前列腺酸性磷酸酶
目录
概述
前列腺酸性磷酸酶(PAP)系由成熟的前列腺上皮细胞合成及分泌的糖蛋白(分子量100000),经前列腺管道进入精囊,由尿道排出。前列腺癌时,癌细胞产生的前列腺酸性磷酸酶由于无导管或腺体导管由癌细胞破坏,故直接被吸收入血循环,而导致血清前列腺酸性磷酸酶升高。
前列腺酸性磷酸酶的别名
PAP
前列腺酸性磷酸酶的医学检查
检查名称
前列腺酸性磷酸酶
分类
取材
血液
前列腺酸性磷酸酶的测定原理
前列腺酸性磷酸酶放射免疫分析利用前列腺酸性磷酸酶具有多个抗原决定簇,选用三个针对不同决定簇的单克隆抗体(一个用125I标志作为示踪,另两个是配体标记物用于提高灵敏度、特异性及分离复合物目的),在配体包被的聚乙烯反应管内,标准品/待测样品的前列腺酸性磷酸酶与单克隆抗体形成复合物,然后加入抗配体抗体使前列腺酸性磷酸酶与单克隆抗体复合物与固相支持物上配体连结,达到分离游离单克隆抗体的目的,测定反应管的放射性计数,即可推算前列腺酸性磷酸酶含量。本法使用固相支持物及分离剂可在多种类似方法中使用[如前列腺特异抗原(PSA)测定]为通用试剂,便于大规模生产及方法学的稳定。
试剂
本方法采用IRMA-Count前列腺酸性磷酸酶试剂盒,组成如下:
(1)125Ⅰ-PAP单克隆抗体:冻干品2瓶,内含125I标记的抗前列腺酸性磷酸酶单克隆抗体及配体标记的抗前列腺酸性磷酸酶单克隆抗体、防腐剂。使用前每瓶加入水11ml复原,放置10min后,充分混匀,呈黄色液体后使用,复原后2~8℃冰箱可保存30天(或至试剂瓶标明的失效期),每瓶放射性不超过275kBq。
(2)配体包被的聚乙烯管:100支,用锡纸袋密封包装。在冰箱内密封干燥可保存1年。
(3)抗配体抗体:1瓶(2.8ml)含防腐剂的蓝色液体。启封后在2~8℃冰箱内可保存30天。可直接用于实验。
(4)前列腺酸性磷酸酶标准品:7瓶(A~G)冻干标准品,内含人血清,缓冲剂及庆大霉霉素。使用前用水复原。A瓶加入5ml、B~G瓶分别加入2.0ml,放置至少30min,并充分溶解混匀方可使用,其前列腺酸性磷酸酶含量分别为0、1、2.5、5、15、75、150μg/L。复原后在2~8℃可保存30天,但应避免反复冻融。
(5)浓缓冲洗液:1瓶(40ml)内含缓冲剂,表面活性剂。使用前用水400ml稀释(最终体积440ml)后在2~8℃可保存6月。
操作方法
首先将包被的聚乙烯管依次编号,T管(1、2)用未经包被的聚乙烯管(12×75mm)代替,然后严格按操作程序(表1)操作:
正常值
参考值0~3μg/L。据报道178例除外前列腺疾病的男性,血清前列腺酸性磷酸酶水平99%范围上限1.8μg/L。
改良固相免疫酶法:<1.6μg/L(血清)。
化验结果临床意义
本法可用作前列腺癌的诊断、治疗效果及预后估价及转移性骨肿瘤鉴别
诊断。据报道伴骨转移的前列腺癌患者前列腺酸性磷酸酶升高者占80%。
部分良性前列腺增生患者血清前列腺酸性磷酸酶可升高,此时应临床判断及随访观察。近期前列腺直肠指检可引起血清前列腺酸性磷酸酶升高,因此宜于检查前或检查后2周采血测定。标本切忌溶血,否则亦可使测定结果异常。
附注
(1)本测定方法测定范围为1~150μg/L,最小可测值为0.03μg/L,MB/T为32%,NSB为0.05%。
(2)各实验室应建立自己质量控制血清。
(3)高浓度前列腺酸性磷酸酶标本可用A液(前列腺酸性磷酸酶为零的标准血清)作适当倍数稀释。
(4)反应结束后用稀缓冲洗液洗反应管的过程与实验灵敏度、重复性有关,同时应严格将洗液吸干。
相关疾病
前列腺癌、转移性骨肿瘤、前列腺增生