Wassermann补体结合试验
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概述
华(Wassermann)氏补体结合试验是一种临床化验检查项目、又叫华氏反应、化验标本为静脉血、参考值为阴性、阳性可见于梅毒患者、其他疾病如回归热、疟疾、红斑狼疮、瘤型麻风等也可呈阳性、某些梅毒患者也可始终呈阴性反应。
梅毒螺旋体属密螺旋体属苍白密螺旋体种梅毒亚种,是梅毒的病原体。密螺旋体属中的其他种包括品他密螺旋体(亦称斑点病密螺旋体)、奋森密螺旋体等十几种。苍白密螺旋体的另外两个亚种是雅司亚种和地方亚种;雅司亚种是雅司病(一种皮肤病)的病原体,地方亚种又叫非性病性梅毒螺旋体。齿垢密螺旋体和奋森密螺旋体是人口腔中的正常菌群,在免疫力低下或极度营养不良的个体,奋森密螺旋体可与厌氧菌共同引起坏疽性口腔炎或咽峡炎。屈曲密螺旋体在形态上不易与梅毒螺旋体区别,故在暗视野显微镜检查时应予以注意。品他密螺旋体亦是一种皮肤病(品他病)的病原体。
Wassermann补体结合试验的别名
梅毒血清补体结合试验;华氏补体结合试验
检查名称
Wassermann补体结合试验
分类
血清学检查 > 补体结合试验
Wassermann补体结合试验的原理
试验分两个阶段进行,先使试验系统中被检血清、已知抗体和定量补体作用一段时间,再加入指示系统(绵羊红细胞与溶血素)若被检血清中无已知抗原相对应的抗体,就不形成抗原抗体复合物,补体仍全部游离,则被指示系统的抗原-抗体复合物固定,使红细胞发生完全溶血,试验结果为阴性。反之,若被检血清中有已知抗原相对应的抗体,形成大量抗原抗体复合物,当补体全部被固定时,无游离补体存在,则红细胞完全不溶,试验结果为阳性。
试剂
(1)特异性抗原。
(2)被检血清(56℃灭活30min)。
(3)免疫血清、1.25%绵羊红细胞。
(4)补体(新鲜豚鼠血清,2个实用单位)。
(5)溶血素(抗绵羊红细胞抗体,2个单位)。
操作方法
溶血素单位:即能完全溶解红细胞的溶血素最高稀释度,按表1假定结果,1∶2400稀释度(0.1ml)的溶血素为1个单位。如实验时应用2个单位,即1∶l200稀释度(0.1ml)的溶血素溶液。
(2)补体滴定:将补体稀释成1∶30。按表2成分、次序、剂量加入各管中作滴定,整个试验过程中补体应放在冰水盒中,防止活性下降。
补体单位:即能发生完全溶血现象的最小补体量。按表2假定结果,1∶30补体0.12ml内含1个单位,则0.24ml含有2个单位。为使0.2ml中含有2个单位,可按下法计算稀释:
补体作1∶25稀释后,每0.2ml中含有补体2个单位。
(3)抗原滴定:
①将64支试管排方阵,即8行与8排。
②先作二倍稀释已灭活(56℃30min)的免疫血清,于第一排1~8各管中加1∶2稀释血清0.1ml,将1∶4稀释血清加至第二排1~8管中,如此二倍递增稀释血清加到第七排。第八排不加血清,以0.1ml盐水代替,作为抗原对照。
③同上法稀释抗原,第一行1~8各管中加1∶2稀释抗原0.1ml;第二行中1~8各管中加1∶4。稀释抗原0.1ml,如此,二倍稀释抗原加到第七行,第八行不加抗原,以0.1ml盐水代替,作为血清对照。
④在各对照管中补充盐水0.1ml。
⑤然后,再于每管中加入2U补体0.2ml,放置4℃冰箱16~18h,次日置37℃水浴箱中30min,各管中加入1.25%绵羊红细胞及溶血素(2U)各0.lml,再放置37℃水浴箱中30min。
⑥观察结果:如“4+”表示补体完全被检验系统所固定,呈现全不溶血;“-”表示补体完全未被检验系统固定,呈现完全溶血;在二者之间不同程度
者则以“3+”、“2+”、“+”、“±”表示之。
抗原单位:即能与最高稀释倍数的血清呈“3+”反应的抗原最高稀释倍数即为1个抗原单位。如表3所示,1∶8。试验时用2个单位,即1∶4。
(4)正式试验:
①排列试管12支,前8支管加入不同稀释度血清,检查抗体的有无及效价,后4支管作为对照,另取4支管作补体对照。
②按表4内容加入各种材料。
正常值
阴性。
化验结果临床意义
阳性:梅毒、雅司病。
附注
如为阴性而临床高度怀疑梅毒,可连续检查,每周1次,若4次阴性,可以排除梅毒。
相关疾病
梅毒、雅司病、非性病性梅毒、品他病