尿β半乳糖苷酶
目录
概述
β半乳糖苷酶是细胞溶酶体中的水解酶,在肾近曲小管上皮细胞中含量较高。尿中β半乳糖苷酶活性可反映肾实质,特别是肾小管的早期损伤,与尿中N-乙酰β-D-氨基葡糖苷酶一同测定作尿酶谱分析,有助于病程观察和预后评价。
尿β半乳糖苷酶的医学检查
检查名称
尿β半乳糖苷酶
分类
化验取材
尿β半乳糖苷酶的测定原理
对硝基苯-β-D-半乳糖苷在β-半乳糖苷酶(GAL)作用下释放出游离的对硝基苯酚,后者在405nm波长处有强吸收峰,测定对硝基苯酚生成量,即可计算GAL活性。GAL酶单位定义:37℃条件下,1L样品与底物作用1min,产生1μmol对硝基苯酚为一个GAL单位(U/L)。
试剂
(1)50mmol/L枸橼酸盐缓冲液(pH 4.6):称枸橼酸(C6H8O7·H2O)5.4g,枸橼酸三钠(Na3C6H5O7·2H2O)10g,用蒸馏水溶解后稀释至1000ml。
(2)10mmol/L底物缓冲液:称对硝基苯N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷342.3mg,用上述缓冲液稀释至100ml,混匀,4℃冰箱可保存10天。
(3)50mmol/L硼砂-氢氧化钠缓冲液(pH 9.8):称硼砂(Na2B4O7·H2O)4.77g,用蒸馏水溶解,加0.2mmol/L NaOH 170ml,再用蒸馏水稀释至1000ml。
(4)3mmol/L对硝基酚标准液:取纯化的对硝基酚41.7mg,用蒸馏水溶解并稀释至100ml,混匀后置冰箱保存。
操作方法
按表1操作。
混合,在405nm波长,1cm光径,蒸馏水调零,读取各管吸光度,用(Au-Ac)之差查标准曲线。
正常值
2.51~14.3iu/L。(比色法)
化验结果临床意义
尿中β半乳糖苷酶和N-乙酰β-D-氨基葡糖苷酶同属细胞溶酶体内的水解酶,主要来源于肾小管上皮细胞,因而对肾小管损伤和后天性肾脏疾患有较敏感的反应。在肾实质损伤的不同阶段,两者的排出率曲线有一定差异,用于酶谱分析,可有助于临床诊断和评价,如对各种肾病的鉴别诊断、药物对肾的毒性作用、感染、休克、肾移植排异反应、急性肾小管坏死等疾病的早期监测等,其是一项较好的指标。
附注
在遗传学领域中,对人类β-半乳糖苷酶缺陷病的诊断有重要的意义。