血过滤法:0.19~0.39
②红细胞悬浮液滤过法:0.90~1.06
化验结果临床意义
升高:红细胞变形能力下降、血液流动性降低,见高血压、冠状动脉粥样硬化性心脏病v(冠心病)、脑卒中、高血脂症、糖尿病、肺心病、肝病、周围血管病、急性心肌梗死、休克、烧伤及某些血液病。
附注
(1)由于白细胞比红细胞体积大而且硬,易堵塞滤孔,影响测量结果,因此试样中残存的白细胞数应小于2.5×104/L。
(2)红细胞浓度也可影响测量结果,但许多研究证明,比容在5%~15%之间对结果影响不大,故建议比容选择在10%为宜。
(3)温度可影响RCD,滤过仪应有恒温控制,建议选择在37℃。
相关疾病
冠状动脉粥样硬化性心脏病、糖尿病、急性心肌梗死、烧伤